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吴栋才
作品数:
2
被引量:9
H指数:2
供职机构:
武汉大学基础医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
湖北省卫生厅科研基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
何立
武汉大学基础医学院
刘湘
武汉大学基础医学院
蒋明森
武汉大学基础医学院
杨孟祥
武汉大学基础医学院
易新元
中南大学湘雅医学院
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年份
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2006
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诱导小鼠淋巴细胞表达γ-干扰素的血吸虫成虫可溶性抗原组分
被引量:2
2006年
目的 分离纯化日本血吸虫成虫可溶性抗原(soluble adult worm antigens,SAWA)各个组分,并分别鉴定其诱导小鼠脾淋巴细胞表达γ-干扰素(IFN-γ)的能力。方法 常规制备血吸虫SAWA,经十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)层析法分离、收集并透析纯化各抗原组分,SDS—PAGE检测分析其含量及相对分子质量(Mr)。常规制备感染42d小鼠脾淋巴细胞悬液,设立PBS阴性对照组及各组分抗原实验组,分别刺激体外培养的感染小鼠脾淋巴细胞,诱生IFN-γ,用双抗夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组IFN-γ水平,筛选出能诱导IFN-γ高表达的抗原组分。结果 获得20种胁不同且含量较高的SAWA组分抗原,Mr(×10^3)分别为22,23、24、28、40、45、56、62、64、65、68、70、71、74、78、91、95、100、102、105,其电泳图谱均显示为清晰的单一带。各组分抗原均能不同程度地诱导IFN-γ表达,其中Mr(×10^3)为22、24、45、62、64、65的组分抗原诱导IFN-γ的表达量较高,尤其是62×103组分抗原诱导表达IFN-γ水平显著高于其他实验组(P<0.01)。结论 电泳层析法能很好地将日本血吸虫成虫可溶性抗原分成多个组分:62×10^3组分抗原具有诱导小鼠脾淋巴细胞高表达IFN-γ的能力,推测它可能是一个很强的Th1型淋巴细胞活性诱导分子。
王薇
何立
吴栋才
金烈
宗红英
张培喜
关键词:
血吸虫
抗原
电泳
聚丙烯酰胺凝胶
筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原的研究
被引量:7
2006年
目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位。方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Westernblot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出能被早期感染血清所识别的抗原组分。用日本血吸虫感染后21天血清从噬菌体12随机肽库中筛选、富集、纯化、扩增与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆,经动物实验初步评估其对日本血吸虫感染的早期诊断效果。结果SDS-PAGE显示SSA的总条带数多于可溶性成虫抗原(SAWA),但大多为共同抗原。EITB结果显示SSA共出现12条早期反应抗原带,其中97kDa和47kDa抗原分子只能被感染后10天兔血清特异性识别;SAWA仅出现7条反应带,未显示只能被感染后10天兔血清识别的期特异性抗原分子。挑选出3个与感染后21天兔血清具有高亲和力的单克隆噬菌体,混合后分别用于检测感染日本血吸虫10、21d鼠血清中IgG特异性抗体,阳性检出率分别为48.8%和64.4%。结论SSA中的97kDa和44kDa抗原分子及3个噬菌体随机12肽抗原模拟表位可能具有日本血吸虫感染早期诊断价值。
吴栋才
刘湘
何立
蒋明森
杨孟祥
易新元
关键词:
日本血吸虫
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