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基于基因表达谱芯片杂交分析Lamprey-PHB2转染前后Chang liver细胞的基因表达差异: 2018年; 选取了10个物种与本课题组前期克隆得到的东北七鳃鳗抗增殖蛋白2(Lm-PHB2)进行氨基酸序列相似性对比,检测PHB2基因进化水平,结果表明各物种的PHB2氨基酸序列在PHB结构域处高度保守,但在N-端和C-端氨基酸序列保守性较低.将重组质粒pEGFP-N1-Lm-PHB2瞬时转染入张氏肝(CHL)细胞后,利用基因表达谱芯片技术分析基因的表达差异.结果显示CHL细胞中共有270条显著差异表达基因,其中显著上调基因共141条,显著下调基因共129条,涉及细胞信号转导、细胞周期调节、细胞增殖、细胞代谢和细胞凋亡等多个方面.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)对基因表达谱芯片分析结果进行验证,结果显示转染pEGFP-N1-Lm-PHB2质粒后,细胞周期基因CDC25C、氧化应激相关基因(CAT,SOD,GST)和抗细胞凋亡基因HAX1均有显著性差异.; 时颖李晴郭思呈李庆伟李铁松; 关键词：七鳃鳗基因表达谱芯片基因表达

抗增殖蛋白2：一种线粒体和细胞核之间的重要媒介被引量：3: 2018年; 抗增殖蛋白2(prohibitin2,PHB2)是抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)家族中的重要成员,是主要定位于线粒体内膜的多功能蛋白质,对维持线粒体形态和功能的稳定具有重要作用,同时也是细胞内稳态和细胞分化的重要调节因子。随着对PHB2的深入研究,已发现PHB2是一种线粒体和细胞核之间重要的媒介。PHB2是细胞中必不可少的,它直接参与多种细胞进程并发挥重要作用,如调节转录因子的转录活性、调节细胞的分化与凋亡、维持线粒体形态和功能的稳定、调节姐妹染色单体的结合、神经细胞的修复和再生、轴突的发育形成和增强细胞氧化应激耐受性。近年来,PHB2在病理生理学中的作用及其在疾病治疗中的药靶地位受到高度重视。本文对PHB2研究的最新进展进行综述。; 时颖李铁松李庆伟; 关键词：线粒体细胞核功能蛋白

东北七鳃鳗Lm-PHB2的生物信息学分析及多克隆抗体制备被引量：1: 2016年; 在首次获得七鳃鳗Lm-PHB2的全长cDNA序列的基础上,对预测得到的LmPHB2氨基酸序列进行了生物信息学和进化分析;经原核表达并大量提纯获得重组蛋白rLm-PHB2,在此基础上,优化兔抗七鳃鳗抗体的免疫制备流程.结果表明:七鳃鳗LmPHB2蛋白的理论分子质量约为33.25ku,理论等电点为9.85,为亲水性蛋白;信号肽预测结果表明其ORF区中无信号肽.该蛋白有1个位点可能发生N型糖基化,不存在棕榈酰化位点;跨膜区预测表明Lm-PHB2仅在内膜区域存在跨膜结构.系统发育树分析表明Lm-PHB2的进化地位在头索动物与脊椎动物之间,与物种进化规律基本一致.制备了效价≥64万且与重组蛋白rLm-PHB2和天然Lm-PHB2蛋白均有很强的特异性结合能力的多克隆抗体.Western Blot表明,Lm-PHB2蛋白在七鳃鳗的心、肾、肝和肠中均有表达,其中,在心脏组织中表达量最高.本实验为PHB2基因的进化研究提供了理论依据,并为七鳃鳗Lm-PHB2蛋白功能研究奠定了基础.; 李铁松时颖高杨李莹莹刘欣李庆伟; 关键词：七鳃鳗生物信息学抗体制备

利用Imaging-PAM研究小球藻和杜氏盐藻对石油胁迫的响应: 2015年; 利用近岸海水大量培养微藻制备微藻燃料已成为新的研究热点,而近海海域常受到石油污染,因而研究微藻光合系统受石油胁迫的影响是确定藻种培养可行性的重要指标.单细胞藻悬液在暗处理后经激发,可检测到叶绿素的荧光信号.利用ImagingPAM来研究小球藻和杜氏盐藻的光合系统对石油胁迫的响应,通过分析2种微藻的初始荧光产量(F0)和充分暗适应后光合系统Ⅱ的最大光化学效率(Fv/Fm)得出小球藻自身的光合能力强于盐藻;通过分析非调节性能量耗散的量子产额Y(NO)、非光化学淬灭系数(NPQ)和光化学能量转化的有效量子产量[Y(Ⅱ)]得出小球藻在石油污染环境下光合作用的稳定性优于盐藻.因此,可以得出小球藻的光合系统受石油胁迫影响较小,较盐藻更适宜利用石油污染的海水进行培养.; 李铁松王彤佟少明时颖王旭浩宁淑香; 关键词：小球藻杜氏盐藻石油污染叶绿素荧光

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时颖