丁琳
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：“十五”重点攻关项目黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 志贺样毒素Ⅱ型变异体B亚基单克隆抗体的制备被引量：5
- 2009年
- 为建立针对仔猪水肿病SLT-Ⅱe毒素的检测方法,应用PCR技术克隆SLT-ⅡeB基因,并将其克隆到原核表达载体pET-30a进行表达。以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,并利用淋巴细胞杂交瘤技术获得6株稳定分泌抗SLT-ⅡeB的单克隆抗体(McAb)细胞株,其抗体亚类包括IgM、IgA、IgG2b和IgG2a,而且轻链均为κ链。阻断ELISA结果显示,6株McAb均能特异性识别天然SLT-Ⅱe毒素。相加ELISA结果显示,3G7和4F3两株是针对不同抗原表位的McAb。
- 丁琳师东方付海兵于迪杨旭东单安山
- 关键词：仔猪水肿病单克隆抗体
- 猪水肿病大肠杆菌基因突变株的构建被引量：10
- 2007年
- 应用定点突变技术将野生型猪水肿病大肠杆菌（O139）主要毒力基因SLT—ⅡeA亚基中第167位谷氨酸和第170位精氨酸，分别突变为谷氨酰胺（E167Q）和亮氨酸（R170L）后，获得突变基因SLT—Ⅱe^＊。通过同源重组，将野生菌中的毒力基因SLT—Ⅱe替换为SLT．Ⅱe^＊，构建了一株毒力基因突变株（SLT-Ⅱe^＊）。实验结果显示，该突变菌株对Vero细胞的毒性是野生菌毒性的1／500.
- 付海兵丁琳杨春柳许亚卓师东方
- 关键词：猪水肿病大肠杆菌同源重组
- 志贺样毒素Ⅱ型变异体B亚基单克隆抗体的制备
- 本研究应用PCR技术扩增了SLT-IIeB基因，经序列测定。结果与参考序列的同源性达100％。将PCR产物克隆到原核表达载体pET-30a中，转化入大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG诱导表达。通过Ni离子亲和层析纯化...
- 丁琳
- 关键词：仔猪水肿病单克隆抗体原核表达
- 文献传递
- 产肠毒素大肠杆菌F5菌毛基因的克隆与表达被引量：2
- 2008年
- 应用PCR方法从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的F5菌毛抗原基因片段,克隆测序后将其连接到大肠杆菌表达载体pET-30a(+)中,转化工程菌BL21,经IPTG诱导表达。经SDS-PAGE和Western Blot分析,重组蛋白在BL21中得到表达并与F5菌毛单因子血清发生明显反应。
- 于迪付海兵丁琳师东方单安山
- 关键词：产肠毒素性大肠杆菌基因克隆蛋白表达
