曾春华
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 姜黄素衍生物对实验性非酒精性脂肪性肝炎的治疗作用被引量：6
- 2011年
- 目的观察姜黄素衍生物对实验性非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的治疗作用。方法60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、等渗盐水对照组（等渗盐水组）、姜黄素灌胃组（姜黄素组）、姜黄素衍生物静脉注射组（衍生物组），每组12只。通过高脂饲料结合四氯化碳的复合方式建立大鼠NASH模型。造模后分别给予姜黄衍生物尾静脉注射及姜黄素灌胃治疗（剂量50mg／kg），等渗盐水作为对照。治疗结束后取血及肝组织，计算肝指数，进行血脂和肝功能指标检测及病理组织学检查。RT-PCR法检测肝组织中肿瘤坏死因子α（TNFα、核转录因子κB（NF-κB）、羟甲戊二单酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶的mRNA转录水平，Westernblot检测TNFa及NF-KB的蛋白质表达水平。多组计量资料比较采用成组设计的方差分析、Kruskal-WallisH检验，两两比较采用LSD法、成组设计的Wilcoxon秩和检验，P〈0．05为差异有统计学意义。结果与等渗盐水组比较，衍生物组大鼠血清ALT、AST和总胆固醇水平明显下降[分别为（69．20±27．58）U／L对比（102．43±47．29）U／L、（i58．00±39．15）U／L对比（229．50±105．20）U／L和（2．08±0．30）mmol／L对比（2．58±1．02）mmol／L，P值均〈0．05]；肝组织纤维化程度（s）显著改善（0．67±0．52对比2．50±0．40，P〈0．05）；TNFα、NF-κB及HMG-CoA还原酶的mRNA表达明显下调（P值均〈0．05），TNFα和NF-κB的蛋白质表达也明显下调（P值均〈0．05）。相对于姜黄素组，衍生物组大鼠肝指数及血清ALT、AST明显下降[分别为4．88％±0．62％对比5．16％±0．61％、（69．20±27．58）U／L对比（82．5±33．23）U／L和（158．00±39．15）U／L对比（211．75±106．30）U／L，P值均〈0．05】；肝组织脂肪变（F）及炎症（G）程度明显减轻（分别为1．17±0．41对比2．20±1．10和I．50±0．55对比2．40±0．58，P
- 曾春华曾萍邓艳红沈能彭明利刘杞任红
- 关键词：姜黄素脂肪肝衍生物非酒精性脂肪性肝炎
- 利用pSOS系统筛选靶向HBV病毒X基因的siRNA
- 2010年
- 构建靶向乙肝病毒(HBV)X基因的真核表达载体pSOS-X-siRNA和pSOS-siRNA,转染肝癌细胞系HepG2和HepG2.2.15,筛选和验证高效siRNA。设计4个靶向X基因siRNA,将siRNA和HBx基因插入载体pSOS得重组质粒pSOS-X-siRNA;pSOS-X-siRNA经PacI酶切去除目的片段HBx后得pSOS-siRNA。将质粒pSOS-X-siRNA和pSOS-siRNA分别转HepG2和HepG2.2.15肝癌细胞株。荧光显微镜下观察HepG2细胞绿色荧光(GFP)减弱程度预估干扰效率。ELISA检测HepG2.2.15细胞上清HBsAg、HBeAg表达,Western blotting检测胞内蛋白HBsAg、HBcAg表达,Real time PCR检测胞内HBsmRNA、HBx mRNA的转录。转染4d后,siRNA4使HepG2细胞的GFP信号表达程度最低,为阴性对照的9%,预测其干扰效果最强。siRNA4使HepG2.2.15细胞转染后4d上清的HBsAg蛋白表达为对照的(13.92±1.14)%(P<0.05)、HBeAg为(21.69±4.92)%(P<0.05),胞内的HBsAg、HBcAg蛋白表达量灰度比值为0.175±0.025、0.0825±0.028,均为各处理组中最低(P<0.01),HBs mRNA和HBx mRNA分别降为对照的0.237±0.028(P<0.01)、0.110±0.022(P<0.01),差异有统计学意义,证实siRNA4为高效干扰位点。利用pSOS成功筛选并验证构建靶向HBV X基因的siRNA靶点。
- 韦德芳高健曾春华彭明利任红
- 关键词：PSOS乙肝病毒X基因RNA干扰
