- MAR介导的逆转录病毒包装细胞系的建立
- 2010年
- 根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染PA317细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,提取病毒液上清,测定逆转录病毒颗粒滴度,逆转录病毒颗粒的最高滴度为1.6×106CFU/mL,成功建立了MAR介导的逆转录病毒包装细胞系。
- 张靖王天云张俊河杨保胜张继红
- 关键词：核基质结合区逆转录病毒载体
- 重叠延伸PCR合成血管内皮生长因子基因被引量：4
- 2010年
- 目的:重叠延伸PCR(OE-PCR)方法合成人血管内皮生长因子(VEGF)基因。方法:根据Genbank中人VEGF基因的编码序列合成15个寡核苷酸片段,相邻引物间均有19个碱基互补,经过7轮PCR循环扩增出人VEGF基因,并将其克隆至pMD18-Tvector,挑取3个重组质粒进行筛选并测序。结果:酶切和测序鉴定结果表明,其中一个与VEGF的同源性达到100%。结论:动态模板OE-PCR基因合成法成功获得576bp的VEGF全长DNA。
- 张继红张靖王俐杨保胜王天云
- 关键词：血管内皮生长因子重叠延伸PCR基因合成
