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李文丹
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江汉大学医学院
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2012
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利用PCR产物一步法敲除大肠埃希菌的外排泵基因acrAB
2012年
通过电转化将一段PCR产物引入宿主菌BW25113/pIJ790细胞内,PCR产物两端有与染色体同源的30个核苷酸序列,中间是抗生素抗性基因。pIJ790上编码λ噬菌体的3个重组蛋白:Exo、Bet和Gam组成Red重组系统,可实现线性片段的一步法高效重组,以PCR产物中的抗生素抗性基因取代靶基因。通过该方法得到了大肠埃希菌的外排泵基因acrAB敲除突变株,该菌株在抗菌物质的抗菌机制研究方面能发挥一定的作用。
纪芳
鄢志雄
李文丹
祝贺
梁勇
关键词:
RED重组
基因敲除
外排泵基因
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