冯程程
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：北京理工大学生命学院更多>>
- 发文基金：国家重大科学仪器设备开发专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Salsolinol合成酶的克隆和表达被引量：1
- 2015年
- Salsolinol合成酶是一种催化多巴胺和乙醛生成Salsolinol的酶,与帕金森病发病机制密切相关。研究发现Salsolinol合成酶与泛素的氨基酸序列高度相似,只有4个氨基酸位点有差异。本研究以泛素基因为模板,采用聚合酶链式反应技术对4个位点进行定点突变,将突变基因片段克隆到载体p ET30a-GST上,构建p ET30a-GST-Sal synthase重组载体,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达融合蛋白,经亲和层析柱纯化。结果表明,实现目的位点的定点突变,获得Sal合成酶基因,成功构建了GST-Sal synthase原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高纯度的GST-Sal synthase融合蛋白。
- 冯程程陈薛钗刘可夫曾凡庆宏邓玉林
- 关键词：定点突变克隆表达蛋白纯化
