- Fas途径参与大黄酸诱导HK-2细胞凋亡被引量：11
- 2015年
- 探讨大黄酸对人肾小管上皮细胞系HK-2的毒性作用及毒性作用机制。以Hg Cl2为阳性对照,通过MTT法检测细胞活力,LDH释放实验检测细胞毒性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,Real-Time q PCR检测Fas,Fas L,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达,Western blot检测Fas,Fas L,胞浆Cyt-c,caspase-3,caspase-8,caspase-9蛋白表达。实验结果显示:大黄酸可剂量依赖性地抑制HK-2细胞活力,增加LDH释放和细胞凋亡率,使Fas,Fas L,FADD,caspase-3,caspase-8的mRNA表达显著性上调,Fas,Fas L,胞浆Cyt-c蛋白表达量显著升高,caspase-8原型表达显著降低,caspase-3,caspase-8裂解片段表达显著增加,caspae-9表达无变化。结果证明:大黄酸体外对HK-2细胞具有毒性作用,其毒性作用机制可能是通过Fas途径诱导HK-2细胞凋亡。
- 孙浩杨加培毛勇王丹丹于锋
- 关键词：大黄酸HK-2细胞细胞毒性FAS凋亡
- 大黄酸通过MAPK信号转导通路诱导HK-2细胞凋亡被引量：7
- 2015年
- 目的:研究大黄酸诱导人肾小管上皮细胞系HK-2细胞凋亡作用及其凋亡机制。方法:将密度为4×104个/m L的HK-2细胞悬液接种于96孔板,培养24 h后分别加入不同浓度大黄酸(0,25,50,100μmol·L-1)作用12,24,48 h,MTT法检测大黄酸对HK-2细胞活性的抑制作用;利用Hoechst 33258染色法和流式细胞术检测大黄酸诱导HK-2细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测细胞原癌基因c-jun,活化转录调控因子2(ATF-2),半胱天冬氨酸酶3(Caspase-3)基因表达水平;Western blotting检测细胞磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK),c-jun氨基末端激酶(JNK),磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK),p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和活化型半胱天冬氨酸酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白的变化,并利用JNK抑制剂SP600125,p38抑制剂SB203580进一步验证JNK和p38所介导的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在HK-2细胞凋亡中的作用。结果:大黄酸能够呈剂量依赖性和时间依赖性抑制HK-2细胞活性。大黄酸作用下HK-2细胞凋亡率明显增加。大黄酸作用于HK-2细胞c-jun,ATF-2及Caspase-3基因的mRNA均明显上调;p-p38,p-JNK及Cleaved Caspase-3蛋白表达显著性增加,JNK和p38总蛋白表达无明显变化。JNK特异性抑制剂SP600125与p38特异性抑制剂SB203580均能显著降低大黄酸诱导的HK-2细胞的凋亡率。结论:大黄酸能够诱导HK-2细胞凋亡,其作用机制可能是通过影响MAPK信号转导通路实现的。
- 杨加培孙浩王丹丹毛勇于锋
- 关键词：大黄酸HK-2细胞丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路C-JUN氨基末端激酶P38丝裂原活化蛋白激酶
- 缺血性脑卒中后小胶质细胞吞噬作用的研究进展
- 2023年
- 缺血性脑卒中是影响人类健康的重大疾病,目前有关它的病理机制并未完全阐明。小胶质细胞是中枢神经系统中重要的免疫细胞。缺血性脑卒中后,大量小胶质细胞激活,并向损伤区域迁移聚集,吞噬坏死的细胞或碎片,释放炎症因子或营养因子,参与了缺血性脑卒中的病理过程。其中小胶质细胞的吞噬作用在脑缺血损伤以及康复中发挥重要的作用。本文总结小胶质细胞吞噬作用的分子机制,并综述小胶质细胞吞噬作用在缺血性脑卒中的研究进展,探讨小胶质细胞吞噬作用在脑缺血损伤和康复中的多样性和复杂性,旨在为缺血性脑卒中的治疗和药物研发提供新的思路。
- 汪恒孙浩廖红
- 关键词：缺血性脑卒中小胶质细胞
- 诱导抑郁症患者小胶质细胞炎性反应的机制被引量：1
- 2024年
- 小胶质细胞炎性反应是抑郁症患者及相关动物模型中广泛观察到的病理现象,与抑郁症密切相关。抑郁症中诱导小胶质细胞炎性反应的机制包括下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴激活后糖皮质激素水平变化直接或间接的调控作用、肠道微生物代谢物通过脑肠轴中免疫与神经途径的作用以及损伤相关分子模式(DAMPs)对小胶质细胞的直接激活作用等。
- 张昊孙浩廖红
- 关键词：脑肠轴
- 评价大鼠离体肝灌流模型稳定性的方法被引量：1
- 2014年
- 以自建的大鼠原位循环肝灌流模型为研究模型，建立一套实用的模型稳定性评价方法。首先进行一般稳定性评价，包括肉眼观察肝脏形态，监测门脉压、灌流液pH，定时检测灌流液K^＋浓度、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，肝组织病理检查等；要求在整个灌流过程中肝脏色泽均匀，无斑块状改变，以门静脉压始终无骤变，稳定在8—14mmHg范围内，变化不超过0．5mmHg／30min，pH始终处于7．4～7．2。变化不超过0．1／30min，K^＋浓度无突然升高现象，灌流液中ALT、AST水平随时间无显著性变化，肝组织病理检查不出现除空泡性变以外的病变为标准，确定模型可维持稳定的时间。在满足一般稳定性的基础上，根据不同的研究目的对模型进行功能稳定性评估，要求研究所用的指标能在空白灌流组和阳性药灌流组之间体现显著性差异；本研究以药物肝损伤研究为例，以灌流液ALT、AST、LDH（乳酸脱氢酶）水平为指标，并进行肝组织病理检查，结果两组出现极显著性差异，故判定用所建立的灌流模型进行肝损伤研究可真实反映受试药的肝损伤情况，一般不会出现假阴性和假阳性结果。
- 丁露杨加培孙浩周旺于锋
- 关键词：异烟肼肝损伤
