闫伟
- 作品数：60 被引量：144H指数：8
- 供职机构：吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项吉林省科技厅重大项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 转基因作物中常见Bt基因PCR检测方法的建立被引量：1
- 2017年
- 建立基于常见外源基因的转基因成分检测方法是开展转基因生物监测与检测活动的技术支撑,Bt基因作为目前商业化应用最广泛的一类外源基因,已成为转基因产品筛选检测的重要靶标。依据转基因作物中常见的6种Bt基因(cry1F、cry1C、cry1Ie、cry34Ab、cry35Ab、vip3A)的核苷酸序列设计特异性PCR引物,并经过特异性、灵敏度等一系列测试,建立上述6种Bt基因的定性PCR检测方法。结果显示,应用这些方法均可从含有相应Bt基因的样品中正确检测出预期转基因成分,方法的灵敏度可达0.10%。上述方法具有特异性强、灵敏度高等特点,适用于转基因作物中常见Bt基因的筛选检测。
- 邵改革闫伟夏蔚李葱葱龙丽坤李飞武
- 关键词：转基因作物BT基因
- 转基因大豆MON87769的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种转基因大豆MON87769的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由6条特异性引物组成，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1~6所示。检测试剂盒包括检测引物溶液、具有链置换活性的DNA聚合酶、10×...
- 李飞武闫伟夏蔚邵改革龙丽坤李葱葱刘娜董立明邢珍娟张明
- 文献传递
- 分子标记技术在大豆遗传育种中的应用被引量：2
- 2009年
- 大豆是世界上重要的经济与粮食作物,大豆研究一直受到人们的广泛关注,但与玉米、水稻等作物相比,其研究进展十分缓慢。20世纪80年代末,DNA分子标记技术的出现,大大提高了遗传育种效率。本文从大豆遗传图谱的构建、遗传多样性研究、数量性状基因分析、分子标记辅助育种等四个方面概述了分子标记技术在大豆遗传育种中的应用情况。
- 姚丹闫伟张扬关淑艳王丕武
- 关键词：大豆分子标记遗传育种
- 蛋白质组学方法评估转基因抗虫玉米非预期效应被引量：3
- 2017年
- 【目的】转基因育种是将对人类有益的外源基因通过生物技术整合进受体植物的基因组中,使其获得通过自然进化无法获得优异性状,这是转入外源基因的"预期效应"。然而,外源基因插入受体植物还可能产生无法控制和预期的细胞、代谢或表型等方面的改变,即"非预期效应"。非预期效应是转基因植物安全评价的核心内容之一,也是近年来研究的热点和难点。本研究以抗虫转基因玉米为材料,利用差异蛋白质组学技术比较研究转基因玉米与其非转基因玉米之间的非预期效应,为蛋白质组学技术解析转基因植物非预期效应提供理论参考。【方法】选取4份已经进入中国农业部安全评价阶段转苏云芽孢杆菌(Bacillus thuringeinsis,Bt)内毒素基因的抗虫玉米材料,即SK12-5zd、IE034z、Bt799z、Bt799zd,以及它们的对照玉米材料郑单958和郑58,分别种植于可控人工温室中。待玉米幼苗生长至5叶1心期时,每份材料取长势一致的6个单株最上部完全展开叶片,混合作为一个样本进行取样,并提取叶片蛋白质。双向电泳技术分别分离4种转基因玉米和它们各自对应的非转基因材料高丰度蛋白质组,利用Image Scanner扫描仪扫描脱色后的蛋白质凝胶,PD Quest 8.0软件(Biorad,USA)分析蛋白质凝胶图谱,以蛋白点相对体积(%Vol)来表述每一个匹配蛋白质的表达丰度,将电泳凝胶上特异性蛋白质和相对体积大于2倍的差异蛋白质点取样,依据相应蛋白质数据库进行质谱鉴定,并对鉴定出的特异性和差异性蛋白质进行细胞功能富集分析(GO)和代谢途径富集分析(KEGG),以评价转基因抗虫玉米的可能非预期效应。【结果】通过比较4种不同转基因抗虫玉米及其非转基因对照的高丰度蛋白质组,除目标抗虫基因外,共鉴定出61个蛋白质,其功能主要是富集于光合作用、碳固定、能量转运等基础细胞功能相关酶类,如核酮糖二
- 郝文媛郝文媛李飞武闫伟李葱葱郭长虹
- 关键词：转基因玉米蛋白质组学双向电泳差异表达蛋白
- 转基因大豆MON87708的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种转基因大豆MON87708的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由4条特异性引物组成，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1~4所示。检测试剂盒包括检测引物溶液、具有链置换活性的DNA聚合酶、10×...
- 李飞武邢珍娟闫伟邵改革夏蔚李葱葱董立明龙丽坤刘娜张明
- 文献传递
- 转基因大豆MON87705的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种转基因大豆MON87705的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由5条特异性引物组成，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1~5所示。检测试剂盒包括检测引物溶液、具有链置换活性的DNA聚合酶、10×...
- 李飞武闫伟邢珍娟李葱葱刘娜龙丽坤邵改革夏蔚董立明张明
- 文献传递
- 应用简并PCR方法检测转cry1A基因作物被引量：6
- 2018年
- 根据不同转基因作物中cry1A基因的保守区序列,建立简并聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对转cry1A基因作物检测方法。cry1A基因(包括cry1Ab、cry1Ac、cry1Ab/Ac、cry1A.105、mcry1Ac)是抗虫转基因作物中使用频次最高的目的基因,常用作转基因成分筛选检测的靶标。应用Vector NTI Advance 11.5软件将已报道的20余种cry1A基因PCR检测方法中的引物与11个cry1A基因序列进行比对,结果显示,这些方法的引物序列不能同时与所有cry1A基因序列完全配对,每对引物的错配碱基数均大于3个,且许多错配发生在引物的3’端,表明这些cry1A基因检测方法理论上仅适用于部分特定的靶标基因。在对MON810、Bt11、Bt176等11种转基因作物中cry1A基因核苷酸序列进行比对分析基础上,以其5’端的保守核苷酸序列为模板,筛选到1对简并引物,建立了cry1A基因的简并PCR方法。应用该方法能特异性地检测11种转基因作物中的cry1A基因,检测灵敏度可稳定达到0.1%。该方法为转基因作物中cry1A基因的高效筛选检测提供了一种新的技术手段。
- 李葱葱闫伟夏蔚董立明龙丽坤李飞武
- 关键词：抗虫性简并PCR
- 转基因植物中cry34Ab基因的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种转基因植物中<i>cry34Ab</i>基因的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由4条特异性引物组成，其核苷酸序列如SEQ？ID？NO：1~4所示。检测试剂盒包括检测引物...
- 李飞武董立明闫伟夏蔚邵改革李葱葱邢珍娟刘娜
- 文献传递
- 四重PCR结合全自动电泳系统检测食品转基因成分被引量：2
- 2014年
- 根据转基因食品中最常见的四种外源元件(CaMV35S启动子、NOS终止子、cry1Ab/cry1Ac基因、bar基因)的核苷酸序列,设计特异性检测引物,扩增产物大小分别为101、180、301、430bp,通过引物浓度、退火温度的优化,特异性、灵敏度测试,并结合微流体芯片全自动电泳技术,建立了同时检测这4个参数的四重PCR方法。结果表明,该方法可特异性地从复杂样品中检测出预期转基因成分,检测灵敏度达到0.1%。本方法特异性好,灵敏度高,适用于食品中转基因成分的快速筛查。
- 邵改革闫伟董立明韩舜愈李飞武张明
- 关键词：转基因生物多重PCR
- 应用单管半巢式PCR技术筛查转基因食品被引量：8
- 2015年
- 建立转基因作物中常见的两种外源调控元件的单管半巢式聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,为转基因食品的筛选检测提供一种快速、精确的方法。针对6种转基因作物中Ca MV35S启动子和NOS终止子的一致性核苷酸序列,分别设计巢式PCR的内、外引物,在测试不同引物组合的扩增效率基础上,建立Ca MV35S启动子和NOS终止子的单管半巢式PCR方法。结果表明,上述方法对两种转基因成分具有良好的特异性,检测灵敏度分别为0.01%和0.05%,显著优于常规PCR方法。该方法具有便捷、准确、灵敏等特点,适合筛查食品中的转基因成分。
- 闫伟徐桢惠龙丽坤李葱葱李飞武
- 关键词：转基因食品
