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水稻抽穗期基因OsDof6功能的初步研究被引量：3: 2020年; 【目的】以前期通过穗发育芯片筛选到一个水稻Dof家族转录因子OsDof6为研究对象,进一步探究OsDof6的表达模式与生物学功能。【方法】对OsDof6的基因、蛋白及启动子序列进行生物信息学分析,利用CRISPR/Cas9技术对该基因进行定点编辑,通过实时定量PCR和亚细胞定位技术分析该基因的表达模式。【结果】对该基因的启动子序列分析表明,该基因启动子中存在大量与光响应、激素响应及胁迫响应相关的顺式调控元件。利用CRISPR/Cas9技术获得了2种不同突变类型的功能缺失突变体9522Dof6-3和9522Dof6-4。对突变体T1株系进行表型观察发现,相较于对照,两种突变体在营养生长阶段分蘖数明显降低,转入生殖生长阶段后,两种突变体的抽穗时间推迟约3 d。实时定量PCR结果显示OsDof6在水稻根、茎、叶和穗中均有不同程度的表达,在穗发育后期相对表达量明显提高;通过亚细胞定位分析发现OsDof6定位于细胞核。【结论】初步判断OsDof6基因会影响水稻分蘖数与抽穗期。; 张立成李懿星王天抗邱牡丹宋书锋董皓李磊刘建丰刘建丰; 关键词：水稻抽穗期

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点编辑水稻赤霉素2氧化酶基因OsGA2ox10被引量：2: 2020年; 通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,以粳稻品种‘沈农265’为遗传背景对水稻赤霉素2氧化酶基因OsGA2ox10进行编辑,获得了该基因编码序列翻译提前终止纯合突变体ga2ox10-1、ga2ox10-2和ga2ox10-3。经RT-PCR检测突变体中OsGA2ox10基因表达量相比野生型极显著降低。表达模式分析显示该基因在根、茎、叶、叶鞘、幼穗中均有表达,其中在幼穗中表达量最高。亚细胞定位结果显示OsGA2ox10与GFP融合蛋白定位于细胞质中。本实验的开展为进一步明确GA2ox10基因功能和该基因在赤霉素代谢失活调控网络中的作用提供了依据。; 惠索祯常俊楠邱牡丹李磊王建龙; 关键词：亚细胞定位赤霉素

水稻的雌性不育研究进展被引量：1: 2023年; 水稻雌性不育是由水稻雌性器官发育异常引起的不育。随着生物技术及功能基因组学的发展,对雌性不育的研究已从细胞学水平过渡到对分子机理的探索。科研工作者不断挖掘新的水稻雌性不育突变体,也定位和克隆到一些水稻雌配子发育相关基因。由于雌配子体发育过程的复杂性,导致水稻雌配子发育调控网络中的分子机理研究还有所欠缺。本研究通过水稻雌性不育的突变类型、雌性器官发育异常导致的基因突变,描述了水稻雌性不育的发生机理及雌性不育突变材料在机械化制种中的应用,为雌性不育的深入研究提供理论依据。; 黎燕霞宋书锋王天抗李懿星董皓邱牡丹李磊张龙辉李莉; 关键词：水稻雌性不育分子机理

引发剂结合固体基质引发对三倍体西瓜种子发芽性能的影响被引量：5: 2010年; 种子发芽出苗率低是制约三倍体无籽西瓜生产的主要原因。试验以红小玉为材料,用0.1%H2O2,0.1%CuSO4＋2%KNO3＋KH2PO4混合液和20 m g/kg的GA3丙酮溶液作引发剂,在固体基质中吸湿32 h后回干,通过砂床发芽试验,测定种子萌发率和幼苗素质。结果表明,种子萌发率提高了44.6~62.4个百分点,并显著提高了发芽势、幼苗鲜重和根系活力。其中,GA引发处理的种子发芽率达88.23%,与破壳处理（CK 1）接近,比未处理（CK 2）提高了62.47个百分点;3种处理的苗鲜重均显著高于CK 1和CK 2,处理间差异不显著;3种处理均显著提高了幼苗根系活力,以0.1%H2O2处理效果最佳。3种引发剂结合固体基质引发处理,均可有效提高三倍体西瓜种子萌发率,并为培育壮苗奠定了基础。在固体基质处理过程中,西瓜种子吸水缓慢,给细胞膜的修复提供了时间,是种子可以达到引发促萌的原因之一。; 李磊陈波张海清; 关键词：西瓜种子引发剂种子萌发

水稻B3转录因子OsL1的生信分析及表达模式: 2021年; B3转录因子是植物特有的转录因子,与植物花形态建成、激素信号转导、种子生长发育及植物逆境胁迫响应密切相关。前期研究中,利用穗发育芯片筛选到一个OsL1基因。生物信息学分析发现,OsL1基因位于水稻4号染色体,基因全长4262 bp,编码433个氨基酸,蛋白分子量为48.7 kD,序列比对和系统发育分析表明OsL1属于B3家族转录因子,不含信号肽剪切位点和跨膜结构域,亚细胞定位于细胞核。启动子序列分析发现,该基因启动子中含有8个光响应元件及部分激素响应元件。实时PCR分析发现OsL1在水稻根、茎、叶、和穗中均有表达,其中在根和穗发育7期表达量较高,进一步克隆OsL1启动子区域,构建pCAMBIA1301-OsL1-GUS表达载体,遗传转化并鉴定获得转基因植株,The previous study在水稻根、茎、叶、和穗中均检测到了GUS信号,表明OsL1属于组成型表达。以上结果为深入研究OsL1基因在水稻生长发育过程的生物学功能提供了科学依据。; 李磊邱牡丹董皓沈泓沈泓宋书锋李懿星黎燕霞张龙辉李莉李莉; 关键词：水稻亚细胞定位

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李磊