李丽
- 作品数：15 被引量：30H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学理学轻工技术与工程生物学更多>>
- 一种小龙虾养殖装置
- 一种小龙虾养殖装置，所述养殖装置包括养殖箱，所述养殖箱内设有输水管，所述输水管上设有若干均匀分布的排水孔，所述输水管一侧连接进水管，所述进水管和净化装置连接，所述净化装置连接水箱，所述养殖箱内还设有出水口，所述出水口上连...
- 丁辰龙王信海王宣朋江国荣吴学军李丽
- 文献传递
- 自噬在H9N2亚型禽流感病毒和大肠杆菌共感染中的作用研究被引量：1
- 2023年
- 为探究H9N2亚型禽流感病毒(AIV)和大肠杆菌共感染对无特定病原体(SPF)鸡肺组织和免疫系统的损伤及细胞自噬在共感染致病过程中的作用,选用60只3周龄SPF鸡,随机平均分为对照组、单独细菌感染组、单独病毒感染组、先病毒后细菌共感染组和先细菌后病毒共感染组5组。于处理后第1、3、5和7天各组随机选择3只鸡采集血清和肺组织,利用荧光定量PCR和HE组织学染色技术探究共感染对SPF鸡的肺组织系数、肺组织病理变化和肺组织屏障功能的影响。利用细胞培养、荧光定量PCR、酶联免疫吸附和Western blot等技术探究共感染与细胞自噬的关系以及自噬对共感染炎症反应和辅助性T细胞17(Th17)免疫反应的影响。结果显示:先病毒后细菌共感染试验组导致鸡肺组织病理损伤严重;共感染诱导强烈的细胞自噬,先病毒后细菌组自噬相关因子(LC3、Beclin-1)的蛋白表达水平与其他组相比极显著升高(P<0.01);同时与其他组相比,先病毒后细菌组炎症因子基因表达水平极显著升高(P<0.01),Th17免疫相关因子基因表达水平极显著降低(P<0.01)。提示:自噬通过促进共感染中炎性因子释放且抑制Th17免疫反应,造成鸡肺组织严重损伤。本试验为研究病毒与细菌共感染机制提供了科学依据。
- 蒋作仪李丽李茵婧常丽凤辛震东平继辉苏娟
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒共感染自噬炎症因子
- 牛奶中玉米赤霉烯酮和氯霉素二合一检测芯片的开发研究
- 2019年
- 为了开发出能同时检测玉米赤霉烯酮(ZEN)和氯霉素(CAP)的二合一免疫芯片,试验首先制备抗ZEN的单克隆抗体,并结合抗CAP多克隆抗体采用间接竞争ELISA方法进行芯片组装,最终确定定量标准曲线,并进行加标样品的检测。结果表明:共筛选得到3株抗ZEN的单克隆抗体(1C5、2B10、4F3),选择其中的1株杂交瘤细胞1C5制备小鼠腹水,抗体效价为5.12×10~4,半抑制浓度(IC_(50))为6.57 ng/mL。试验建立的免疫芯片对ZEN和CAP的最低检测限分别为2.84 ng/mL、9.49 ng/mL。在牛奶加标回收试验中,ZEN回收率为95.2%～109.8%,CAP回收率为95.1%～100.3%,回收率均较高,且与高效液相色谱(HPLC)法检测结果有良好的相关性,变异系数(CV)小于15.0%。说明该芯片能用于检测实际样品中的ZEN和CAP。
- 李丽张晓龙任帅丁乔棋宋素泉闫丽萍
- 关键词：玉米赤霉烯酮氯霉素单克隆抗体化学发光
- 一种河蟹捕捞装置
- 本实用新型公开了一种河蟹捕捞装置，包括网架、围网、支撑杆，网架为圆柱形，网架包括第一网架、第二网架，第二网架等距设置在第一网架内部，第一网架、第二网架侧面的围网上均设置有入口，第一网架、第二网架底部的围网上均设置有拉链，...
- 李丽丁辰龙王威祖兆忠
- 文献传递
- 出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与Hly融合基因的构建和表达
- 2010年
- 构建表达Tir和Hly的融合基因,将Tir基因的C端414个氨基酸残基(Tir414)基因部分与Hly基因的C端300个氨基酸残基(Hly300)基因部分串联构建pET28a-Tir414-Hly300重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。由于该融合蛋白由Tir和Hly2部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和溶血素(Hly)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。
- 张雪寒何孔旺卢维彩李丽茅爱华周萍
- 关键词：溶血素融合基因
- 一种大鳞鲃精子保存液的使用方法
- 本发明公开了一种大鳞鲃精子保存液的使用方法，包括以下步骤：一、选择亲鱼；二、精液采集；三、精子活力的测定；四、人工授精鱼受精率的测定。本发明研究设计的精子保存液，使得精液离体60/S内，精子在保存液中具有较强的活力，在生...
- 丁辰龙江国荣吴学军李丽
- 文献传递
- 基于新型量子点荧光微球的氯霉素免疫层析试纸条的制备和应用被引量：15
- 2017年
- 以羧基化CdTe/ZnSe量子点荧光微球为标记物,通过1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)活化法将氯霉素(CAP)单克隆抗体与量子点荧光微球偶联制备荧光探针。氯霉素全抗原(CAP-HS-BSA)及羊抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维素膜,形成检测线(T线)和质控线(C线),组装成新型氯霉素量子点荧光微球免疫层析试纸条,建立了快速、定量检测牛奶中CAP的方法。本研究开发的量子点荧光微球试纸条可在15min内完成牛奶样品中CAP的定量检测,线性范围为0.1~100.0μg/L,检出限为0.1μg/L。牛奶样品CAP的加标回收率为93.3%~97.9%,相对标准偏差在4.9%~6.9%之间。
- 丁乔棋李丽范文韬吕亚楠胡建华闫丽萍宋素泉
- 关键词：氯霉素
- H9N2 AIV灭活疫苗免疫SPF鸡攻毒后肺组织免疫相关基因表达变化研究
- 2024年
- [目的]本试验旨在探究H9N2亚型禽流感病毒攻击对H9灭活疫苗免疫SPF鸡呼吸系统的影响。[方法]选用36只3周龄SPF鸡,随机分为对照组(Con)、攻毒组(Flu)、免疫后攻毒组(Vac+Flu)。以每只0.4 mL剂量免疫接种H9灭活疫苗,3周后以10~6 EID_(50)的病毒量进行攻毒,采集拭子、血清、气管、肺组织等样品,通过血凝抑制(HI)试验、RT-PCR、荧光定量PCR(qPCR)等方法检测血清中HI抗体滴度、肺脏流感病毒M基因拷贝数以及免疫相关基因CD4、CD8、GATA3、T-bet、IL-4、IL-13、TNF-α、IFN-γ、Perforin、Granzyme、FasL、Fas等的表达量;并利用HE染色、免疫组织化学的方法观察气管、肺脏的病理变化及病毒特异性抗原NP蛋白的分布特征。[结果]HI试验结果显示,SPF鸡疫苗免疫后可产生较高的H9N2 AIV抗体效价。免疫保护试验和RT-PCR结果显示,SPF鸡疫苗免疫后攻毒仍能检测到机体排毒和流感病毒M基因在肺脏组织中的表达。HE染色和免疫组化结果显示,接种H9N2 AIV灭活疫苗后能够明显减轻SPF鸡气管和肺脏的病理损伤,降低气管、肺脏中的病毒载量。荧光定量PCR结果显示,接种H9N2 AIV灭活疫苗后能够提高SPF鸡肺脏中Th1、Th2细胞因子分泌水平,促进穿孔素/颗粒酶途径相关基因表达进而增强肺脏中细胞毒性反应。[结论]H9N2疫苗免疫鸡感染H9病毒后虽然仍存在排毒现象,但其抗病毒免疫系统活跃、其主要器官病毒载量降低,建议按照流感疫苗免疫程序进行免疫接种,提高对流感的防控水平。
- 李丽蒋作仪李茵婧常丽凤辛震东平继辉苏娟
- 关键词：SPF鸡H9N2亚型禽流感病毒灭活疫苗免疫相关基因
- 一种便于清洁的青虾清洗装置
- 本实用新型提供一种便于清洁的青虾清洗装置，涉及青虾清洗技术领域。实现了青虾清洗不易破损和青虾内部污泥清洗的效果。该便于清洁的青虾清洗装置，包括装置主体和清洗装置，所述清洗装置位于装置主体的内部，所述装置主体包括装置外壳，...
- 丁辰龙王信海王宣朋江国荣吴学军李丽
- 文献传递
- EHEC O157：H7二重PCR的建立及应用被引量：7
- 2011年
- 建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法。根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以EHEC O157:H7纯培养和模拟制备的3种阳性样品为原材料,对方法的敏感性和特异性进行分析。运用成功建立的二重PCR,从带菌率最高的牛粪便中检测EHEC O157:H7,并进行菌株分离和鉴定。成功建立了rfbE与fliC的二重PCR方法,rfbE与fliC引物比例为2.5∶1,PCR循环参数中退火温度为56℃,扩增片段长度rfbE为812 bp,fliC为625 bp。检测阳性临床样品检测敏感性可以达到10 cfu/g。检测24株非EHEC O157:H7大肠杆菌和15株非大肠杆菌,只有EHECO157:H7能够扩增出特异性的rfbE条带,EHEC O157:H7和EPEC O55:H7能够扩增出fliC。只有EHEC O157:H7能够同时扩增出rfbE与fliC 2条目的条带。从63份牛粪便样品中分离到4株EHEC O157:H7:生化试验表明4株EHEC O157:H7具有典型EHECO157:H7的生化特性;药敏试验表明4株EHEC O157:H7具有较为广谱的耐药性;rfbE序列分析与GenBank序列同源性介于97.3%～99.2%之间,fliC序列与GenBank序列同源性介于97.6%～100%之间;4株EHEC O157:H7对Balb/c小鼠的致病性有差异,EHEC O157:H728#和EHEC O157:H738#致病性强,EHEC O157:H73#和EHEC O157:H717#较弱。以rfbE和fliC为目的基因成功建立了二重PCR,敏感性和特异性良好,可用于临床样品的检测,提高细菌分离率。
- 李丽张雪寒何孔旺姜平赵攀登叶青栾晓婷温立斌倪艳秀周俊明吕立新郭容利俞正玉茅爱华李彬王小敏
- 关键词：O157:H7二重PCR细菌分离
