叶迎春
- 作品数：37 被引量：121H指数：6
- 供职机构：泸州医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省青年科技基金四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学农业科学生物学更多>>
- 全人源抗IL-33 scFv-Fc真核表达载体的构建与高表达细胞株的筛选
- 白细胞介素33(Interleukin-33,IL-33)是IL-1家族新成员,是孤儿分子ST2配体,广泛表达于多种组织与细胞,主要参与调节Th2型免疫与炎症反应,与多种过敏性及自身免疫性疾病相关。研究表明采用鼠源抗IL...
- 叶迎春
- 关键词：CHO细胞真核表达细胞因子
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素的基因克隆与蛋白表达纯化
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-Hla)是一种外毒素,具有良好的抗原性,是金黄色葡萄球菌致人类疾病的主要因子,在金黄色葡萄球菌感染特别是医源性感染中,起到主要作用。金黄色葡萄球菌感染容易产生耐药性,后期抗感染治疗难度大。目...
- 吴桐年四季徐文峰叶迎春袁青
- 关键词：金黄色葡萄球菌感染基因克隆
- IL-4、IL-13蛋白表达及抗IL-4、IL-13人源单链抗体的筛选被引量：3
- 2013年
- 目的:表达IL-4和IL-13蛋白,从人源单链抗体文库中分别筛选抗IL-4和抗IL-13单链抗体。方法:采用RT-PCR从健康志愿者外周血单核细胞(PBMC)mRNA中扩增IL-4和IL-13 cDNA;构建硫氧还蛋白融合表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定。以生物素化的IL-4和IL-13为抗原从前期构建的人源抗体文库中采用噬菌体展示技术分别筛选抗IL-4和抗IL-13人源单链抗体(scFv)。结果:扩增的IL-4 cDNA大小为280 bp,表达的融合蛋白大小为27 kD左右。扩增的IL-13 cDNA大小为252 bp,表达的融合蛋白大小为25 kD左右。分别以生物素化的IL-4和IL-13蛋白为抗原,采用噬菌体展示技术对人源抗体文库进行3轮富集后,分别有大约37%的scFvs与IL-4有结合特性,有约27%的scFvs与IL-13有结合特性。筛选了4株分别与IL-4和IL-13结合能力强的单链抗体进行了Western blot鉴定和测序。结论:成功筛选到抗IL-4和抗IL-13人源性单链抗体。
- 袁青黄黎郭夕源叶迎春年四季
- 关键词：IL-4IL-13人源单链抗体
- 青果多酚对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响被引量：11
- 2013年
- 目的:研究青果多酚对体外培养的人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响。方法:利用超声波提取青果多酚,分光光度法检测其含量,采用MTT法、免疫细胞化学法、流式细胞术检测Hela细胞增殖抑制率与凋亡情况。结果:青果多酚对Hela细胞的增殖有明显抑制作用,并存在时间和剂量依赖性;青果多酚可通过激活caspase-3促进细胞的凋亡。结论:青果多酚对Hela细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用。
- 向丽叶迎春胡晓艳王光西周铁军
- 关键词：青果多酚HELA细胞
- 细菌荚膜染色的创新被引量：3
- 2004年
- 目的 建立一种新的细菌荚膜染色方法 ,以改良荚膜染色的效果。方法 用肺炎链球菌、葡萄球菌培养物小白鼠腹腔注射 ,产气荚膜杆菌培养物采用小白鼠尾静脉注射 ,并腹腔注射荚膜保护液 ,最后取腹腔液涂片。用 5 g/dl石碳酸复红、特殊媒染剂、1 .48g/dl美蓝酒精饱和溶液染色。结果 菌体呈紫红色 ,荚膜呈浅蓝色 ,背景无色 ,无假荚膜。结论 此法具有操作简单且成功率高 ,荚膜厚、大 ,易分辨 ,染色稳定的特点 ,是一种理想的荚膜染色方法。
- 凌体淑叶迎春赵世鸿夏世萍
- 关键词：荚膜染色
- 全人源scFv-Fc融合抗体高表达细胞株的筛选
- 研究背景:IL-33是IL-1超家族成员,ST2配体,广泛表达于多种组织与细胞,主要参与调节Th2型免疫反应.当IL-33过表达时可加重Th2和肥大细胞介导的炎症性疾病,与过敏性与自身免疫性疾病有明显相关性.用鼠源IL-...
- 叶迎春年四季吴桐徐文峰袁青
- 关键词：SCFV融合蛋白CHO细胞
- 立足泸医基础医学院实验技术人员现状加强实验室队伍建设被引量：2
- 2014年
- 本文从泸医基础医学院实验技术人员现状出发,对当前实验技术人员存在的问题进行分析,并对这些问题寻求解决方案。
- 叶迎春汤军
- 全人源scFv-Fc真核表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的:构建全人源抗IL-33 scFv-Fc重组载体,转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO),表达并鉴定融合抗体蛋白。方法:RT-PCR扩增人IgG1 Fc段并插入真核表达载体pcDNA3.1中,构建pcDNA3.1/Fc重组载体;将合成的信号肽(SP)序列插入重组质粒pcDNA3.1/Fc,构建重组pcDNA3.1/SP-Fc通用载体;最后将本实验室前期筛选的抗IL-33 scFv插入重组质粒pcDNA3.1/SP-Fc中,构建重组pcDNA3.1/SP-scFv-Fc载体,测序正确后转染CHO细胞。RT-PCR、Western blot检测目的基因的转录及表达。结果:重组质粒测序结果表明成功地构建了pcDNA3.1/SP-scFv-Fc重组真核表达载体,插入的SP-scFv-Fc目的基因大小为1 560 bp左右。转染CHO细胞后,RT-PCR结果显示目的基因在CHO细胞中成功转录,Western blot显示表达的蛋白可以和羊抗人IgG1 Fc抗血清发生特异性免疫反应。结论:成功构建了pcDNA3.1/SP-scFv-Fc重组真核表达载体,以便于后续在CHO细胞中表达。
- 叶迎春年四季刘佳佳王栩高燕袁青
- 关键词：CHO细胞真核表达
- 抗金黄色葡萄球菌全人源单链抗体的筛选与鉴定
- 研究背景:金黄色葡萄球菌常引起败血症、肺炎和全身性感染等,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)是临床上最常见的耐药菌之一,其治疗...
- 年四季吴桐徐文峰叶迎春袁青
- 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体展示
- MALP-2对多形核中性细胞凋亡及其Bax蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究Toll样受体(TLR)激动剂巨噬细胞活化脂肽(MALP-2)影响多形核中性细胞(PMN)凋亡及凋亡相关的Bax蛋白的表达水平。方法分离培养正常受试者的外周血PMN,分别加入实验组、阳性对照组和阴性对照组。用流式细胞术检测不同组PMN的凋亡发生率,通过Western blotting技术检测各组PMN Bax蛋白的表达水平。结果 MALP-2降低PMN自发性凋亡的发生率,与阳性对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);接受MALP-2刺激的PMN表达Bax蛋白低于阳性对照组与阴性对照组(P<0.05)。结论在TLR激动剂诱发的PMN生存效应中,MALP-2可能通过降低PMN胞内Bax蛋白的表达水平来延长PMN的生命期限。
- 高燕叶迎春袁青周云刚黄黎刘佳佳
- 关键词：细胞凋亡TOLL样受体BCL-2相关X蛋白质
