贾杰只
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
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- 环丙沙星单克隆抗体的制备
- 2011年
- 【目的】制备环丙沙星(Crprofloxacin,CPFX)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并对其免疫学特性进行鉴定,为畜产品CPFX残留的快速检测提供技术支持。【方法】采用碳二亚胺法(EDC),将载体蛋白牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)和鸡卵白蛋白(ovalbumin,OVA)分别与CPFX偶联合成免疫抗原CPFX-BSA和包被抗原CPFX-OVA,经紫外(UV)扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术筛选分泌CPFX mAb的杂交瘤细胞株,采用体内诱生腹水法制备CPFX mAb,并对其染色体核型、效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。【结果】UV和SDS-PAGE鉴定结果表明,人工抗原偶联成功;免疫的5只小鼠血清抗体效价均达到了1∶105左右,其中4号小鼠血清CPFX抑制效价较高且IC50最低(17.21μg/L),融合后筛选出1株敏感特异的杂交瘤细胞,命名为3D2。3D2细胞培养上清效价为1∶(1.28×103),腹水效价为1∶(1.6×105)。CPFX mAb对CPFX的IC50为9.95μg/L,对恩诺沙星的交叉反应率为128.39%,与其他同系的喹诺酮类抗生素的交叉反应率很低。【结论】获得了高效价、敏感、特异的抗CPFX mAb,为CPFX残留的快速检测奠定了技术基础。
- 贾杰只陈晓丹雷洁张智英
- 关键词：环丙沙星单克隆抗体ELISA杂交瘤
- 环丙沙星单克隆抗体的制备及其免疫学特性的鉴定
- 环丙沙星（Crprofloxacin,CPFX）属于氟喹诺酮类广谱高效抗菌药物,是获美国FDA批准在美国上市的第二个喹诺酮类药物。对革兰氏阴性菌有很强的杀伤力,能够抑制细菌的DNA螺旋酶,抗菌谱广、低毒、组织穿透力强,被...
- 贾杰只
- 关键词：环丙沙星单克隆抗体ELISA杂交瘤
- 文献传递
- 一种开源方式筛选靶向结合人DYRK1A基因靶位点的锌指蛋白的方法
- 本发明一种开源方式筛选靶向结合人DYRK1A基因靶位点的锌指蛋白的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：(1)3个锌指蛋白库的构建；(2)报告载体和报告菌株的构建；(3)有效锌指库的筛选；(4)有效锌指库的连接、组装；...
- 张智英李战伟杨涵江任刚王令张存芳张婷婷王瑞贾杰只雷洁李亚明支旭勃韩新艳辛颖
- 文献传递
