张培培
- 作品数：11 被引量：19H指数：2
- 供职机构：广东省微生物研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学农业科学更多>>
- 微生物对三苯基甲烷类染料脱色的研究进展被引量：16
- 2009年
- 三苯基甲烷染料广泛应用于纺织印染、医药、生物染色、造纸、皮革、食品及化妆品等领域,常见的有作为抗菌剂的孔雀石绿和结晶紫等。由于其特殊的化学结构,在环境中较稳定且难以降解脱色,因此其生物脱色降解的研究可为印染废水处理和染料污染环境的生物修复提供理论依据。本文从细菌、放线菌、真菌及藻类等微生物对三苯基甲烷类染料降解脱色研究新进展做综述。通过分析不同微生物脱色三苯基甲烷类染料的中间产物来探讨其降解机理和降解途径,同时论及功能酶的分离纯化、酶学特性及其编码基因的克隆表达新进展,并分别从基础理论和应用两方面对微生物降解三苯基甲烷类染料未来的研究方向进行了展望。
- 张培培任随周许玫英孙国萍
- 关键词：微生物脱色降解
- 脱色酶TpmD在大肠杆菌中的高效表达及纯化
- 2009年
- 用PCR方法从嗜水气单胞菌DN322基因组中扩增出编码三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD的基因,与表达载体pET-22b(+)连接构建成重组质粒pET22-tpmD,转化大肠杆菌BL21(DE3)得到重组工程菌株.结果表明,经IPTG诱导,脱色酶基因可高效表达,粗酶液降解结晶紫、孔雀石绿、碱性品红、灿烂绿的比活力达到569.5,386.9,516.1,273.0U/g.表达产物经Ni-NTA亲和层析法一步纯化,蛋白纯度达94.05%.对4种染料的比活力分别达到1075.3,1042.8,903.9,484.3U/g,重组质粒稳定存在于工程菌中,便于规模化发酵生产.
- 陈亮任随周张培培许玫英孙国萍
- 关键词：脱色酶纯化
- 脱色酶TpmD在毕赤酵母中的表达、纯化及重组酶酶学性质研究
- 脱色酶TpmD是从嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)DN322中分离纯化的、能对多种三苯基甲烷类染料进行高效脱色的新型氧化酶。为了实现脱色酶TpmD在工业上的大量生产及进行酶制剂的开发研究以应用于三...
- 张培培
- 关键词：染料废水酶学性质基因克隆
- 金黄短杆菌AN3及其降解孔雀石绿等染料的应用
- 本发明涉及新菌株金黄短杆菌(Brevibacterium aureum)AN3 CGMCC No.2193，以及其在降解孔雀石绿等三苯基甲烷染料、偶氮染料方面的应用。本发明的金黄短杆菌AN3从广州某研究所处理印染废水的厌...
- 任随周孙国萍曾国驱陈亮张培培卫晋波陈进林
- 文献传递
- 一种转基因毕赤酵母工程菌株及其构建方法
- 本发明公开了一种转基因毕赤酵母工程菌株及其构建方法，旨在提供一种安全的能将苯基甲烷类染料脱色酶大量胞外分泌表达的工程菌株。本发明的技术方案是从嗜水气单胞菌DN322克隆三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD基因；将三苯基甲烷类染...
- 孙国萍张培培任随周许玫英
- 文献传递
- 一种新的三苯基甲烷类染料降解机理的研究
- 从处理印染废水的活性污泥中分离得到了两株能够高效降解三苯基甲烷类染料的微生物菌株 DN322和 AN3,并进一步从菌株 DN322中分离纯化得到了三苯基甲烷类染料降解酶 TpmD,降解酶 TpmD 是一个酶学性质特殊的新...
- 任随周陈亮张培培王亚丽郭俊孙国萍
- 文献传递
- 水产养殖环境中孔雀石绿污染的生物降解研究
- 水产养殖环境中难降解的药物孔雀石绿残留污染是严重影响水产养殖及水产品加工、销售和出口产业最突出的药物残留问题之一。针对孔雀石绿造成的污染养殖水体的生物修复是一个与食品安全密切相关的全新课题。本项目将利用前期得到的对孔雀石...
- 任随周陈亮张培培江永明许国焕孙国萍
- 文献传递
- 一种转基因毕赤酵母工程菌株及其构建方法
- 本发明公开了一种转基因毕赤酵母工程菌株及其构建方法，旨在提供一种安全的能将苯基甲烷类染料脱色酶大量胞外分泌表达的工程菌株。本发明的技术方案是从嗜水气单胞菌DN322克隆三苯基甲烷类染料脱色酶TpmD基因；将三苯基甲烷类染...
- 孙国萍张培培任随周许玫英
- 文献传递
- 金黄短杆菌AN3及其降解孔雀石绿等染料的应用
- 本发明涉及新菌株金黄短杆菌(Brevibacterium aureum)AN3 CGMCC No.2193，以及其在降解孔雀石绿等三苯基甲烷染料、偶氮染料方面的应用。本发明的金黄短杆菌AN3从广州某研究所处理印染废水的厌...
- 任随周孙国萍曾国驱陈亮张培培卫晋波陈进林
- 文献传递
- 有机溶剂和抑制剂对毕赤酵母表达TpmD酶活性影响被引量：3
- 2009年
- 【目的】本文在利用毕赤酵母成功分泌表达高活性三苯基甲烷类染料降解酶TpmD的基础上,研究不同有机溶剂和常见酶抑制剂对纯化后的重组脱色酶TpmD活性的影响。【方法】将毕赤酵母分泌表达的重组酶TpmD经超滤浓缩及镍离子亲和层析柱纯化后得到纯化的重组TpmD酶。利用分光光度计法测定其对孔雀石绿脱色活性,并研究了各种有机溶剂和抑制剂对TpmD酶脱色活性的影响。通过脱色过程溶氧测定和全波长扫描分析反映了DTT与NADH作为TpmD辅因子时对孔雀石绿脱色反应的表观区别。【结果】甲醇对酶活性抑制作用较弱,重组酶在甲醇中能维持约90%的活性,乙醇和丙酮则使重组酶活性则迅速丧失。低浓度二甲基亚砜有利于重组酶活性的维持,30%的二甲基亚砜可抑制一半以上酶活性。L-半胱氨酸、叠氮化钠及低浓度的EDTA对重组酶活性影响较小,较高浓度的EDTA才显示较强抑制作用;表面活性剂SDS有强烈的抑制作用,极低的浓度也能完全抑制重组酶活性。抗氧化剂二硫苏糖醇(DTT)对重组脱色酶的作用十分独特,它可替代NADH辅助脱色反应并增加脱色速率,但在反应终点脱色总效率约为NADH作为辅酶时的92%。DTT辅助TpmD脱色孔雀石绿过程中的耗氧情况及脱色产物与NADH作为辅酶时明显不相同。【结论】发现不同有机溶剂和常见抑制剂对重组酶活性的影响存在较大差异,首次证实DTT能辅助TpmD脱色反应,这一脱色反应过程的作用机理与NADH为辅酶催化的反应原理完全不同。
- 张培培任随周许玫英孙国萍
- 关键词：有机溶剂抑制剂二硫苏糖醇
