王耘
- 作品数：28 被引量：47H指数：4
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 食品检测领域中新型检测元件在传感器上的应用研究被引量：1
- 2016年
- 检测元件的实质是待测靶标的受体,在免疫分析、生物传感器等检测手段中已被广泛运用。目前新型检测元件越来越受到人们的关注,主要包括噬菌体展示多肽、亲和体、纳米抗体和分子印迹聚合物等,这些元件除了亲和力和特异性好,还可以通过直接合成或体外筛选获得,且可以固定于纳米材料表面,因此更利于在传感器中使用。文章概括了上述4种新型检测元件的特性以及其组建的传感器在食品检测领域中的热点应用方向,以期更加广泛地开发利用新型检测元件。
- 王耘
- 关键词：传感器
- 抗-Cry2Aa单链抗体分子互作及荧光免疫检测研究
- 2017年
- Cry2Aa毒素是一种新型生物农药,分析该毒素与特异性单链抗体分子互作,并建立快速检测毒素残留的方法对保障食品和生态安全有重要意义。本研究以同源蛋白为模板对单链抗体进行建模,并进行了Cry2Aa毒素与单链抗体的分子对接模拟,确定关键结合位点,以此为基础将单链抗体作为检测抗体,建立了间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法,对大米样品中Cry2Aa毒素进行了检测。利用生物信息学工具模拟获得单链抗体三维结构模型,分子对接结果显示重链可变区81NY82和121SGNY124区域及轻链可变区的245YSSN248氨基酸残基在与毒素结构Ⅱ区识别过程中起关键作用,为建立高效检测方法奠定基础,进一步基于该单链抗体建立的时间分辨检测方法灵敏度(IC10)为0.08 ng/m L,中抑制浓度(IC50)为7.99 ng/m L,线性检测范围(IC20~IC80)为0.24~263.77 ng/m L,且与常规双抗夹心ELISA法检测呈良好线性关系。
- 王耘武爱华张存政刘贤金
- 关键词：单链抗体时间分辨荧光免疫分析同源模建
- 园艺专业安全管理方向检测技术课程教学实践与探讨被引量：1
- 2014年
- 为提高学生的综合素质和研究创新能力,根据本科教学的培养目标和园艺专业安全管理方向检测技术课程的教学特点,从教学内容、教学方法手段及动手实践等环节进行教学改革的初步探索。通过改革取得较好的教学效果,但仍需进一步探索和实践,以完善和提高教学体系。
- 王倩王耘朱丽梅崔群香张爱慧朱士农
- 关键词：园艺安全检测技术教学改革
- 时间分辨荧光免疫法测定土壤中Cry1Ac毒素被引量：2
- 2012年
- 为了建立快速监测土壤中Cry1Ac毒素的方法,本试验利用Cry1Ac多克隆抗体和铕标记的羊抗兔IgG,采用时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)法快速检测5种典型土壤(黑土、黄壤、红壤、紫色土、潮土)中Cry1Ac毒素的回收率。结果表明,该方法最低检出限为0.3μg/L,线性检测范围为0.3～500.0μg/L,批内和批间变异系数均小于10.00%。5种土壤中Cry1Ac毒素的平均添加回收率为75.03%,其中有机质含量最高的黑土的添加回收率最低,且随着不同土壤中有机质含量的降低,添加回收率逐渐升高。间接时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)法与酶联免疫吸附(ELISA)法的测定结果高度相关,相关系数为0.996 7。因此,本试验建立的TRFIA方法可为土壤中Cry1Ac残留检测提供一个新的平台。
- 王耘刘贤进刘媛张存政张霄徐重新
- 关键词：土壤时间分辨荧光免疫分析
- 不同农残去除方法对果蔬营养成分的影响被引量：2
- 2015年
- 以苹果和番茄为试验材料,研究用清水、淘米水、盐水各洗涤5 min后营养元素(Vc)含量的变化和联苯菊酯的残留变化情况。结果表明:对比3种洗涤方式,其中5‰的盐水对于果蔬上联苯菊酯的去除效率最高,苹果的去除率可达到31.84%,番茄的去除率可达到23.50%;同时还可最大限度保留果蔬内的Vc含量,苹果中Vc几乎没有损失,番茄的损失率也只有2%。该试验结果能为人们安全、营养地饮食提供指导性建议。
- 顾鑫严慧甄玉婷陈鹏王亮王耘朱丽梅朱宏
- 关键词：番茄联苯菊酯维生素C
- 伊维菌素单链抗体结构和功能分析
- 2009年
- 以伊维菌素单链抗体cDNA为材料,利用相关计算机软件对编码的蛋白质氨基酸序列及其二级结构进行分析和预测。结果表明,该cDNA序列由798个核苷酸组成,编码266个氨基酸。表达的抗体是一种分泌蛋白,有多个磷酸化位点和蛋白酶切位点,为不稳定蛋白,不稳定系数为49.57,疏水性值为-0.419。
- 温爽王耘刘贤进梁建生
- 关键词：伊维菌素单链抗体
- 不同处理对番茄营养品质及毒死蜱残留量的影响
- 2016年
- 研究水煮、醋浸渍和油炒3种方法对番茄营养品质的影响和对毒死蜱的去除效率,为提高人们的饮食质量提供依据。结果表明:番茄经不同处理后Vc和番茄红素品质指标变化不同,长时间的处理后营养物质都有部分损失,且随着烹饪时间的延长和温度的上升损失程度逐渐升高。但是短时间的醋浸渍不仅对Vc有保护作用而且可以促进番茄红素的释放,在醋浸渍10 min时营养品质最高,此时对毒死蜱的去除率为11.3%,而油炒3min时对于毒死蜱的去除率可达91.4%。
- 王耘郝振萍李海玲
- 关键词：番茄VC番茄红素毒死蜱水煮油炒
- 抗Cry1Ac毒素单链抗体的编码基因及免疫PCR检测方法
- 本发明涉及一种抗Cry1Ac单链抗体的编码序列及噬菌体单链抗体检测Cry1Ac的免疫PCR方法。本发明从天然噬菌体抗体库中淘选获得单链抗体（scFv），其特征在于此单链抗体的特异性是由其重链、轻链可变区序列中CDR区序列...
- 王耘刘贤金张存政刘媛王淮庆
- 文献传递
- 从噬菌体抗体库中筛选抗Cry1Ac蛋白单链抗体被引量：4
- 2009年
- 目的:从Tomlinson J噬菌体抗体库中筛选人源化抗Cry1Ac蛋白单链抗体(scFv)并进行鉴定。方法:以Cry1Ac蛋白为抗原包被固相,经4轮"吸附-洗脱-扩增"过程后,挑取单克隆,用ELISA法测定特异性结合活性,并对其进行基因序列测定。结果:经过4轮筛选,获得了2株能与Cry1Ac蛋白特异性结合的阳性克隆。结论:利用噬菌体抗体库技术可以不经过免疫制备出高特异性的人源化抗Cry1Ac蛋白scFv,为Cry1Ac毒素蛋白检测提供了条件。
- 王耘刘媛王祥钱亚萍刘贤进
- 关键词：噬菌体抗体库单链抗体
- 氨基甲酸酯类农药适体筛选技术的建立被引量：8
- 2011年
- 体外构建1个长度为91个核苷酸、内含30个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库,运用指数富集的配基系统进化技术(SELEX),以氨基甲酸酯类农药的混合药剂作为靶分子,基于核酸分子与靶分子结合时构象会发生改变的原理,分离与靶分子结合的适体,并利用碱裂解法制备ssDNA次级文库。此方法优点在于不需要对农药小分子进行改造。经过9轮循环筛选,对氨基甲酸酯类混合农药的筛选效率从0.70上升到13.32,获得了有特异性的适体。本研究建立了一种非改造型农药小分子适体筛选的新方法,为农药残留快速检测提供条件。
- 王耘贺江王丽刘贤进
- 关键词：适体荧光氨基甲酸酯类农药
