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晶胞粘连控制基因簇的克隆及在防止晶体降解中的应用: 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体公开了一种来自于苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020晶胞粘连控制基因簇的分离、克隆及其在防止晶体降解中的作用。本发明从具有典型晶胞粘连表型的苏云金芽胞杆菌YBT-020中克隆得到控制...; 孙明朱义广纪芳尚卉朱倩王鹏霞徐承晨邓运付菁菁

晶胞粘连控制基因簇的克隆及在防止晶体降解中的应用: 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体公开了一种来自于苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020晶胞粘连控制基因簇的分离、克隆及其在防止晶体降解中的作用。本发明从具有典型晶胞粘连表型的苏云金芽胞杆菌YBT-020中克隆得到控制...; 孙明朱义广纪芳尚卉朱倩王鹏霞徐承晨邓运付菁菁; 文献传递

苏云金芽胞杆菌大质粒pBMB28的克隆被引量：1: 2011年; 苏云金芽胞杆菌幕虫亚种YBT-020具有典型的晶胞粘连表型。在前期的研究中,通过质粒消除实验,推测晶胞粘连现象与YBT-020内生质粒pBMB28有关。为了定位质粒pBMB28上控制晶胞粘连表型的基因,首先对质粒pBMB28进行克隆。利用穿梭载体pEMB0557,成功构建了苏云金芽胞杆菌YBT-020的基因组人工染色体(BAC)文库。前期的研究表明晶体蛋白基因cry28Aa定位在质粒pBMB28上,根据cry28Aa基因序列设计引物,从文库中筛选到含有cry28Aa的重组质粒pBMB231。镜检和SDS-PAGE证明质粒pBMB231转化无晶体突变株BMB171形成的重组子BMB231可以产生Cry28Aa晶体蛋白,但不能恢复晶胞粘连表型。对重组质粒pBMB231的插入片段末端序列测定并设计引物筛选文库,通过染色体步移方式得到4个可以重叠覆盖质粒pBMB28不同区域的克隆子,从而克隆了该质粒。对这4个克隆子末端测序和酶切分析,测算出该质粒的大小约为140 kb。进一步确定应用基因组BAC文库以及重叠片段筛选的方法,可以快速有效的克隆苏云金芽胞杆菌大质粒。; 戚军良朱义广尚卉纪芳朱倩孙明; 关键词：苏云金芽胞杆菌质粒 BAC文库染色体步移

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尚卉