宁金卓
- 作品数：55 被引量：176H指数：7
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-34a调控瞬时受体电位通道家族4表达对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响
- 2021年
- 目的探讨微小RNA(miR)-34a通过靶向调控瞬时受体电位通道家族4(TRPV4)对人膀胱癌细胞增殖和凋亡作用的影响。方法收集2019年1月至2020年8月武汉大学人民医院23例膀胱癌组织以及相应的癌旁组织临床样本,采用实时荧光定量聚合酶链方法(RT-PCR)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本中miR-34a的表达水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本TRPV4的表达水平。采用噻唑蓝(MTT)法,双染法流式细胞术观察细胞增殖和凋亡水平的改变。采用荧光素酶报告法测定miR-34a与TRPV4的相关性。采用Western blot法检测细胞中TRPV4的蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果miR-34a在膀胱癌旁组织中表达水平(4.38±0.42)高于膀胱癌组织(1.69±0.27),差异有统计学意义(t=-9.332,P<0.05)。TRPV4在膀胱癌旁组织中表达水平(0.39±0.04)低于膀胱癌组织(0.63±0.06),差异有统计学意义(t=15.962,P<0.05)。T24细胞中,miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(58.63±4.35)%、(72.36±6.45)%、(86.45±6.35)%]明显高于miR-34a mimics组24、48、72 h增殖率[(21.65±3.12)%、(36.82±4.51)%、(53.87±5.96)%],差异有统计学意义(t=-8.730、-7.821、-6.480,P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(12.23±1.56)%]明显低于miR-34a mimics组[(31.09±2.43)%],差异有统计学意义(t=11.313,P<0.05)。5637细胞中,miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(44.58±3.87)%、(52.14±5.23)%、(68.35±6.12)%]明显低于miR-34a inhibitors组24、48、72 h增殖率[(56.87±5.63)%、(68.78±6.87)%、(89.45±7.64)%],差异有统计学意义(t=3.116、3.338、3.733,P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(19.39±2.12)%]明显高于miR-34a inhibitors组[(9.94±1.05)%],差异有统计学意义(t=6.919,P<0.05)。生物信息学和荧光素酶报告实验验证了TRPV4是miR-34a的下游靶基因。T24细胞中,miR-34a NC组TRPV4蛋白表达水平(0.61±0.05)明显高于miR-34a mimics组(0.32±0.04),差异有统计学意义(t=-7.844,P<0.05)�
- 阮远蒋焜宁金卓
- 关键词：膀胱癌增殖凋亡
- 精索静脉曲张与男性不育的研究进展被引量：15
- 2017年
- 精索静脉曲张(VC)是比较常见的男性泌尿生殖系统疾病,也是导致男性不育的重要原因。目前,关于VC和男性不育机制的联系已进行了大量临床及实验研究,但其机制仍未完全阐明,可能与睾丸微循环、血管活性物质、氧化应激、一氧化氮、缺氧、免疫及凋亡等多种途径共同作用有关。本文介绍VC所致男性不育的机制。
- 宁金卓程帆余伟民饶婷阮远
- 关键词：精索静脉曲张男性不育
- 外源性硫化氢对人肾癌786-O细胞增殖及凋亡的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探讨外源性硫化氢对人肾癌786-0细胞增殖和凋亡作用的影响及机制。方法 2017年6月一12月于武汉大学人民医院中心实验室进行实验,将不同浓度(0、10、25、50μmol/L)的硫化氢作用于体外培养的肾癌786-0细胞。采用MTT法检测硫化氢对细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测硫化氢对细胞凋亡的影响;Western blot法检测硫化氢对786-0细胞内Caspase-3和Bax蛋白表达的影响;RT-PCR法检测凋亡相关基因Caspase-3和Bax mRNA的表达水平。结果随着硫化氢浓度的增加,786-0细胞增殖率显著降低(F=20.24,P=0.001),凋亡率增加(F=7.66,P=0.004);细胞内Caspase-3和Bax蛋白表达水平增加(F=137.64,P=0.001),凋亡相关基因Caspase-3和BaxmRNA表达均显著增强(F=28.76、63.22,P均=0.001),具有显著的剂量依赖性。结论外源性硫化氢对人肾癌786-0细胞可显著抑制增殖和促进其凋亡,有望成为治疗和预防肾癌的有效药物。
- 胡刚强李浩勇宁金卓
- 关键词：硫化氢786-O细胞增殖凋亡
- 大黄素对糖尿病小鼠肾积水的保护作用被引量：1
- 2021年
- 目的观察大黄素对糖尿病小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)导致肾积水的保护作用。方法选择健康C57BL/6J小鼠15只随机分为3组,糖尿病小鼠+假手术(A组),糖尿病小鼠+UUO(B组),糖尿病小鼠+UUO+大黄素(C组),每组5只。各组予以干预后,血清检测肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理学变化;原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡水平;免疫组织化学法和蛋白质印迹法(Western blot)检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)在肾脏中的表达。组间比较采用t检验。结果A组和C组Cr及BUN指标低于B组(10.811±2.136、8.506±1.424、16.902±0.575、14.834±0.912比19.366±1.614、17.762±1.290,t=7.146、10.770、3.216、4.145,P<0.05)。A组和C组SOD指标高于B组(185.322±5.128、158.130±7.963比128.696±9.610,t=11.624、5.274,P<0.05)。A组和C组MDA指标低于B组(10.388±0.713、15.676±1.408比22.648±1.538,t=16.254、7.502,P<0.05)。HE染色显示A组肾脏结构基本正常,B组肾脏结构明显损害,C组肾脏损伤程度减轻。A、B、C组凋亡指数分别为(9.220±0.829)%、(19.600±1.819)%、(15.520±0.973)%,各组差异具有统计学意义。免疫组织化学法结果显示,与A组比较,B组Caspase-3及bax表达增加、bcl-2表达下降,C组相比于B组Caspase-3及bax表达下降、bcl-2表达增高。Western blot结果显示,A组和C组Caspase-3及bax指标低于B组(0.734±0.091、0.736±0.069、1.154±0.093、1.323±0.079比1.647±0.123、1.986±0.202,t=13.345、13.075、7.138、6.824,P<0.05),A组和C组bcl-2指标高于B组(1.766±0.234、1.282±0.138比0.736±0.097,t=9.086、7.234,P<0.05)。结论大黄素能通过抗氧化应激、抗凋亡作用,改善糖尿病小鼠单侧输尿管梗阻导致的肾损伤。
- 刘聪戚宇诚赵胜韩尚廷宁金卓程帆
- 关键词：大黄素糖尿病单侧输尿管梗阻氧化应激凋亡
- 时钟基因芳烃受体核转位因子样蛋白1通过调控沉默信息调节因子1抑制转化生长因子-β1/Smad蛋白2通路减轻肾小管上皮细胞缺氧/复氧后纤维化的研究
- 2021年
- 目的探讨时钟基因芳烃受体核转位因子样蛋白1(Bmal1)调控沉默信息调节因子1(SIRT1)通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad蛋白2(Smad2)通路在人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧后纤维化中的作用。方法将HK-2细胞随机分组:正常对照组(A组)、缺氧/复氧组(B组);siCTRL组(C组)、siBmal1组(D组)、HR +siCTRL组(E组)、HR+ siBmal1组(F组);HR + siCTRL +二甲基亚砜(DMSO)组(G组)、HR+ siCTRL+白藜芦醇(Resveratrol)组(H组)、HR+ siBmal1 +DMSO组(I组)、HR+ siBmal1 + Resveratrol组(J组),用小干扰RNA(siRNA)敲低Bmal1,各组给予相应干预措施,蛋白质印迹法(Western blot)分别检测细胞Bmal1、SIRT1、TGF-β1、Smad2、磷酸化Smad蛋白2(p-Smad2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)、锌指转录因子1(snail1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达量。使用GraphPad Prism 8.0软件进行统计分析。结果 B组Bmal1、SIRT1指标低于A组(0.310±0.039、0.248±0.037比0.668±0.161、0.416±0.049,t=3.046、3.873,P<0.05),而B组TGF-β1、p-Smad2指标高于A组(0.734±0.022、0.563±0.07比0.280±0.102、0.190±0.021,t=6.115、7.062,P<0.05);D、E组Bmal1、SIRT1指标低于C组(0.547±0.031、0.647±0.029比0.754±0.036,0.311±0.024、0.339±0.017比0.450±0.032,t=6.335、3.289、5.861、4.688,P<0.05),D、E组TGF-β1、p-Smad2指标高于C组(0.314±0.011、0.379±0.007比0.072±0.009,0.399±0.015、0.313±0.025比0.240±0.013,t=15.910、20.150、7.736、3.553,P<0.05);F组Bmal1、SIRT1指标低于D、E组(0.199±0.033比0.547±0.031、0.647±0.029,0.158±0.016比0.311±0.024、0.339±0.017,t=10.950、14.000、6.433、7.606,P<0.05),F组TGF-β1、p-Smad2指标高于D、E组(0.443±0.026比0.314±0.011、0.379±0.007,0.488±0.026比0.399±0.015、0.313±0.025,t=8.472、4.233、4.304、8.488,P<0.05);H组Bmal1、SIRT1指标高于G组(0.964±0.026、0.444±0.031比0.629±0.036、0.339±0.019,t=11.830、4.829,P<0.05),而H组TGF-β1、p-Smad2指标低于G组(0.235±0.022、0.213±0
- 黄欣李维程帆余伟民饶婷阮远袁润宁金卓叶芃赵胜
- 关键词：肾脏缺血再灌注损伤纤维化时钟基因
- 经腹腔及阴囊途径注射GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤保护作用的比较被引量：2
- 2019年
- 目的比较腹腔内与阴囊内注射GYY4137对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的治疗作用.方法选取健康成年雄性SD大鼠40只随机分为4组,每组10只,对照组(A组)、睾丸缺血再灌注损伤组(B组)、睾丸缺血再灌注损伤+GYY4137腹腔给药组(C组)、睾丸缺血再灌注损伤+GYY4137阴囊给药组(D组).A组为假手术组,B、C、D组大鼠建立单侧睾丸扭转复位模型,C组和D组在复位前分别腹腔内和阴囊内注射GYY4137(100μmol/kg).复位4h后取左侧睾丸待测.苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸组织病理改变;测定丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)含量;以原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡指数;采用免疫组织化学检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3的表达水平;蛋白质印迹法(Westem blot)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β蛋白表达水平;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测睾丸组织中bax、Caspase-3、TNF-α和IL-1β表达水平,应用SPSS20.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示.结果B组可见生精细胞广泛脱落坏死,上皮排列紊乱.与B组比较,C、D组损伤明显改善;B组中MDA含量(5.13±0.26)与A组(1.21±0.20)比较显著上升(t=37.790,P<0.05),SOD含量(0.22±0.04)与A组(0.86±0.05)比较显著下降(t=30.710,P<0.05);与B组比较,C和D组MDA含量(3.26±0.23、2.42±0.24)明显下降(t=17.040、24.220,P<0.05),SDA含量(0.42±0.04、0.58±0.04)显著上升(t=11.450、20.070,P<0.05);B组凋亡指数(33.56±1.45)比A组(6.35±1.12)显著增高(t=46.960,P<0.05),C组和D组凋亡指数(22.58±1.67、17.86±1.65)与B组比较明显下降(t=15.700、22.600,P<0.05);免疫组化结果显示B组中bax和Caspase-3的表达水平较A组显著增加,C组和D组较之明显降低;B组TNF-α(0.774±0.042)和IL-1β(0.674±0.037)的表达水平与A组(0.147±0.022、0.136±0.018)比较明显增高(t=41.820、41.350,P<0.05),C组(0.42
- 陈礼嘉宁金卓余伟民饶婷阮远程帆
- 输尿管软镜碎石术治疗孤立肾肾结石的有效性和安全性分析被引量：14
- 2019年
- 目的探讨输尿管软镜碎石术(FURL)治疗孤立肾肾结石的疗效和安全性.方法 回顾性分析2015年3月至2018年5月于我院行FURL治疗的46例孤立肾肾结石患者的临床资料.男34例,女12例;年龄(48.6±9.6)岁(34~ 78岁);结石最大径(15.3 ±4.8)mm(6~25 mm).肾结石位于左侧29例,右侧17例;肾下盏结石12例,非肾下盏结石34例;先天性孤立肾3例,功能性孤立肾31例(对侧肾小球滤过率<10 ml/min),后天性孤立肾12例(失肾原因:肾结石7例,肿瘤4例,结核1例).术前血清肌酐(116.38±25.77) μmol/L.所有患者均采用全麻,取截石位,输尿管软镜联合钬激光碎石,辅助取石网篮套取结石,手术均由同一名医生完成.记录患者手术时间、住院时间、手术出血量、手术前后肾功能和血红蛋白变化,以及术后并发症、结石清除率(SFR)等资料.结果 本组46例手术均顺利完成,手术时间(58.6±16.4) min;术后住院时间(5.6±1.4)d.术后血红蛋白下降值(1.4 ±0.9)g/L.术后发生肉眼血尿32例,腰痛3例,发热1例,无严重并发症发生.46例中39例结石清除,一期手术的SFR为84.8% (39/46);7例结石残留,其中5例二期行FURL治疗,2例保守治疗定期观察,二期手术后SFR为95.7% (44/46).一期FURL术后第1天血清肌酐(112.29±20.62) μmol/L,与术前比较差异无统计学意义(P =0.177);一期FURL术后1个月血清肌酐(81.54±10.75) μmol/L,较术前和术后第1天肌酐均明显降低(P<0.01).结论 FURL对于孤立肾肾结石患者是一种安全有效的治疗方法,结石清除疗效确切,出血等并发症发生率低,对肾功能影响小.
- 朱澄村饶婷程帆余伟民阮远张孝斌宁金卓袁润
- 关键词：输尿管软镜孤立肾肾结石肾功能
- GYY4137对精索静脉曲张大鼠附睾上皮细胞凋亡的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨缓释硫化氢供体GYY4137对精索静脉曲张(varicocele,VC)大鼠附睾上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、假手术+GYY4137组、VC组、VC+GYY4137组各15只。VC组与VC+GYY4137组结扎左肾静脉制备VC模型,假手术组、假手术+GYY4137组仅开腹不结扎左肾静脉。VC+GYY4137组、假手术+GYY4137组术后腹腔注射GYY4137(20mg/kg GYY4137溶于1mL生理盐水),1次/d,连续4周,VC组、假手术组腹腔注射等量生理盐水。药物处理4周后处死大鼠,取左侧附睾组织行病理检查,TUNEL法检测4组附睾上皮细胞凋亡指数(apoptotic index,AI),免疫组织化学法检测附睾上皮细胞细胞色素C(cytochrome C,CytC)、caspase-3阳性表达率,Western blot法检测附睾组织CytC、caspase-3蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测附睾组织CytC mRNA、caspase-3mRNA相对表达量。结果药物处理4周,假手术组、假手术+GYY4137组附睾结构正常、上皮细胞排列整齐,VC组附睾组织结构萎缩、附睾管腔结构破坏、间质水肿,VC+GYY4137组附睾结构破坏、间质水肿程度较VC组轻;药物处理4周,VC组、VC+GYY4137组附睾上皮细胞AI[(23.18±2.09)%、(12.73±1.14)%]、CytC阳性表达率[(25.24±1.99)%、(13.88±1.26)%]及caspase-3阳性表达率[(28.20±2.11)%、(17.33±1.28)%]高于假手术组[(5.46±0.46)%、(5.37±0.77)%、(4.52±0.63)%]、假手术+GYY4137组[(5.86±0.55)%、(5.53±0.52)%、(4.93±0.65)%](P<0.05),VC组高于VC+GYY4137组(P<0.05),假手术组与假手术+GYY4137组比较差异无统计学意义(P>0.05);VC组、VC+GYY4137组附睾组织CytC蛋白相对表达量(0.38±0.02、0.27±0.01)、CytC mRNA相对表达量(3.64±0.41、1.55±0.14)、caspase-3蛋白相对表达量(0.27±0.02、0.22±0.01)、caspase-3mRNA相对表达量(4.09±0.36、2.27±0.32)均高于假手术组(CytC蛋白:0.11±0.03;CytC mRNA:1.01±0.04;caspase-3蛋白:0.10±0.01;caspase-3mRNA:1.03±0.15)、假手术+GYY4137组(CytC蛋白:0.12±0.01;CytC m
- 夏煜琦程帆宁金卓余伟民饶婷阮远
- 关键词：精索静脉曲张细胞色素CCASPASE-3
- 长链非编码RNA NEAT1调控微小RNA-506/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶对肾癌786-O细胞生物学行为的影响
- 2021年
- 目的:探讨长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在肾癌中的表达,以及在肾癌786-O细胞中对增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用,以及对微小RNA-506(microRNA-506,miR-506)/组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)信号通路的影响。方法:选取2018年1月至2019年12月武汉大学人民医院收集的38例肾癌组织及癌旁组织样本作为研究对象,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测肾癌组织及相应癌旁正常组织临床样本中lncRNA NEAT1的表达水平;使用在线数据库及采用荧光素酶实验验证NEAT1和miR-506以及EZH2和miR-506的靶向关系;采用噻唑蓝(MTT)法,双染法流式细胞术和细胞迁移侵袭(Transwell)实验观察细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭水平的改变;采用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)法分别测miR-506和EZH2蛋白的表达。组间比较采用t检验。结果:lncRNA NEAT1在肾癌组织中表达水平(4.45±0.31)高于癌旁组织(2.39±0.25),差异有统计学意义(t=8.959,P<0.05)。荧光素酶报告实验结果表明NEAT1序列上有miR-506的结合位点,且EZH2是miR-506的下游靶基因。si-NEAT1组24、48和72 h增殖率[(24.67±3.23)%、(40.82±5.03)%、(56.87±6.12)%]明显低于si-NC组[(62.63±4.35)%、(74.18±6.55)%、(87.45±7.21)%],差异有统计学意义(t=-12.135、-6.997、-5.601,P<0.01)。si-NEAT1组凋亡水平[(23.20±1.92)%]显著高于si-NC组[(9.65±1.34)%],差异有统计学意义(t=10.024,P<0.05)。si-NEAT1组迁移和侵袭数量[(52.35±4.76)、(21.63±2.05)个]显著低于si-NC组[(91.23±7.59)、(42.68±3.98)个],差异有统计学意义(t=-7.517,P<0.05;t=-8.144,P<0.05)。RT-qPCR结果显示,si-NC及si-NEAT1两组的miR-506 mRNA表达量分别为1.00±0.00、3.39±0.26,差异有统计学意义(t=15.922,P<0.05)。si-NEAT1组EZH2蛋白表达水平(0.15±0.02)明显低于si-NC组EZH2蛋白表达水平(0.32±0.03),差异有统计学意义(t=-8.167,P<0.05)。结论:LncRNA NEAT1在肾癌中高表达,其可能通过调控miR-506/EZH2信号途径改
- 柯炜周洪勇胡子好叶清姚小兵宁金卓
- 关键词：肾癌长链非编码RNA微小RNA
- 大蒜素对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用被引量：1
- 2020年
- 目的探讨大蒜素对大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)过程中的保护作用及机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(A组)、假手术+大蒜素组(B组)、肾脏IRI组(C组)、肾脏IRI+大蒜素组(D组)。HE染色观察肾脏组织病理变化;测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;采用原位缺口末端标记检测肾小管上皮细胞凋亡;免疫组织化学染色测定Bax和caspase-3的表达;Western Blot法检测Bcl-2和Cyt-C蛋白表达水平;qRT-PCR法检测肾脏组织中的Bax、Bcl-2、Cyt-C和caspase-3 mRNA表达水平。结果与A组和B组相比,C组可见肾小管扩张和充血,肾小管上皮细胞肿胀和坏死等病理变化;MDA和凋亡水平显著升高,SOD活性显著降低;Bax、Cyt-C和caspase-3的表达水平显著增加,而Bcl-2的表达水平明显减少。与C组相比,D组中显示肾脏病理损伤明显改善;MDA和凋亡水平显著降低,SOD活性显著升高;Bax,Cyt-C和caspase-3的表达水平明显减少,而Bcl-2的表达水平明显增加,差异具有统计学意义。结论大蒜素可减轻氧化应激水平,发挥抗凋亡作用,从而在肾脏IRI过程中发挥保护作用。
- 宁金卓程帆余伟民李浩勇饶婷阮远
- 关键词：再灌注损伤大蒜辣素氧化性应激
