何庆玲
- 作品数：11 被引量：19H指数：2
- 供职机构：江苏科技大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 蓖麻蚕核型多角体病毒的miRNAs生物信息学预测
- 在解析了蓖麻蚕核型多角体病毒(PhcyNPV)的全基因组序列后,通过生物信息学的方法预测PhcyNPV基因组中的miRNA,共预测到142条miRNAs成熟体分子;再用miRanda、RNAhybird两个软件预测了mi...
- 钱荷英李刚何庆玲罗旭芳徐安英
- 关键词：蓖麻蚕MIRNA靶基因
- 文献传递
- 蓖麻蚕AGO1蛋白基因的克隆及序列与表达特征被引量：2
- 2014年
- 小RNA介导的基因表达沉默机制在昆虫中非常保守。作为RNA诱导沉默复合体(RISC)的关键组分,Argonaute(AGO)蛋白家族成员在RNA干扰途径中起着关键性作用。以蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini)品种海蓝的幼虫头部cDNA为模板,利用RT-PCR和RACE技术克隆了一个编码AGO蛋白的基因,将该基因命名为pcr-AGO1(GenBank登录号:KJ676101)。该基因cDNA全长3 490 bp,包括182 bp的5'-UTR和572 bp的3'-UTR,ORF为2 736 bp,编码911个氨基酸,蛋白质分子质量为101.492 3 kD,等电点为9.31,蛋白质序列中含有AGO家族成员典型的PAZ结构域和PIWI结构域。实时荧光定量PCR检测pcr-AGO1基因在蓖麻蚕的幼虫期、蛹期、蛾期和卵期以及幼虫的头部、脂肪体、表皮、丝腺、中肠和血液等组织器官中均有表达。其中,在卵期的表达量最高,幼虫期最低,并且在除蚁蚕外的整个幼虫期的表达量没有太大变化;在幼虫各个组织中的表达量以表皮最高,中肠次之,在血液和头部的表达量都较低。研究结果提示,该基因可能在蓖麻蚕的整个发育期都发挥相应的功能,并可能参与幼虫表皮细胞的生长调控。
- 何庆玲张月华钱荷英罗旭芳李刚孙平江徐安英
- 关键词：蓖麻蚕基因克隆表达谱实时荧光定量PCR
- 桑树翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)基因的克隆及其在温度胁迫下的表达变化被引量：6
- 2015年
- 翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)是一类广泛存在于真核生物中且具有多种重要生物学功能的蛋白质家族。利用RT-PCR和RACE技术从广东桑(Morus atropurpurea)品种中桑5801号植株的根部克隆了一种TCTP蛋白的编码基因,命名为Ma-TCTP(Gen Bank登录号:KP228013)。Ma-TCTP基因c DNA全长841 bp,包括507 bp的ORF以及101 bp的5'-UTR和233 bp的3'-UTR,ORF编码168个氨基酸,蛋白质分子质量为18.736 2 k D,等电点为4.53。实时荧光定量PCR检测Ma-TCTP基因在桑树的根部、茎部和叶片中均有表达,其中在根部组织中的表达量最高,茎中次之,叶片中最低。在低温(4℃)和高温(35℃)胁迫下,Ma-TCTP基因在桑树根部、茎部和叶片组织的表达量均大幅上升,其中在叶片中的表达量升高最为明显,推测Ma-TCTP基因可能参与桑树对温度逆境胁迫的生理应激响应过程。
- 雷朋何庆玲贺芳吴琼英潘刚
- 关键词：桑树基因克隆实时荧光定量PCR温度胁迫
- 家蚕滞育激素基因的克隆及在多化性和二化性品种间的表达差异被引量：1
- 2015年
- 在之前的试验中给家蚕多化性品种马富(MF)的蛹体注射滞育激素仍无法诱导其产下滞育卵,为探究其原因,从该品种5龄第3天幼虫头部组织克隆了滞育激素基因(Bm DH)的全长c DNA,BLAST比对显示该基因编码氨基酸序列与NCBI数据库中来自家蚕二化性品种大造的Bm DH氨基酸序列(Gen Bank登录号:BAA059713)的相似度为90.1%,但存在差异的序列不包含滞育激素作用的功能区域。运用半定量RT-PCR与实时荧光定量PCR技术检测Bm DH基因在3个不同化性家蚕品种蛹期头部和卵巢的转录水平存在差异,转录水平从高到低依次为二化性家蚕品种C108,多化性品种MF、尼斯塔里;Bm DH在多化性家蚕品种MF的5龄期雌性和雄性幼虫的头部、血液、生殖腺3个组织中有转录,在中肠、丝腺、马氏管、表皮、脂肪体5个组织中没有检测到转录。研究结果初步提示:家蚕无滞育现象可能与体内滞育激素不足有关;但多化性品种MF不能被蛹期体外注射滞育激素诱导产生滞育卵与Bm DH基因的转录表达水平并无直接的关系。
- 何庆玲钱荷英许平震孙平江李刚张月华徐安英
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 家蚕追寄蝇寄生蚕体的血液蛋白质差异表达分析及质谱鉴定被引量：2
- 2014年
- 由家蚕追寄蝇(Exorista sorbillans)寄生于家蚕幼虫体壁与肌肉间引起的多化性蚕蛆病对蚕业生产危害极大。基于家蚕血液在蚕体基础代谢、生长发育及先天免疫中的重要功能,采用双向电泳(2-DE)技术检测被家蚕追寄蝇寄生的家蚕5龄幼虫至蛹期第2天的血液蛋白质表达变化,并对表达水平具有显著差异的蛋白点进行质谱鉴定,明确家蚕在受到追寄蝇感染时与免疫应答以及生理、病理变化过程有关的血液蛋白质。在被追寄蝇寄生的蚕体血液中共检测到24个具有显著表达差异的蛋白点,表达上调的蛋白点有17个,包括在家蚕先天免疫系统中发挥重要作用的肽聚糖识别蛋白-S1、C-型凝集素-10和酚氧化酶-2等;表达下调的蛋白点有7个,包括与家蚕生长发育、体内物质代谢等生物学过程相关的蛋白质。血液蛋白质的表达变化提示,当蚕体受到追寄蝇感染时其先天免疫系统被激活,生长发育和体内物质代谢等也受到影响。
- 高丽许平震张美蓉何庆玲陈立华罗旭芳徐安英
- 关键词：差异表达蛋白双向电泳质谱鉴定
- 蓖麻蚕核型多角体病毒的miRNAs生物信息学预测
- 2016年
- 首先在Gen Bank中下载蓖麻蚕核型多角体(Phcy NPV)全基因组序列,通过生物信息学的方法预测表明,Phcy NPV基因组中有142条miRNA成熟体分子;再用miRanda、RNAhybird 2个软件预测miRNAs对病毒自身的靶基因,提取有共同交集的33条miRNA。用Phcy NPV感染蓖麻蚕,取感病蓖麻蚕的脂肪体组织,提取总RNA;用逆转录PCR(reverse transcription PCR,简称RT-PCR)验证有共同交集的33条miRNA,确定其中6条为miRNA成熟体序列,分别是Phcy-miR-996_5p、Phcy-miR-696-5P、Phcy-miR-664_3p、Phcy-miR-30_5p、Phcy-miR-217_5p、Phcy-miR-1483_3p。这6条可能的miRNA对应的靶基因涉及病毒的融合蛋白、多角体蛋白等结构蛋白,以及一些蛋白激酶包括激活解旋酶表达的极早期基因等,推测其潜在的靶基因参与病毒复制及侵染的重要过程。
- 钱荷英李刚何庆玲罗旭芳徐安英
- 关键词：蓖麻蚕核型多角体病毒MIRNA生物信息学
- DH对家蚕MF不滞育机理研究
- 养蚕业是中国农业的重要组成部分，尤其是在西部地区，对增加农民收入起着重要作用，近几年桑蚕业的综合利用也得到了较大发展。作为蚕丝业的主角-家蚕，其生长发育过程所体现的化性，眠性以及其他的生活习性和优质蚕茧的生产，优质蚕种的...
- 何庆玲
- 关键词：家蚕基因克隆种质资源
- 蓖麻蚕核型多角体病毒的miRNAs 生物信息学预测及初步验证
- 通过生物信息学的方法预测了PhcyNPV 基因组中142 条miRNA 成熟体分子,再用miRanda、RNAhybird 两个软件预测了miRNAs 对病毒自身靶基因进行预测,提取有共同交集的miRNA 33 条。用R...
- 钱荷英李刚何庆玲罗旭芳赵国栋徐安英
- 关键词：MIRNA生物信息学
- 家蚕滞育激素受体基因的克隆及在多化性和二化性品种间的表达差异被引量：1
- 2015年
- 为探究无滞育多化性家蚕品种‘MF'体外注射滞育激素(DH)后不能产下滞育卵这一现象是否与DH诱导的下游信号通路受阻有关,丰富鳞翅目昆虫的滞育发生机理,本研究从滞育激素信号接受器——滞育激素受体(DHR)人手,从该家蚕‘MF'品种中克隆了DHR基因的全长cDNA,结构分析表明该基因编码的蛋白质与其他家蚕品种存在差异。运用半定量RT-PCR及qRT-PCR技术检测滞育激素受体基因在不同家蚕品种蛹期的血液和卵巢以及同一家蚕品种‘MF'5龄幼虫的不同组织(血液、头部、脂肪体、丝腺、中肠及卵巢)中的表达水平。结果表明:DHR在家蚕‘MF'品种幼虫的5个组织中都有表达,在血液和卵巢组织中表达较高;另外该基因的表达水平在不同化性家蚕品种存在差异,即使在同为无滞育多化性的2个品种间也存在显著差异,在‘MF'品种中的表达水平明显低于‘尼斯塔里'。推测滞育激素受体的表达量不足可能与‘MF'品种蛹期注射滞育激素不能产生滞育卵有一定的关联。
- 何庆玲钱荷英孙平江罗旭芳李刚张月华徐安英
- 关键词：家蚕基因表达家蚕品种实时荧光定量PCR
- 蓖麻蚕核型多角体病毒的miRNAs生物信息学预测
- 在解析了蓖麻蚕核型多角体病毒(PhcyNPV)的全基因组序列后,通过生物信息学的方法预测PhcyNPV 基因组中的miRNA,共预测到142 条miRNAs 成熟体分子;再用miRanda、RNAhybird 两个软件预...
- 钱荷英李刚何庆玲罗旭芳徐安英
- 关键词：蓖麻蚕MIRNA靶基因
