杨玉琴 作品数:16 被引量:29 H指数:3 供职机构: 上海市公共卫生临床中心 更多>> 发文基金: 上海市科学技术委员会资助项目 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
MRSA气溶胶诱导烫伤SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型 2013年 目的探讨烫伤条件下,建立MRSA气溶胶致SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型的方法及其评价指标。方法 48只SKH-1无毛小鼠,随机分成PBS对照组,单纯感染组和烫伤合并感染组。合并感染组小鼠皮肤烫伤后,MRSA(ST-239)气溶胶呼吸道感染,采用体重、血常规、菌血症率、皮肤和脏器荷菌量、病理组织学变化和分子生物学等指标对模型进行综合评价。结果与其他两组相比,合并感染组小鼠第3天体重下降明显;白细胞数显著增多;菌血症率达100%;皮肤和肺荷菌量较高,分别达108CFU/g和106CFU/g;镜下观察皮肤和肺炎症病变明显;免疫组化结果显示皮肤组织内CD138呈阳性表达;multi-PCR测定感染组织内nuc和mecA基因均为阳性。结论 SKH-1无毛小鼠烫伤再辅以MRSA气雾攻击的方式,可成功建立能够模拟临床上烧烫伤患者继发MRSA肺炎的动物模型,此模型对于抗MRSA药物药效评价研究具有重要临床应用价值。 刘巧玲 朱萍妹 杨玉琴 刘芳 陈颖 周文江 周光兴关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 气溶胶 烫伤 肺炎 东方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立 被引量:8 2013年 目的建立东方田鼠非酒精性脂肪肝模型,并观察测定其肝指数、病理、血清生化指标的动态变化。方法选取6周龄湖南洞庭湖种群雄性东方田鼠70只,随机分为2组,模型组饲喂高脂肪料,对照组饲喂高纤维料,分别于第2、4、6、8、12周处死,称量体重及肝重,计算肝指数,采血检测东方田鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰转移酶(r-GT)、胆碱酯酶(CHE)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL),并取肝脏HE染色后做病理学观察。结果与对照组相比,模型组6周时肝脏出现了典型的脂肪肝特征,肝重和肝指数都明显升高(P<0.05),血清ALT、AST、r-GT、CHE、TC、FFA、GLU和LDL都明显升高(P<0.05),HDL和TG均明显降低(P<0.05)。镜检观察到模型组田鼠肝细胞逐渐呈现弥漫性脂肪变性,6周时大范围出现脂滴,8周时肝内出现弥漫性大脂肪滴,12周后出现炎细胞的浸润。结论采用高脂饲料成功诱发东方田鼠非酒精性脂肪肝,可为研究非酒精性脂肪肝的发病机制和药物干预提供新的模型。 杨玉琴 冯洁 柏熊 沈志敏 刘雄伟 高捷 谢建云 胡建华 高诚关键词:东方田鼠 非酒精性脂肪肝 PEPCK不同启动子调控报告基因表达效率的比较 2010年 目的构建两种不同的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因启动子调控报告基因表达质粒,比较该启动子在各种细胞系中的表达效率。方法采用PCR克隆大鼠PEPCK启动子1323 bp和560 bp两条片段,将两个PEPCK启动子片段插入pGL4.26-Luc2报告质粒中,将重组质粒转染到肝脏细胞系和脂肪细胞系,以非脂肪或肝脏细胞系做对照,比较PEPCK驱动荧光素酶表达效率。结果通过酶切鉴定及基因测序,证明pGL4.26-PEPCK-Luc2荧光素酶表达质粒构建成功,且能够在体外表达荧光素酶。结论两种同片段的PEPCK启动子在各细胞系中的表达效率差异无显著性。 王学斌 冯洁 杨玉琴 谢建云 陈国宏关键词:重组质粒 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 H1N1流感与H7N9禽流感感染BALB/c小鼠发病特点初步研究 被引量:3 2014年 目的本实验旨在初步探讨A/Shanghai/4664T(H7N9)和A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒感染BALB/c小鼠的发病特点,为H7N9致病机制与防治的研究提供数据支持。方法将同等剂量(5×103TCID50)流感病毒滴鼻感染BALB/c小鼠,分析其在感染后体重、肺指数、病毒载量和肺组织病理的变化情况。结果 H1N1PR8感染组和H7N9感染组小鼠在7 d内体重均持续减低,H1N1 PR8组较H7N9组降低更为明显;在感染后3 d H7N9组与PBS组肺指数无显著差异(P>0.05),但感染后7d H7N9组与PBS组相比显著增高(P<0.05);H1N1PR8组比H7N9组感染后3 d肺指数显著增高(P<0.05),但感染后第7天无显著差异(P>0.05)。H1N1 PR8组和H7N9组病毒载量在感染后第3天均显著升高,但两组无显著差异;第7天两组病毒载量均有所降低,但H7N9组病毒载量显著高于H1N1 PR8组(P<0.05)。H1N1 PR8在感染后3 d主要病理变化为炎症细胞浸润和水肿,而H7N9组主要轻度炎症细胞浸润;在感染后7 dH1N1 PR8组可见大量炎症细胞浸润,出现大面积肺水肿;H7N9组表现为大量炎症细胞浸润。结论 H7N9和H1N1 PR8感染BALB/c小鼠均可发病,但发病特点有所差异,H7N9病毒对鼠的适应性比H1N1 PR8差。 杨玉琴 徐春华 朱召芹 田棣 陈丽香 杨华 秦波音 宋志刚 管文彩 刘祎 蔡家麟 周晓辉 周文江关键词:H1N1 BALB C小鼠 一种生物安全罩 本实用新型属生物实验室设备技术领域,涉及一种医学和兽医实验室用,气溶胶设备的生物安全罩。所述生物安全罩,包括内置气溶设备的操作室和与所述操作室相邻的排风隔离室,其特征在于:所述排风隔离室顶部置有管道与排风机组连接,排风机... 周文江 刘芳 杨玉琴 曹明波 范小勇 杨华 沈艳 秦波音 彭秀华 徐春华文献传递 三个品系小鼠流感病毒气溶胶感染模型的比较 被引量:3 2016年 目的通过气雾攻击产生气溶胶的感染方式对三个品系的小鼠分别进行感染,比较三个品系小鼠在感染过程中的感染差异,从而对三个品系小鼠流感模型的特点进行分析,为流感发病机制的研究及疫苗和药物的开发选择合适的感染模型提供参考。方法选用A/Puerto Rico/8/34(H1N1)病毒株,采用气雾攻击的方法感染近交系C57BL/6、BALB/c和远交群ICR三个品系的小鼠,每日称小鼠体重,肉眼观察小鼠状态,分别于感染后3、7、14 d处死小鼠,取肺脏称其湿重,进行肺脏的病毒测定及病理观察。结果三个品系小鼠均可感染,其中C57BL/6小鼠的存活率低于其他两个品系,3 d的肺指数和病毒载量均明显高于ICR小鼠(P<0.05),镜下病理结果显示较其他两个品系也更明显。BALB/c小鼠与其他两个品系小鼠相比,体重在后期的恢复最慢,存活率比C57BL/6高但比ICR低;肺指数和病毒载量与其他两个品系相比差异无显著性;镜下病理改变相似,但弱于C57BL/6强于ICR。ICR小鼠的发病进程与其他两个品系小鼠基本相似,但体重、存活率、肺指数、病毒载量及镜下病理改变等指标均弱于其他两个品系。结论三个品系小鼠均可建立流感气溶胶模型,但感染后的三个模型各有特点,在实验中可以根据不同的研究目的来选用合适的小鼠品系建立模型。 杨玉琴 徐春华 朱召芹 胡芸文 周文江关键词:气溶胶 流感病毒 小鼠 东方田鼠三个脂肪肝相关基因的克隆及分析 被引量:1 2010年 目的克隆CYP2E1、CYP2D5、ECHS1三个与非酒精性脂肪肝可能相关基因的cDNA全长基因,为进一步研究非酒精性脂肪肝的发病机制提供依据。方法利用SMART技术构建东方田鼠肝脏cDNA质粒文库,通过PCR方法筛选文库,获得目的菌落,用pBluescript Ⅱ SK通用引物M13R测序,获得基因全长序列,并进行序列分析比较。结果筛选了CYP2E1、CYP2D5、ECHS1三个基因,并获得了它们的全长cDNA序列:CYP2E1基因cDNA全长为1685bp,有1482 bp的完整开放阅读框,编码494个氨基酸;CYP2D5基因cDNA全长为1690 bp,有1514 bp的完整开放阅读框,编码504个氨基酸;ECHS1基因cDNA全长为1013 bp,有873 bp的完整开放阅读框,编码290个氨基酸。这三个基因的核酸序列及其推测的氨基酸序列与人、大小鼠序列高度同源。结论获得了东方田鼠CYP2E1、CYP2D5、ECHS1三个基因全长cDNA序列,并已在Genbank中登录(GQ507485、GQ507486、GQ845171),为东方田鼠非酒精性脂肪肝模型的研究奠定了基础。 杨玉琴 冯洁 王学斌 谢建云 高诚 胡建华关键词:东方田鼠 CDNA序列 非酒精性脂肪肝 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌诱导SKH-1无毛小鼠菌血症模型 被引量:4 2011年 目的建立SKH-1无毛小鼠感染MRSA致菌血症模型的方法及其评价体系。方法 62只SPF级SKH-1无毛小鼠随机分成PBS对照组、低剂量模型组、高剂量模型组及给药组,尾静脉注射无菌PBS至对照组小鼠体内,其余各组小鼠尾静脉注射相应剂量MRSA(ST-239)菌悬液,从体重、死亡率、血常规、血液细菌浓度、主要器官荷菌量及病理改变等方面对模型进行评价,并用抗生素替考拉宁对模型进行检验。结果各组感染小鼠体重均下降明显,血常规指标改变明显;高剂量组死亡率高,血液中细菌浓度较高,肝、肾等多组织器官播散严重,皮肤可见多发性脓肿灶;使用替考拉宁能显著降低小鼠死亡率,减轻主要器官的损伤程度。结论应用MRSA菌株可成功诱导建立SKH-1无毛小鼠菌血症模型,模型具有病理特征明显及观察简便的优点,为相关药物评价研究提供了一个理想的动物模型。 陈雪雨 彭秀华 杨玉琴 周文江 周光兴关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 菌血症 东方田鼠肝脏cDNA文库的构建及部分克隆序列分析 2009年 The plasmid cDNA library from the liver of Microtus fortis was constructed by using SMART technology. The titers of this cDNA library were 1076 pfu /μL,the recombination rate was about 94%,the library capacity was 1.08×106. 22 cDNAs chosen at random were sequenced. After BLAST analysis of these sequences,it was found that these cDNAs showed more than 75% similarity to the functional known genes of mice,rats and humans in the Genbank. The cDNA library was very important to the research of fatty liver-related gene screening and clones. These provided a base for further study on the molecular biology,fatty liver model development and pathogenesis research of Microtus fortis. 冯洁 谢建云 孙强 杨玉琴 胡建华 高诚关键词:CDNA文库 东方田鼠 肝脏 采用小动物活体荧光成像对胃癌皮下和原位移植肿瘤生长的动态观察 被引量:3 2011年 目的 采用小动物活体荧光成像系统对裸小鼠皮下和原位移植MKN-45-Luc胃癌细胞组织瘤块后,进行肿瘤生长的动态观察.方法 将转染Luc的MKN-45胃癌细胞接种于裸小鼠皮下,成瘤后取瘤块分别接种于裸小鼠的皮下和胃部,并用活体荧光成像系统定期监测MKN-45-Luc细胞在小鼠体内成瘤的动态变化过程.结果 从第1~5周,随着肿瘤移植时间的增加,皮下和原位瘤所表达荧光素酶的面积逐渐增大,荧光光子数也逐渐增加,移植瘤体积、荧光面积与荧光光子数成正相关(r=0.882,P<0.001).5~6周时移植瘤体积、荧光面积与荧光光子数无相关性.结论 采用活体荧光成像系统能非常完整地观察活体动物体内胃癌的生长及转移过程.为研究MKN-45胃癌生长的生物学特性提供依据. 彭秀华 沈艳 徐春华 杨玉琴 周文江关键词:胃癌 荧光素酶