白文博
- 作品数:2 被引量:8H指数:2
- 供职机构:北京中医药大学东直门医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 体外静水压环境下细胞因子诱导骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化被引量:6
- 2016年
- 背景:骨髓间充质干细胞的诱导分化受到综合因素的共同作用,体外通过一定的细胞力学刺激结合细胞因子复合体共同作用,以期进一步提高干细胞髓核样细胞分化的效率。目的:观察在体外静水压环境下转化生长因子β1联合类胰岛素生长因子1诱导骨髓间充质干细胞向髓核样细胞表型分化的效果。方法:取成年大鼠骨髓间充质干细胞,体外培养、分离及纯化,传代至第3代后分为:静压药物组在体外静水压加载系统中运用转化生长因子β1联合类胰岛素生长因子1诱导骨髓间充质干细胞分化;单纯药物组在体外常压环境下使用转化生长因子β1联合类胰岛素生长因子1诱导干细胞分化;空白对照组将骨髓间充质干细胞置于体外常压环境下普通培养基中培养。结果与结论:培养14 d时,静压药物组可见多角形的髓核样细胞,单纯药物组细胞呈不规则形,空白对照组细胞变化不明显。静压药物组细胞中Ⅱ型胶原蛋白及DNA含量高于其他2组。说明在静水压环境下转化生长因子β1联合类胰岛素生长因子1可成功诱导骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化,且诱导效率高于常压。
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- 关键词:间质干细胞骨髓间充质干细胞诱导分化体外实验
- 益气化瘀补肾方联合TGF-β1诱导大鼠BMSCs向类髓核细胞分化的研究被引量:2
- 2016年
- 目的:观察中药益气化瘀补肾方含药血清联合转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向类髓核细胞分化的效果,探讨益气化瘀补肾方在协同诱导、调节分化方面的作用。方法:取成年大鼠股骨骨髓,贴壁培养法获得原代BMSCs,体外培养、分离及纯化。取第3代大鼠BMSCs,分为空白对照组(A组)、单纯中药含药血清诱导组(B组)、单纯TGF-β1诱导组(C组)以及中药含药血清联合TGF-β1诱导组(D组)。A组加入含10%胎牛血清(FBS)的L-DMEM培养基继续培养,B组为含10%益气化瘀补肾方含药血清的L-DMEM培养基,C组为含10μg/L TGF-β1的LDMEM培养基,D组为含10%益气化瘀补肾方含药血清及10μg/L TGF-β1的L-DMEM培养基。连续培养3、7、14、21 d,采用倒置相差显微镜进行细胞形态学观察,使用Alcian Blue染色检测蛋白多糖表达情况,免疫组化法检测Ⅱ型胶原表达情况,使用RT-PCR方法检测蛋白多糖及Ⅱ型胶原m RNA表达情况。结果:培养3 d时,仅有D组可检出蛋白多糖和Ⅱ型胶原表达。培养至第14天时,D组蛋白多糖、Ⅱ型胶原及其m RNA水平明显高于其它实验组(P<0.05)。结论:TGF-β1可以诱导大鼠BMSCs向类髓核细胞分化,联合中药益气化瘀补肾方含药血清能进一步提高诱导分化的效率,揭示了中药在干细胞组织工程领域的潜在作用。
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- 关键词:益气化瘀补肾方