刘辉
- 作品数：16 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市重大项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 一种多发性骨髓瘤特异性蛋白及其专用检测试剂盒
- 本发明公开了一种多发性骨髓瘤特异性糖基化蛋白质及其专用检测试剂盒。该蛋白，其氨基酸序列为序列表中序列1，所述序列1的自氨基端第342位氨基酸残基为糖基化位点，该位点连接的糖链组成为[Hex]<Sub>5</Sub>[He...
- 李智立张海婧刘辉
- 文献传递
- 利用蛋白质组学筛选肾透明细胞癌肿瘤标志物
- 2017年
- 目的:通过蛋白质组学筛选和验证肾透明细胞癌中潜在肿瘤标志物。方法:采用比较蛋白质组学方法筛选正常肾组织和肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织中的差异表达蛋白,通过二维差异凝胶电泳(two-dimensional difference gel electrophoresis,2D-DIGE)和傅里叶变换离子回旋共振质谱(Q-Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry,FT-ICR MS)分离并鉴定16例RCC组织及其相应的正常组织中差异显著的蛋白,并进一步通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)、Western印迹和免疫组织化学在RNA和蛋白水平进行验证。结果:通过2D-DIGE共筛选出1 873个蛋白质点,选取68个表达差异大于1.5倍的蛋白质点进行鉴定,成功鉴定出51个蛋白质(P<0.05),其中16个蛋白表达上调,35个表达下调。采用qRT-PCR和Western印迹验证16例肿瘤和对照组织,结果表明在肿瘤组织中NNMT和Annexin IV表达显著升高,而ACY1和Calbindin显著下调(P<0.01)。同时针对ACY1和Annexin IV蛋白分别在53例和47例样本中进行免疫组织化学,结果显示相较于对照组织,ACY1在肾透明细胞癌中表达显著降低(P<0.001),而Annexin IV显著升高(P<0.001)。结论:ACY1和Annexin IV可作为肾透明细胞癌的肿瘤标志物。
- 郭丹王安琪赵晓晓刘辉孙健
- 关键词：肾透明细胞癌肿瘤标志物蛋白质组学
- 基于血浆蛋白质复合物的肺癌预后评估研究
- 本研究通过优化凝胶电泳的分离条件和MALDI-FTICR MS 检测条件，对30例肺癌患者不同治疗时间点的血浆蛋白质复合物进行分离和鉴定，发现不同临床治疗结局的人群和蛋白质复合物的表达量相关。
- 宋高广王彦英王婉刘辉李智立
- 关键词：肺癌预后评估血浆生物标志物蛋白复合物凝胶电泳
- 文献传递
- 一种多发性骨髓瘤特异性蛋白及其专用检测试剂盒
- 本发明公开了一种多发性骨髓瘤特异性糖基化蛋白质及其专用检测试剂盒。该蛋白，其氨基酸序列为序列表中序列1，所述序列1的自氨基端第342位氨基酸残基为糖基化位点，该位点连接的糖链组成为[Hex]<Sub>5</Sub>[He...
- 李智立张海婧刘辉
- 粒-巨噬细胞集落刺激因子促进草酸铂腹腔化疗下大鼠结肠吻合口愈合机制的初步研究被引量：1
- 2012年
- 目的观察粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulating factor,GM-CSF)局部应用于草酸铂腹腔化疗下大鼠结肠吻合口愈合过程中的组织学变化,探讨其作用机制。方法 10周龄清洁级雄性Wistar大鼠60只,体重(235±18)g,制备结肠吻合模型,随机分为3组(n=20)。术后1 d,A、B组腹腔对应注射10 mL 5%葡萄糖溶液、10 mL含草酸铂(25 mg/kg)的5%葡萄糖溶液;C组术后即刻吻合口区域注射50μg GM-CSF,术后1 d腹腔注射10 mL含草酸铂(25 mg/kg)的5%葡萄糖溶液。术后观察大鼠一般情况,于2、3、5、7 d测量吻合口破裂压,组织学观察并计算吻合口愈合指数,免疫组织化学染色检测Ⅰ型胶原纤维阳性染色面积。结果术后各组大鼠均存活至实验完成。术后2、3 d各组吻合口破裂压相似(P>0.05);5、7 d时,B组吻合口破裂压显著低于A、C组(P<0.05),A、C组间差异无统计学意义(P>0.05)。吻合口愈合指数结果示,术后各时间点,A、C组间单核细胞浸润、黏膜上皮细胞覆盖、黏膜下层-肌层衔接程度及肉芽组织形成相似(P>0.05),A、C组黏膜上皮细胞覆盖及肉芽组织形成均显著优于B组(P<0.05);术后2、3 d,A、C组单核细胞浸润显著优于B组(P<0.05),5、7 d黏膜下层-肌层衔接程度优于B组(P<0.05)。术后2、3 d,各组Ⅰ型胶原纤维阳性染色面积比较差异均无统计学意义(P>0.05);5、7 d时A、C组Ⅰ型胶原纤维阳性染色面积显著高于B组(P<0.05),A、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论局部注射GM-CSF可通过早期动员巨噬细胞浸润,提高大鼠黏膜下层胶原纤维沉积,从而加速结肠愈合进程。
- 刘勇杨阳刘辉宋云骏贾喜花张晓伟郭建美
- 关键词：粒-巨噬细胞集落刺激因子结肠吻合口草酸铂愈合机制
- 基于二氧化钛基质的高效唾液酸化糖肽富集方法的研究
- 本研究报道了一种优化了的高效唾液酸化糖肽富集方法，该方法利用二氧化钛从牛胎球蛋白的酶解混合物中富集唾液酸化糖肽。富集后糖肽的质谱结果显示糖肽质谱峰主要位于质荷比2000-4000的范围内，检测到80多个唾液酸化糖型。该方...
- 李芬洁李芳郭玉梅郭帅宋高广王晓东陈国强刘辉李智立
- 关键词：二氧化钛
- 文献传递
- 分泌蛋白质组研究进展被引量：7
- 2007年
- 分泌蛋白质组是指组织、细胞等分泌的全部蛋白质。分泌蛋白主要分布于体液和细胞质胞浆中,参与许多重要的生命过程。分泌蛋白质组的研究主要涉及分泌蛋白的制备、多维色谱或二维凝胶电泳分离、质谱鉴定及生物信息学分析等。本文主要介绍了分泌蛋白的合成途径、蛋白质组技术在分泌蛋白组研究中的应用、分泌蛋白组研究现状及存在的问题等。
- 张海婧刘辉吕丽艳陈国强李智立
- 关键词：分泌蛋白蛋白质组质谱二维凝胶电泳
- 抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体对K562细胞在裸鼠体内生长的影响被引量：5
- 2002年
- 目的观察人慢性粒细胞白血病细胞转导抗ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体基因后，对其在裸鼠体内生长的影响。方法应用基因重组技术构建逆转录病毒载体ＭＳＣＶ－ｉｂＥ－ＩＲＥＳ－ｅＧＦＰ，将胞内抗体基因转导Ｋ５６２细胞，观察胞内抗体的表达和细胞内ｃ－ＡＢＬ及ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶活性的变化；将表达胞内抗体的细胞与对照组Ｋ５６２细胞及转导空载体的细胞分别移植裸鼠，动态观察肿瘤的生长。结果获得表达胞内抗体基因的细胞模型：Ｋ５６２－ｉｂＥ，其靶蛋白酪氨酸激酶活性明显受抑。移植裸鼠后第１４，２１，２８天肿瘤体积均小于对照组的１／２。结论转导抗ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的细胞在裸鼠体内生长明显受抑制，这可能与胞内抗体显著抑制细胞内ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶活性，阻断ＢＣＲ／ＡＢＬ信号途径，促进细胞凋亡，降低了细胞的体内致肿瘤性有关。
- 徐冬宋俊敏呼莹郭虹曹德骏汪萍刘辉赵春华
- 关键词：胞内抗体K562细胞BCR/ABL酪氨酸激酶裸鼠
- 草酸铂腹腔化疗对大鼠结肠吻合口愈合影响及粒-巨噬细胞集落刺激因子的干预效应被引量：2
- 2011年
- 目的探讨术后早期腹腔注射草酸铂对大鼠结肠吻合口愈合的影响及粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的干预效应。方法 42只Wistar大鼠实施结肠吻合术,术后随机分为对照组(A组)、草酸铂组(B组)和草酸铂+GM-CSF组(C组),每组14只,其中C组结肠吻合完成后于吻合口两侧浆膜下层注射GM-CSF。术后24hA组腹腔注射生理盐水20ml/kg,B组和C组腹腔注射草酸铂25mg/kg。通过测定吻合口爆破压、羟脯氨酸含量及胶原纤维含量,评价其对结肠吻合口愈合的影响。结果术后第7天所有大鼠再次剖腹探查,三组均出现吻合口漏,分别为1例、3例和2例,组间比较差异无统计学意义;三组的爆破压值及羟脯氨酸含量分别为:(195.95±2.97)mmHg、(169.26±4.31)mmHg、(191.15±1.84)mmHg;(11.40±1.12)μg/mg、(9.86±0.40)μg/mg、(11.38±0.50)μg/mg;Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维含量分别为:(1.58±0.10)p·μm2、(1.08±0.11)p·μm2、(1.43±0.08)p·μm2;(1.38±0.11)p·μm2、(1.06±0.10)p·μm2、(1.34±0.09)p·μm2。A组、C组与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论术后早期腹腔注射草酸铂明显延缓结肠吻合口的愈合,而局部注射GM-CSF可消除化疗药物对结肠吻合口愈合的影响。
- 刘勇杨阳刘辉李淼宋云骏
- 应用超高分辨质谱成像技术研究脂类分子在小鼠肝组织中的分布被引量：9
- 2011年
- 利用基质辅助激光解吸电离-傅里叶变换离子回旋共振质谱仪对磷脂类分子在小鼠肝组织中的分布进行了研究,建立了质谱成像技术检测小鼠肝组织中磷脂类分子分布的分析方法。以7g/Lα-腈基-4-羟基肉桂酸的50%甲醇溶液(含0.2%三氟乙酸)作为基质,采用正离子采集模式,准确鉴定了5类13种磷脂类分子,其分子量主要分布在700～900Da之间,且观察到它们在组织内分布呈现不均匀性。本研究表明,以超高分辨和超高精度的质谱仪开展组织成像研究,不仅可以探究脂类分子在组织中的分布,而且可以直接准确鉴定相关分子,真正实现分子水平上的组织成像。
- 刘辉陈国强王艳英李智立
- 关键词：肝组织磷脂
