侯婉莹
- 作品数:14 被引量:34H指数:3
- 供职机构:中国农业科学院烟草研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学文化科学经济管理更多>>
- 啤酒花矮化类病毒侵染性克隆的构建及其生物学活性
- 啤酒花矮化类病毒重组突变体(HSVdD-15)是世界上唯一报道过的该类病毒分子内重组突变体。本文成功构建HSVd和HSVdD-15侵染性克隆,并对其生物学活性进行了研究。通过症状观察和Northern杂交检测接种黄瓜中的...
- 侯婉莹成卓敏李世访
- 关键词:侵染性克隆
- 文献传递
- 类病毒分子间及分子内重组体研究
- 目前研究发现类病毒存在着分子间及分子内重组的现象,由于类病毒的重组对类病毒的进化起重要作用,也和类病毒的致病性密切相关,因此研究类病毒分子间及分子内重组体将对深入研究类病毒重组进化机理、致病性等具有重要意义。本文主要开展...
- 侯婉莹
- 文献传递
- 一种锦紫苏类病毒离体常温保存方法
- 本发明公开了一种锦紫苏类病毒离体常温保存方法,主要包括以下步骤:样品采集:采摘带有锦紫苏类病毒毒源的鲜活锦紫苏植株叶片或茎干样品;变色硅胶干燥:将离体后12小时内的样品,与等重的变色硅胶密封于塑料保存袋中;室温放置2-3...
- 侯婉莹李世访姜冬梅张志想崔萌萌王倩
- 文献传递
- 苹果茎痘病毒在山楂中的首次鉴定与序列分析被引量:5
- 2021年
- 山楂是我国重要的果树,但山楂病毒的相关研究较少。本研究通过高通量测序及生物信息学分析首次在山楂样品中发现苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)。利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术对ASPV山楂分离物全长序列进行扩增,结果表明,ASPV山楂分离物基因组全长由9290个核苷酸组成,包含5个开放阅读框(open reading frames,ORFs)。ORF1编码与病毒复制相关的蛋白-RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RdRp),其在氨基酸水平上与ASPV苹果和梨分离物的RdRp序列相似性分别为72.8%~80.9%和81.7%~92.8%;ORFs 2~4表达与病毒移动相关的三基因块(triple gene block 1~3,TGB 1~3),其与印度苹果N分离物(LM999967)的氨基酸序列相似性最高,为92.9%~98.2%;ORF5编码外壳蛋白(coat protein,CP),与苹果和梨分离物CP的序列相似性较低,分别为64.8%~88.4%和69.8%~92.2%,高于目前凹陷病毒属病毒新种的划分界限。将ASPV山楂分离物的全长核苷酸序列与其他ASPV分离物的全长序列进行比对,构建系统发育树,结果表明,ASPV山楂分离物与巴西苹果分离物BR-Brae2的亲缘关系最近,但两者核苷酸序列相似性较低(81.5%),说明与其他分离物相比该分离物具有较大的变异性。综上,本研究初步验证了山楂是ASPV的重要自然寄主,并首次获得了ASPV山楂分离物的全长基因组序列,为山楂病毒病诊断和防控策略的制定提供参考。
- 高德航何成勇邢飞侯婉莹李世访战斌慧王红清
- 关键词:山楂高通量测序苹果茎痘病毒
- 啤酒花矮化类病毒侵染性克隆的构建及其生物学活性
- 啤酒花矮化类病毒重组突变体(HSVdD-15)是世界上唯一报道过的该类病毒分子内重组突变体。本文成功构建HSVd和HSVdD-15侵染性克隆,并对其生物学活性进行了研究。通过症状观察和Northern杂交检测接种黄瓜中的...
- HOU Wanying侯婉莹CHENG Zhuomin成卓敏LI Shifang李世访
- 关键词:植物病害侵染性克隆生物学活性
- 一种锦紫苏类病毒快速检测方法
- 一种锦紫苏类病毒病毒的快速检测方法,其特征在于:包括锦紫苏类病毒RNA的提取、RT-PCR反应和PCR产物的核酸胶体金层析试纸条检测等步骤。本发明是在优化锦紫苏类病毒RNA的提取方法的前提下,将RT-PCR技术与核酸胶体...
- 侯婉莹姜冬梅李世访崔萌萌许立峰陈德鑫
- 文献传递
- 新疆无花果花叶病病毒鉴定与发生调查被引量:3
- 2021年
- 【目的】无花果花叶病是危害无花果的主要病害之一,在新疆地区发生普遍,但导致该病害发生的病原种类尚不明确,因此进行了新疆无花果花叶病的病原鉴定与发生情况调查,为进一步明确不同无花果病毒的潜在危害以及病害防控提供依据。【方法】对新疆8个地区21个果园及路边的盆栽风景无花果进行病毒病的调查,通过高通量测序对感病无花果样品进行病毒初步鉴定,利用PCR或RT-PCR法,对采集自新疆8个地区的、不同花叶病症状及无症状的135份叶片样品进行病毒检测。【结果】高通量测序分析表明,感病样品中存在5种无花果病毒,分别为无花果花叶病毒(Fig mosaic virus,FMV)、无花果杆状病毒1(Fig badnavirus 1,FBV-1)、无花果杆状病毒2(Fig badnavirus 2,FBV-2)、无花果叶斑相关病毒4(Fig leaf mottle-associated virus 4,FLMaV-4)和无花果斑点相关病毒(Fig fleck-associated virus,FFkaV)。PCR及RT-PCR检测结果表明,135份无花果样品中存在6种无花果病毒,其检出率分别为FMV(100%)、FBV-1(100%)、FBV-2(99.3%)、FLMaV-4(74.8%)、FFkaV(31.9%)、无花果叶斑相关病毒1(Fig leaf mottle-associated virus 1,FLMaV-1)(19.3%)。新疆无花果病毒普遍存在复合侵染现象,感染4种以上病毒的样品有127份,占94%。2种、3种、4种和5种病毒复合侵染检出率分别为0.7%、5.2%、62.2%和31.9%。FMV、FBV-1、FBV-2在不同地区的发病率没有明显差异,并且症状为环斑、褪绿斑驳、褶皱及无症状样品中都能检测出FMV、FBV-1、FBV-2,这3种病毒可能是侵染新疆无花果的主要病毒。【结论】鉴定到侵染新疆无花果花叶病样的病毒性病原有6种,病毒检出率较前人报道的具有明显提升,并且普遍存在2种以上病毒复合侵染的现象,其中FMV、FBV-1、FBV-2检出率最高。
- 吐逊艾力·艾孜提力侯婉莹代毅倪志勇麦合木提江·米吉提
- 关键词:高通量测序RT-PCR病毒种类
- 一种锦紫苏类病毒快速检测方法
- 一种锦紫苏类病毒的快速检测方法,其特征在于:包括锦紫苏类病毒RNA的提取、RT-PCR反应和PCR产物的核酸胶体金层析试纸条检测等步骤。本发明是在优化锦紫苏类病毒RNA的提取方法的前提下,将RT-PCR技术与核酸胶体金免...
- 侯婉莹姜冬梅李世访崔萌萌许立峰陈德鑫
- 文献传递
- 三种无花果病毒的多重RT-PCR检测被引量:3
- 2021年
- 为了快速检测危害无花果的病毒种类,本研究建立了一种同时检测3种无花果病毒的多重RT-PCR检测体系,包括无花果斑点相关病毒(fig fleck-associated virus, FFkaV)、无花果叶斑相关病毒(fig leaf mottleassociated virus, FLMaV)和无花果花叶病毒(fig mosaic virus, FMV)。根据三种病毒基因保守区域设计特异性引物,分别对cDNA用量、dNTPs用量、EasyPfu DNA聚合酶用量、MgSO_(4)用量、退火温度和引物组合进行优化,并利用RT-PCR进行验证。结果显示,总体积为25μL的反应体系中EasyPfu DNA聚合酶(2.5 U/μL)用量0.7μL、cDNA用量1.0μL、dNTPs (2.5 mmol/L)用量2.5μL、MgSO_(4)(50 mmol/L)用量1.2μL、引物组合为1.5μL,1.0μL,0.3μL、ddH_(2)O为14μL、退火温度56℃时能够扩增出清晰的目的条带,该检测体系的检测极限为6.8 ng/μL的cDNA。田间样品的检测结果表明,该方法能够快速、准确地检测这3种无花果病毒,可用于田间无花果样品的检测。本研究建立的多重RT-PCR检测体系为无花果病毒的检测与防控提供技术支持。
- 吐逊艾力·艾孜提力侯婉莹郭庆元古丽尼沙·卡斯木代毅李世访李世访
- 关键词:无花果病毒多重RT-PCR
- 啤酒花矮化类病毒及其突变体侵染性克隆的构建和生物学活性研究被引量:1
- 2012年
- 啤酒花矮化类病毒重组突变体(HSVd D-15)是世界上报道过的仅有的一个啤酒花矮化类病毒(HSVd)分子内重组突变体。为研究其生物学活性,本文分别构建了含有HSVd和HSVd D-15 cDNA加倍串联序列的重组质粒,并对其在指示植株四叶黄瓜上的侵染活性进行了检测。结果表明:仅在接种含有HSVd cDNA多倍串联序列重组质粒的黄瓜上检测到HSVd的侵染,在同样条件下接种了含有HSVd D-15 cDNA两倍串联序列重组质粒的黄瓜上未检测到子代类病毒。HSVdD-15的生物学活性还需通过改进接种方法或将其接种无毒的自然寄主李树苗木来进一步研究。
- 侯婉莹姜冬梅王红清杨元爱李世访
- 关键词:侵染性克隆