刘西燕
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省教育厅资助项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转OsMAPK4基因烟草的抗旱性研究与遗传分析被引量：8
- 2007年
- 以低温处理的水稻辽盐241植株叶片总RNA为模板,用OsMAPK4基因特异引物通过RT-PCR扩增出OsMAPK4基因,构建了由E12启动子调控的OsMAPK4基因植物表达载体pBME12。通过农杆菌介导法将OsMAPK4基因导入烟草,筛选获得25株转基因植株。抗旱性研究结果表明,OsMAPK4基因的超量表达提高了T1代转基因植株的抗旱性。卡那霉素抗性在T1代转基因植株中的分离情况表明,大多数转基因株系符合单基因遗传规律。
- 李杰齐岩李莹刘西燕冀好布套朱延明柏锡才华
- 关键词：转基因烟草抗旱性
- OsMAPK4基因水稻突变体的培育及功能分析
- 本研究构建了由Ubi强启动予调控的OsMAPK4基因的RNAi载体pCMI。利用农杆菌介导法将pCMI及OsMAPK4基因的超量表达载体pCME12导入黑龙江省优良水稻品种“五优稻一号”。经Bialaphos对PCR阳性...
- 刘西燕
- 关键词：水稻水稻突变体转基因作物基因表达谱
- 文献传递
- OsMAPK4基因的原核表达及蛋白纯化被引量：3
- 2008年
- 构建OsMAPK4基因的原核表达载体,对表达产物进行鉴定和纯化,为转OsMAPK4基因植株后期的Western Blot检测提供抗原。用PCR方法从本实验室已构建的植物表达载体pUM4上扩增OsMAPK4基因,将其克隆至pET32b原核表达载体,构建重组载体pET32b-MAPK4。转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析。用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,用Western Blot进行蛋白鉴定。结果表明,原核表达载体构建正确;SDS-PAGE分析及Western Blot鉴定中,均出现了与DNAMAN预测的43.6 ku大小一致的蛋白条带;得到纯化蛋白。成功构建了OsMAPK4基因的原核表达载体,得到纯化蛋白,为转OsMAPK4基因水稻植株体内蛋白表达活性的检测提供了抗原。
- 刘西燕柏锡李莹李杰
- 关键词：原核表达纯化WESTERNBLOT
- GsDREB1基因的电子克隆及体内结合特异性分析
- 2008年
- 应用电子克隆技术预测到了一个5'端缺失的contig5,并根据栽培大豆与野生大豆相关基因相似性很高的特点,将GmDREB1基因的5'端序列填补到contig5片段的5'端上,此序列命名为contig5Gm。ORF预测结果表明,contig5Gm只有一个开放阅读框。经RT-PCR验证,分别得到了与contig5和contig5Gm大小一致的片段。经克隆、测序发现,contig5Gm与GmDREB1基因序列相似性为99%,将其命名为GsDREB1。利用酵母单杂交系统对GsDREB1进行了体内结合特异性分析,结果表明,GsDREB1能够与DRE顺式作用元件发生特异性结合。
- 李莹才华李勇李杰刘西燕田佳
- 关键词：DREB电子克隆野生大豆转录因子
