肖淑君
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：广东省农业攻关项目广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪去乙酰化酶SIRT2的克隆表达
- 2014年
- 目的:原核表达猪去乙酰化酶SIRT2(sirtuin 2,SIRT2)。方法:采用RT-PCR扩增包含SIRT2的完整编码序列;通过酶切连接将SIRT2完整编码序列克隆至表达载体pET28a(+)中,转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达和亲和层析纯化;经免疫印迹Western-blotting分析初步评价SIRT2的抗原性和特异性。结果:重组原核表达质粒pET28a-SIRT2经测序证明构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量约47 kDa,能被相关抗体所识别。结论:具有免疫原性的猪去乙酰化酶SIRT2在大肠杆菌中成功表达,可以此为基础进一步研究猪的SIRT2。
- 江学斌马苗鹏司徒嘉欣肖淑君杨军楚品品蔡海明施巨清张玲华
- 关键词：原核表达
- 猪SIRT1基因的克隆、表达及多克隆抗体制备
- 2014年
- 根据GenBank中猪SIRT1mRNA序列设计引物,使用杜大长商品猪大脑RNA经RT-PCR扩增得到猪SIRT1基因全长表达序列,通过Ω-PCR将SIRT1蛋白末端抗原表位序列插入载体pET-28a(+),在大肠杆菌中表达并纯化得到45ku大小的蛋白,以其免疫新西兰大白兔并制备出抗体滴度达212的多克隆抗体。结果表明,成功制备出可以特异性识别猪SIRT1蛋白的抗体。
- 江学斌马苗鹏肖淑君司徒嘉欣杨军施巨清蔡海明张玲华
- 关键词：SIRT1PCR多克隆抗体
