周净
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 供职机构：河南大学更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- JEV-DNA实时荧光定量标准品的构建被引量：5
- 2007年
- 利用TaqMan荧光定量PCR技术,建立JEV-DNA定量标准品的制备方法。通过处理JEV减毒活疫苗提取病毒RNA,进行RT-PCR扩增目的片段,与T载体连接,转化感受态细胞,T-A克隆,测序鉴定后定量。获得预期的重组质粒,建立的标准曲线有较大的线性范围。此法制备的重组质粒标准品可用于对病毒载量进行测定。
- 周净王云龙李智涛李玲玲
- 关键词：标准品实时荧光定量PCR乙型脑炎病毒
- 日本脑炎病毒SA14-14-2株E基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2007年
- 根据GenBank公布的日本脑炎(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14-2减毒株E基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增其E基因全长cDNA,将扩增产物克隆入pUCm-T载体中,测序后亚克隆到原核表达载体pET-32a(+),筛选重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)宿主菌。经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达产物。结果获得了含全长日本脑炎病毒E基因的重组质粒,经测序证实,与GenBank上E基因序列的同源性达到100%。所表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,为制备JEV实验室诊断抗原打下了基础。
- 李玲玲李晨阳吴阳周净王云龙
- 关键词：日本脑炎病毒减毒活疫苗E基因
