曲宇杰
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：聊城大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 大麦黄矮病毒运动蛋白形成同型二聚体的功能研究(英文)
- 2011年
- [目的]利用荧光双分子互补技术研究大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-PAV,MP)形成二聚体的可能性,并研究MP同型二聚体与病毒运动之间的关系。[方法]将双分子荧光互补载体中包含多克隆位点、35S启动子及终止子的DNA片段构建到拷贝数较高的植物表达载体pCAMBIA1300上,然后以BYDV-PAV的全长cDNA为模板,根据GenBank中登记的BYDV-MP的基因序列设计引物,通过PCR扩增得到目的基因片段BYDV-MP,克隆到经过改造的双分子荧光互补载体pCAMBIA1300-NE、pCAMBIA1300-CE上,得到了重组的双分子荧光互补载体。电击转化农杆菌,利用农杆菌渗透注射技术注射到烟草叶片,荧光显微镜下观察植物体内的蛋白互作现象。[结果]农杆菌渗透注射后,2～5d观察双分子荧光互作现象,MP蛋白互作组及正对照组叶片产生黄色荧光,负对照组未有荧光现象。[结论]BYDV-MP在植物体内形成同源二聚体,该研究结果为进一步深入开展BYDV运动过程和机理等研究提供了理论依据。
- 赵阳曲宇杰刘国富曹雪松
- 关键词：荧光
- 不同化学药剂对紫薇种子萌发和幼苗长势的影响被引量：6
- 2011年
- 紫薇结实率虽高,但容易产生烂种,发芽率较低,成长为健壮幼苗比较困难。本实验采用不同浓度SA和GA3处理紫薇种子,在模拟自然环境和恒温25℃全光照两个不同的自然条件下,研究了紫薇种子的发芽力和幼苗的株高、鲜重、叶面积的变化。结果表明:1～15 mg/L范围内SA处理的种子发芽力较低和幼苗长势较弱。1 000 mg/L GA3处理的种子在模拟自然环境条件下发芽力较高,但是幼苗长势差于1 500 mg/L GA3的处理。恒温25℃条件下,1 500 mg/L处理的种子总体效果最好。
- 孙宽莹陈彦邢柱东曲宇杰
- 关键词：化学药剂紫薇发芽力幼苗长势
- 大麦黄矮病毒运动蛋白基因克隆及原核表达被引量：1
- 2011年
- [目的]构建大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-MP)基因的原核表达载体,并在E.coli-BL21中进行高效表达。[方法]根据GenBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的基因序列设计合成1对引物,应用RT-PCR技术从感染大麦黄矮病毒的叶片中扩增得到大麦黄矮病毒(BYDV)的运动蛋白(MP)基因,利用基因重组技术构建pGEX-4T-1-MP,将其转化至大肠杆菌表达菌株E.coli-BL21(DE3)中,用IPTG诱导重组质粒pGEX-4T-1-MP在E.coli-BL21中进行表达。[结果]对重组质粒进行酶切分析及序列测定,鉴定正确后,与GeneBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的MP基因序列比对分析,同源性达100%。在IPTG诱导下,高效表达出相对分子质量约43 kD的蛋白,蛋白质电泳(SDS-PAGE)结果表明,表达的蛋白条带与预期的GST-MP融合蛋白相符。[结论]成功构建了pGEX-4T-1-MP的原核表达载体,在E.coli-BL21中高效表达了MP,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。
- 曲宇杰赵庆臻卢娇曹雪松
- 关键词：运动蛋白原核表达重组质粒基因重组
- 大麦黄矮病毒运动蛋白形成同型二聚体的功能研究
- 2011年
- [目的]利用荧光双分子互补技术研究大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-PAV,MP)形成二聚体的可能性,并研究MP同型二聚体与病毒运动之间的关系。[方法]将双分子荧光互补载体中包含多克隆位点、35S启动子及终止子的DNA片段构建到拷贝数较高的植物表达载体pCAMBIA1300上,然后以BYDV-PAV的全长cDNA为模板,根据GenBank中登记的BYDV-MP的基因序列设计引物,通过PCR扩增得到目的基因片段BYDV-MP,克隆到经过改造的双分子荧光互补载体pCAMBIA1300-NE、pCAMBIA1300-CE上,得到了重组的双分子荧光互补载体。电击转化农杆菌,利用农杆菌渗透注射技术注射到烟草叶片,荧光显微镜下观察植物体内的蛋白互作现象。[结果]农杆菌渗透注射后,2～5d观察双分子荧光互作现象,MP蛋白互作组及正对照组叶片产生黄色荧光,负对照组未有荧光现象。[结论]BYDV-MP在植物体内形成同源二聚体,该研究结果为深入开展BYDV运动过程和机理等研究提供了依据。
- 赵阳曲宇杰刘国富曹雪松
- 关键词：荧光
