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稳定转化家蚕细胞株滴定BmNPV法及报告基因构建法: 本发明公开了一种报告基因转化载体的构建方法，包括构建报告基因转移载体；PCR合成含多角体启动子及多聚腺苷酸加尾序列的报告基因表达盒；获得报告基因转化载体。本发明还同时公开了一种利用报告基因稳定转化家蚕细胞株测定家蚕BmN...; 陈健陈琴陈和于威张耀洲; 文献传递

一种红色荧光蛋白基因稳定转化的家蚕细胞株构建及应用: 2013年; 构建一种红色荧光蛋白基因稳定转化的家蚕细胞株,用于检测细胞是否被家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染和快速、便捷地测定BmNPV滴度。首先构建BmNPV多角体蛋白基因(polh)启动子驱动的红色荧光蛋白基因(DsRed)表达盒,然后将该表达盒克隆至pIZT/V5-His中构建稳定转化载体pIZT-DsRed并转染家蚕卵巢上皮细胞BmN,经过终浓度为300μg/mL的博莱霉素(zeocin)筛选3个月后,最终获得DsRed稳定转化的家蚕细胞株BmN-RFP。当该细胞株感染BmNPV后,由于病毒晚期表达因子的活化引发polh启动子控制的DsRed表达,在荧光显微镜下可以观察到感染病毒的细胞发出红色荧光,因而BmN-RFP可用来指示BmNPV的感染。利用BmN-RFP细胞株,采用终点稀释法仅用3 d时间即可完成BmNPV滴度的测定。; 陈和陈琴梅文枫钱月忠聂作明于威陈健张耀洲; 关键词：红色荧光蛋白家蚕核型多角体病毒病毒滴度

报告基因稳定转化BmN细胞测定BmNPV滴度方法的建立: 杆状病毒滴度的测定对于杆状病毒的研究具有重要意义。由于传统病毒滴度测定方法存在一定不足，因此，本研究拟建立一种通过报告基因稳转BmN细胞来快速、便捷、准确地测定BmNPV滴度的方法。本方法的基本原理是通过稳定转化的方法将...; 陈和; 关键词：杆状病毒报告基因; 文献传递

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陈和