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水／离子液体两相体系中出芽短梗霉催化4-氯-乙酰乙酸乙酯不对称还原合成(S)-4-氯-3-羟基-丁酸乙酯被引量：14: 2008年; 考察了水/离子液体两相体系中出芽短梗霉(Aureobasidium pullulansCGMCC1244)催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原生成光学活性(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((S)-CHBE)的性能,并对反应条件如摇床转速、相体积比、温度、初始底物浓度和pH值等进行了优化.结果表明,在水/1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐体系中,出芽短梗霉催化COBE不对称还原生成(S)-CHBE,在30℃,pH6·6,摇床转速180r/min和不对称反应8h条件下,反应物的转化率、产物ee值和浓度分别达到95·6%,98·5%和47·1g/L.在控制pH值为6·6的情况下,通过分添加底物可有效提高产物(S)-CHBE浓度至75·1g/L.; 张帆倪晔孙志浩郑璞林文清朱坡居年丰; 关键词：离子液体全细胞出芽短梗霉

葡萄糖异构酶固定化细胞的制备方法优化及应用被引量：1: 2014年; 本研究比较了壳聚糖微球法、聚乙烯醇-海藻酸钠包埋法、微晶纤维素法及壳聚糖絮凝-戊二醛交联法对含有葡萄糖异构酶细胞的固定化效果,发现壳聚糖絮凝-戊二醛交联法效果最好。最佳固定化条件为:壳聚糖浓度为0.015%(m/v),戊二醛浓度为0.05%(v/v),交联时间为3 h。采用该方法制备的固定化细胞的酶活为2579 U·g-1,酶活回收率为70.5%,机械强度为1797 g。在分批转化方面,固定化细胞在70℃下重复使用8批次后,转化率仍保持在42.1%以上。此外,固定化细胞在连续柱式转化反应器中连续转化19天,转化得到了约5.7 kg果糖。; 段绪果张帆吴敬; 关键词：葡萄糖异构酶固定化细胞壳聚糖戊二醛

Tyr78-loop对鱼腥藻来源苯丙氨酸脱氨酶活性的影响: 2018年; 【背景】MIO(Methylidene-imidazol-5-one)依赖型酶中,催化因子Tyr所在Loop(Tyr78-loop)的灵活性显著影响酶学性质。【目的】探讨Tyr78-loop对鱼腥藻来源苯丙氨酸脱氨酶酶活的影响,以提高其反应活性。【方法】将该酶的Tyr78-loop进行分子改造,筛选出酶活提高的突变体,并对突变体的酶学性质进行研究。【结果】突变体S73N、E95V、E95K和S73N/E95K在37°C、pH 8.5下比活分别比原酶提高了34%、30%、18%和35%。蛋白三维结构模拟推测在突变体S73N、E95V和E95K中,位于α螺旋与Tyr78-loop交界处的Asn73、Val95和Lys95与附近氨基酸的氢键作用力数目减少,一定程度上增加了Tyr78-loop的柔性。【结论】Ser73位和Glu95位氨基酸的突变增加了Tyr78-loop的灵活性,提高了苯丙氨酸脱氨酶的酶活。; 郭军玲张帆黄楠黄楠周丽; 关键词：酶活定点突变稳定性

重组大肠杆菌生产硫磺矿硫化叶菌β-半乳糖苷酶发酵条件初步研究被引量：2: 2012年; 为了实现来源于S.solfataricus的β-半乳糖苷酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/pT7-7-lacS基因工程菌的发酵培养基进行优化,获得最优的发酵培养基为:甘油浓度为10 g/L,蛋白胨浓度为18 g/L,酵母膏浓度为18g/L,磷酸盐浓度为15 mmol/L,Mg^(2+)离子浓度为5 mmol/L,乳糖诱导浓度为5 g/L。在优化条件下,β-半乳糖苷酶的酶活由初始的43.0 U/mL提高到83.4 U/mL。在此基础上,在3 L发酵罐上进行了初步放大,于DD_(600) 50时开始流加乳糖诱导,最终酶活达172.4U/mL,为摇瓶水平的2倍,为β-半乳糖苷酶的工业化生产奠定基础。; 吴玉飞钱磊张帆陈晟吴敬; 关键词：Β-半乳糖苷酶重组大肠杆菌发酵优化

酸雨胁迫对大豆萌发种子糖代谢动态的影响被引量：3: 2010年; 为了探索酸雨胁迫对大豆萌发种子糖代谢动态的影响,试验采用蒸馏水浸泡大豆种子,再以pH2.5、4.5模拟酸雨(AR)处理大豆种子,考察不同强度AR胁迫对大豆萌发种子可溶性糖、还原性糖、蔗糖、淀粉及α、β-淀粉酶含量的影响。结果表明,第1天AR组的可溶性糖含量上升,第2天明显降低,随后稳定降低;AR胁迫下的第1天-第4天,还原糖含量维持较高水平,第3天-第5天呈下降趋势;pH2.5组在第2天-第5天蔗糖含量减少;AR胁迫的第2天-第4天淀粉含量降低;总体上,AR组的α-淀粉酶活性>CK,但从第5天起pH2.5组的α-淀粉酶活性; 张帆周青; 关键词：酸雨大豆种子萌发糖代谢

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张帆