高爱华
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：天津科技大学食品工程与生物技术学院教育部食品营养与安全重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学更多>>
- 绿豆过敏原多克隆抗体制备及间接竞争酶联免疫检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 目的:建立绿豆过敏原间接竞争ELISA检测方法。方法:用碱溶酸沉的方法从绿豆中提取总蛋白,考马斯亮蓝G-250法定量蛋白,SDS-PAGE分析总蛋白的分子质量。采用总蛋白免疫新西兰大耳白兔,初次免疫采用弗氏完全佐剂乳化,免疫剂量为1 mg/只;分别在初免后第14、28、32和46天加强免疫,共4次,以弗氏不完全佐剂乳化,免疫剂量为0.5 mg/只。采用Protein A-Sepharose 4B亲和层析纯化抗血清。通过优化绿豆蛋白的包被量和抗体的稀释倍数,建立间接竞争酶联免疫检测方法。结果:经SDS-PAGE分析得到主要的绿豆蛋白分子质量为50、38、34和25 ku。免疫制备的抗绿豆过敏原多克隆抗体效价达到32 000。包被绿豆蛋白0.1μg/孔,抗体稀释1∶32 000,建立了间接竞争酶联免疫检测方法,灵敏度IC50=(0.72±0.035)μg/mL,检出限IC15=(0.72±0.035)μg/mL。结论:成功建立了绿豆过敏原间接竞争酶联免疫检测方法。
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- 关键词：多克隆抗体
- 除草剂莎稗磷多克隆抗体的制备
- 2012年
- 根据莎稗磷的化学结构特征,设计合成莎稗磷半抗原,采用活化酯法与牛血清白蛋白偶联,免疫新西兰大耳白兔获得抗莎稗磷多克隆抗血清用于免疫分析试验。抗血清效价高达1∶160 000,100μg/L莎稗磷的抑制率达到了59.76%。抗体经Protein A-Sepharose 4B亲和层析柱纯化后,50μg/L莎稗磷的抑制率提高到92%,其它有机磷农药及结构类似化合物与抗体的交叉反应率均小于0.01%,表明了所制备莎稗磷抗体的高特异性。
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- 关键词：莎稗磷免疫分析多克隆抗体高特异性
