宿静梅
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：海南医学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”海南省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠VCAM-1真核表达质粒的构建及表达被引量：1
- 2007年
- 目的:构建小鼠血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)基因真核表达质粒,了解该质粒是否能在真核细胞中有效表达。方法:以小鼠胚肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA-mVCAM,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染CHO细胞,用Western Blot鉴定该质粒是否能够在真核细胞中表达相应的目的蛋白质。结果:成功扩增了小鼠VCAM-1全长基因cDNA,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA-mVCAM,West-ern Blot方法证实该质粒能在CHO真核细胞中正确表达目的蛋白。结论:成功构建了小鼠VCAM-1基因的真核表达质粒载体,为进一步研究VCAM-1的新功能和免疫治疗奠定了基础。
- 谭光宏宿静梅黄风迎王华黄用豪林映莹
- 关键词：血管细胞粘附分子-1真核表达质粒基因工程
- 小鼠IL-5真核表达质粒的构建和体外表达
- 2007年
- 目的构建小鼠白细胞介素-5(IL-5)基因真核表达质粒,了解该质粒在真核细胞COS细胞中有效表达情况。方法以含有小鼠IL-5基因的克隆质粒pORF9-mIL-5为模板,通过PCR扩增小鼠IL-5全段基因,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3·1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA-mIL-5,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染COS细胞,用WesternBlot鉴定该质粒是否能够在真核细胞中表达相应的目的蛋白质。结果成功扩增了小鼠IL-5全长基因,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA-mIL-5,Westernblot方法证实该质粒能在COS真核细胞中有效表达小鼠IL-5目的蛋白。结论成功构建了小鼠IL-5基因的真核表达质粒载体,为进一步研究IL-5的新功能和免疫基因治疗奠定了基础。
- 谭光宏王才春黄风迎王华黄用豪林映莹宿静梅
- 关键词：白细胞介素-5真核表达质粒
- 哮喘基因治疗研究
- 王才春谭光宏黄风迎宿静梅郑少江王华
- 白细胞介素-5(IL-5)是嗜酸性粒细胞的趁化因子，研究表明肺部嗜酸性粒细胞浸润是导致哮喘炎症病理的主要因素之一。该研究以IL-5为治疗靶标，利用基因工程技术分别构建表达异种同源IL-5真核表达质粒，重组表达干扰IL-5...
- 关键词：
- 关键词：基因治疗药物
