程凯宁
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：南京农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 利用母牛外周血进行早期胚胎性别鉴定与牛白细胞黏附缺陷症的检测
- 本研究主要是探讨利用妊娠奶牛外周血血浆中胎儿游离DNA,进行无创性奶牛早期胚胎性别鉴定的可行性。采集110头不同妊娠阶段(孕期为1-8月)的奶牛外周血,利用血浆DNA提取方法提取血浆中游离的胎儿DNA,根据奶牛SRY基因...
- 程凯宁
- 关键词：性别鉴定胎儿游离DNA巢式PCR单链构象多态性
- 牛胚胎性别的无创伤性鉴定分子检测方法
- 本发明属于分子生物学及畜牧业领域，公开了牛胚胎性别的无创伤性鉴定分子检测方法。该方法通过妊娠牛血样抽提DNA模板，以牛Y染色体特异性序列设计两对巢式引物，进行巢式PCR，通过扩增产物是否出现阳性条带判断牛胚胎的性别。该方...
- 王根林程凯宁崔群维
- TGF-β_1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及HSP70蛋白表达的影响被引量：2
- 2008年
- 【目的】探讨TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡和HSP70蛋白表达的影响。【方法】TGF-β1作用乳腺上皮细胞不同时间,收集细胞及培养液,应用MTT检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡率、比色法检测LDH活性、琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性、Western bolt技术分析HSP70蛋白的表达量。【结果】1、5、10ng·ml-1的TGF-β1均能抑制乳腺上皮细胞的增殖,且随浓度增加抑制作用加大,呈现剂量依赖性,其中10ng·ml-1TGF-β1组与对照组差异显著(P<0.05);10ng·ml-1TGF-β1作用于乳腺上皮细胞,随着作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐升高,其中6、12和24h与对照组相比差异极显著(P<0.01);LDH活力随作用时间延长而升高,12、24h与对照组差异极显著(P<0.01);DNA完整性随TGF-β1作用时间的延长发生不同程度降解;TGF-β1作用2～6h细胞大量表达HSP70,6h达到高峰,而后下降,2～12h的表达量均极显著高于对照组(P<0.01)。【结论】TGF-β1可以抑制奶牛乳腺上皮细胞的增殖,具有浓度依赖性。10ng·ml-1TGF-β1可以显著增加细胞凋亡率,提高细胞培养液中LDH活力,使细胞DNA发生不同程度的降解,同时HSP70蛋白随TGF-β1作用时间发生显著的表达变化。本试验结果表明,TGF-β1可以以促进上皮细胞凋亡的方式,促进奶牛乳腺发生退化。
- 狄和双杜娟张中霞黄静燕崔群维程凯宁王根林
- 关键词：乳腺上皮细胞HSP70
- 转化生长因子β1对奶牛乳腺组织细胞凋亡及HSP70蛋白表达的影响被引量：3
- 2009年
- 应用乳酸脱氢酶（LDH）活力测定、透射电镜、免疫组化和Caspase-3活性分析等技术，检测转化生长因子β1（TGF—β1）对奶牛乳腺组织细胞活性、凋亡和HSP70蛋白表达的影响。用10ng·mL^-1TGF—β1处理乳腺组织48h，分别在不同时间点收集组织和培养液检测各指标，以0h不加TGF—β1作为对照组。结果显示，随TGF—β1作用时间的延长组织细胞活率逐渐降低，24h和48h组显著低于对照组（P〈0．05），LDH活性逐渐升高，6、12、24和48h组极显著高于对照组（P〈0．01）。处理12、24和48h组织DNA发生断裂；Caspase-3活性在24h达到高峰，并极显著高于对照组（P〈0．01）；上皮细胞逐渐由腺泡脱落，腺泡塌陷，但间质结构基本完整；超微结构观察显示，48h时上皮细胞呈现染色质凝集、线粒体肿胀等明显凋亡特征，而成纤维细胞胞浆致密、线粒体丰富，结构较完整、处理3～12h后组织过表达HSP70，且均显著高于对照组（P〈0．05）。结果提示：TGF—β1以促进上皮细胞凋亡的方式促进奶牛乳腺发生退化。
- 狄和双杨媛媛王利刚崔群维程凯宁黄静燕王根林
- 关键词：乳腺组织细胞凋亡
