郑进峰
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 环形泰勒虫TaSP基因的克隆、原核表达及PCR诊断方法的建立
- 牛环形泰勒虫病又称热带泰勒病，是由泰勒科泰勒虫属的环形泰勒虫感染牛引起的一种以高热、贫血、出血和体表淋巴结肿大为主要临床症状的蜱传性血液原虫病。本病流行区域广泛，是危害牛最严重的寄生虫病之一。环形泰勒虫的裂殖体表面蛋白/...
- 郑进峰
- 关键词：环形泰勒虫PCR
- 文献传递
- 四种蜱源MIF基因的原核表达及表达产物的反应原性分析
- 2013年
- 为研究不同蜱源巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因的生物学特性,本研究设计了1对特异性引物,采用PCR从亚洲璃眼蜱、青海血蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱中扩增MIF基因的完整阅读框,并对该序列一级结构特征进行分析。PCR产物经BamHⅠ+EcoRⅠ双酶切后亚克隆到表达载体pGEX-4T-1上,重组质粒转入感受态细胞BL21(DE3),37℃下用1mmol/L IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析MIF基因体外的表达特征;接着用亚洲璃眼蜱全蜱血清与四种不同蜱种MIF重组蛋白进行Western-blot分析。结果显示,MIF基因完整阅读框全长351bp,编码116个氨基酸。氨基酸比对结果显示,亚洲璃眼蜱、青海血蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱MIF基因推导的氨基酸序列与已知的长角血蜱MIF基因推导的氨基酸序列相似性分别为98%、93%、93%、92%。SDS-PAGE结果显示,诱导的MIF重组蛋白的分子质量约为38.5ku。亚洲璃眼蜱全蜱血清与亚洲璃眼蜱MIF重组蛋白有较强的反应原性,且该血清与青海血蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱MIF重组蛋白存在交叉反应。结果表明,蜱MIF是一种良好的抗原分子。
- 袁小松罗金谢俊仁田占成田美媛郑进峰王芳芳张以芳刘光远
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子原核表达
- 长角血蜱MLC基因的原核表达及表达产物的免疫原性分析被引量：1
- 2012年
- 为了解长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)肌球蛋白碱轻链(MLC)基因表达产物的免疫学活性,利用RT-PCR方法扩增了长角血蜱MLC基因的完整开放阅读框,将该基因连接到原核表达载体pGEX-4T-1中进行表达,在37℃、1.0mmol/L IPTG诱导条件下,用SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况。结果表明,该重组蛋白的表达分子质量为44ku。Western-blotting结果显示,MLC蛋白能被兔抗长角血蜱成蜱阳性血清识别,表明MLC蛋白具有良好的反应原性。
- 田美媛田占成谢俊仁罗金沈辉袁小松郑进峰王芳芳曾巧英刘光远
- 关键词：长角血蜱原核表达免疫原性
- 环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因PCR诊断方法的建立被引量：10
- 2014年
- 为寻求一种快速灵敏的环形泰勒虫病PCR检测方法,基于环形泰勒虫裂殖体表面蛋白(Theirelia annulata surface protein,TaSP)基因序列保守区设计特异性引物,通过PCR技术扩增出该基因长为393bp的高免疫原性区片段。用该引物对环形泰勒虫、中华泰勒虫、瑟式泰勒虫、尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、马泰勒虫、驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫基因组模板进行特异性试验,对环形泰勒虫基因组模板进行梯度稀释后扩增,以确定试验的敏感性,同时用本试验建立的方法与常规显微镜镜检方法对150份血清样品进行检测。特异性试验结果显示,在被检测的9个样本中,只有环形泰勒虫基因组模板中扩增出了符合大小的特异核苷酸片段;敏感性试验结果表明,PCR对环形泰勒虫的扩增效率可达到10-10;通过对150份血清样品的检测,并与血涂片方法进行比较,结果显示PCR方法具有特异性强、敏感度高等特点,适用于牛环形泰勒虫病的检测。
- 郑进峰罗金谢俊仁田美媛袁小松王芳芳郭锦霞李奎刘光远
- 关键词：环形泰勒虫PCR诊断方法
