刘智勇
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：湖南大学生物学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Nme2基因在畸形精子症中的作用分析
- 2016年
- 为了探讨Nme2(metastasis suppressor non-metastatic 2)基因在男性生殖中的作用,利用GEO(gene expression omnibus,GEO)基因芯片数据库对Nme2在精子发生中的表达情况进行数据挖掘和分析,通过MTT(5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)和PI-Hoechst实验构建过氧化氢诱导的GC-1 spg细胞氧化损伤模型,荧光定量PCR技术检测氧化损伤分子OGG1(8-oxoguanine DNA glycosylase),ALDH2(aldehyde dehydrogenase 2family)以及Nme2的表达。发现Nme2在不同类型生精细胞中差异性表达,在畸形精子中的表达显著降低;进一步研究发现Nme2在细胞氧化损伤过程中表达上调。结果表明Nme2与畸形精子症相关,其作用机制可能通过应答氧化损伤信号来实现。
- 刘晓雯吴道兵荣卓献刘智勇李丹
- 关键词：精子发生
- FBXO39基因对肿瘤细胞代谢分子的影响被引量：2
- 2016年
- FBXO39是F-box蛋白家族中的一员,研究表明该蛋白是一个新的候选肿瘤-睾丸抗原,可能与人类肿瘤的发生密切相关。为了探讨FBXO39基因的生物学功能,实验中首先检测了FBXO39在不同肿瘤细胞系中的表达水平,并通过分子克隆技术构建了FBXO39的真核表达载体,进而利用高通量的PCR array代谢组学分析方法在低表达FBXO39的MCF7细胞中筛选受FBXO39调节的代谢相关基因,最后采用定量PC R实验在低表达FBXO39的Ntera2细胞中验证筛选出来的代谢基因。结果显示,在MCF7和Ntera2肿瘤细胞中,6个代谢基因(ALDH9A1、MCT1、DLAT、HMGCS、FASN、GLUL)的表达受FBXO39的正向调控,表明FBXO39可能通过上调这些基因的表达参与肿瘤细胞的代谢过程。
- 刘智勇上官聪吴道兵刘晓雯赵婷李丹
- 关键词：F-BOX蛋白真核表达载体PCRARRAY
- SLC7A5对肿瘤细胞增殖的影响及其与转化生长因子-β1信号调控的关系被引量：4
- 2017年
- 目的:研究氨基酸转运载体基因SLC7A5(solute carrier family 7,member 5)在肿瘤细胞中发挥的生物学效应及其转录调控机制。方法:利用基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库分析SLC7A5在人正常组织和相应的肿瘤组织中的表达情况;构建SLC7A5基因的重组质粒,采用噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法、流式细胞仪技术检测该基因对肿瘤细胞增殖的影响;通过生物信息学方法分析SLC7A5基因启动子及其转录因子结合位点,构建该基因的启动子质粒,并利用荧光素酶报告基因系统、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对SLC7A5基因的表达调控。结果:GEO数据库分析显示SLC7A5的分布具有组织特异性,且在大多数的肿瘤组织中的表达水平明显高于相应的正常组织;MTT比色法、流式细胞仪检测结果表明SLC7A5具有促进细胞增殖的作用;通过启动子分析、载体构建、报告基因检测和RT-PCR实验证实TGF-β1可上调SLC7A5启动子的活性,从而促进该基因的表达。结论:SLC7A5基因在肿瘤细胞中发挥促癌作用,且受TGF-β1信号通路的调控。
- 赵婷李丹刘晓雯刘智勇吴道兵周世华段红艳
- 关键词：细胞增殖
- miR-199a-3p/Nme2在TGF-β1信号通路中的作用分析被引量：3
- 2016年
- 通过microRNA芯片技术在小鼠GC-1 spg细胞中筛选发现microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)受转化生长因子TGF-β1调节。为了进一步探讨二者的关系,通过基因克隆与载体构建技术、双荧光素酶报告基因检测及定量PCR实验,发现miR-199a-3p靶向识别肿瘤转移抑制基因2(Nme2)的3'非编码区(UTR)序列,且正向调控Nme2的表达。利用TGF-β1处理GC-1 spg细胞后,结果显示Nme2和miR-199a-3p在mRNA水平的表达均显著上调;进一步将miR-199a-3p和TGF-β1双重作用于GC-1 spg细胞后,结果表明Nme2的表达会明显增强,而且在TGF-β1通路中,miR-199a-3p被抑制的部分功能可能会被Nme2补偿。综上,miR-199a-3p对Nme2基因具有直接靶向识别和调控作用,且在参与TGF-β1信号通路的生物学效应中,二者在功能上相互关联。
- 刘晓雯吴道兵刘智勇周世华段红艳李丹
