邱琳
- 作品数:3 被引量:17H指数:1
- 供职机构:浙江大学信息科学与工程学院工业控制技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:理学医药卫生天文地球更多>>
- 自吸离散化数字PCR芯片的研究
- 数字PCR技术能进行单分子扩增,实现核酸初始拷贝数绝对定量,因此被认为是极为准确灵敏的检测技术[1],在生命科学领域意义重大。目前报道的主要数字PCR装置有:离心转盘芯片[2]、滑动芯片[3]、液滴芯片[4,5]以及集成...
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- 关键词:单分子检测微流控芯片肿瘤检测
- 一种可绝对定量核酸的数字PCR微流控芯片被引量:17
- 2013年
- 构建了一种新型的可进行核酸单分子扩增和核酸绝对定量的数字聚合酶链式反应(数字PCR)微流控芯片.应用多层软光刻技术,以聚二甲基硅氧烷(PDMS)作为芯片材料,盖玻片作为基底制作了具有3层结构以及微阀控制功能的微流控芯片.芯片的大小与载玻片相当,可同时检测4个样品,每个样品通入芯片后平均分配到640个反应小室,每个小室的体积为6 nL.以从肺癌细胞A549中提取的18sRNA为样品检测了该芯片的可行性.将样品稀释数倍后通入芯片,核酸分子随机分布在640个小室中并扩增.核酸分子在芯片中的分布符合泊松分布原理,当样品中待测核酸分子平均拷贝数低于0.5个/小室时,则每个反应小室包含0个或1个分子.经过PCR扩增后,有模板分子的小室检测结果为阳性反应,而无模板分子的小室为阴性反应,最后通过计数阳性反应室的个数,可绝对定量原始待测样品中的目标DNA分子拷贝数.实验结果表明,该数字PCR芯片可实现DNA单分子反应和核酸绝对定量,具有成本低、灵敏度高、节省时间和试剂以及操作简单等优点,为数字PCR方法在普通实验室的应用提供了一种新途径,可用于癌症及感染性疾病的早期诊断、单细胞分析、产前诊断以及各种细菌病毒的核酸检验等研究.
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- 关键词:微流控芯片核酸定量
- 自吸离散式数字核酸环介导等温扩增芯片
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