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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
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  • 1篇多克隆抗体制...
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
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  • 1篇相关蛋白
  • 1篇抗体
  • 1篇抗体制备
  • 1篇克隆
  • 1篇核表达
  • 1篇C型凝集素

机构

  • 1篇河南大学

作者

  • 1篇马远方
  • 1篇刘广超
  • 1篇柴立辉
  • 1篇吴素霞
  • 1篇王战争
  • 1篇田文志

传媒

  • 1篇中国免疫学杂...

年份

  • 1篇2014
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
破骨细胞抑制凝集素相关蛋白2的真核表达及多克隆抗体制备被引量:1
2014年
目的:为了获得真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和OCILRP2特异性抗体,用于OCILRP2生物学功能的进一步研究。方法:构建了融合人IgG Fc段的小鼠OCILRP2真核表达载体pIg-CD5-OCILRP2,将pIg-CD5-OCILRP2转染CHO细胞,G418筛选稳定表达细胞株;Protein A亲和层析从CHO细胞培养上清中纯化重组蛋白OCILRP2-Fc并免疫家兔制备OCILRP2多克隆抗体。ELISA检测抗血清和多克隆抗体的效价,Western blot验证多克隆抗体的特异性,并应用该抗体检测OCILRP2在树突状细胞(Dendritic cells,DC)中的表达。结果:ELISA结果表明OCILRP2-Fc稳定表达细胞株经过多次传代培养后仍然具有较高的蛋白表达水平;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示纯化后的蛋白只有单一条带出现,且该条带可以被抗人IgG检测到;重组蛋白OCILRP2-Fc免疫家兔获得的抗血清和纯化后得到的OCILRP2多克隆抗体效价分别为1∶1 280 000和1∶320 000,Western blot证明该抗体可以和免疫原OCILRP2-Fc及NIH/3T3细胞中表达的OCILRP2特异性结合。应用该抗体检测OCILRP2在DC的表达发现OCILRP2在成熟DC的表达明显高于不成熟DC。结论:获得了真核表达的重组蛋白OCILRP2-Fc和高效价的OCILRP2特异性抗体,为进一步研究OCILRP2在免疫应答中的功能奠定了基础。
吴素霞柴立辉王战争刘广超田文志马远方
关键词:真核表达多克隆抗体树突状细胞
共1页<1>
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