王振生
- 作品数：4 被引量：6H指数：3
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- 猪皮肤源树突状细胞的分离和鉴定
- 目的：分离出不需要体外诱导树突状细胞(DC),为研究病毒与猪DC的关系奠定基础.方法：将刮下的猪皮肤表皮培养过夜,所分离获得的细胞通过流式细胞术、RT-PCR、吉姆萨染色与扫描电镜进行表型与形态鉴定.结果：试验结果表明,...
- 王振生遇奇李焕荣隋丽华孙英健崔德凤
- 猪皮肤源树突状细胞的分离和鉴定被引量：3
- 2010年
- 分离出不需要体外诱导树突状细胞(DC),为研究病毒与猪DC的关系奠定基础。将刮下的猪皮肤表皮培养过夜,对所分离获得的细胞通过流式细胞术、吉姆萨染色与扫描电镜进行表型与形态鉴定。试验结果表明,通过细胞计数分离到的细胞能达到5×106个细胞,流式细胞术检测细胞CD1a/SWC3a的双阳性细胞率为82.3%;流式细胞术检测CD80/86分子,阳性细胞率为90.2%;通过吉姆萨染色和扫描电镜观察,细胞表面有大量的树突状突起,符合DC的形态特征。通过表型和形态学分析,说明已经成功分离到猪皮肤源DC,为猪病毒性疾病的免疫抑制机理研究奠定基础。
- 王振生遇奇李焕荣隋丽华孙英健崔德凤
- 猪圆环病毒2型感染猪皮肤源树突状细胞炎性反应能力的变化被引量：4
- 2009年
- 用PCV2 B1株经鼻腔接种40日龄SPF仔猪,于接种后3、7、14 d宰杀,收集皮肤源树突状细胞(DC)。利用实时荧光定量PCR技术对感染仔猪皮肤源DC的IL-10、TNF-α、IFN-αI、L-8、趋化因子受体1(CCR1)、CCR5在mRNA转录水平的变化进行定量分析。结果表明,IFN-α在接种后3 d(3DPI)显著下调(P<0.05),TNF-α、IL-10在7DPI时显著上调(P<0.05);趋化因子IL-8在3、7、14 DPI时均下调,差异接近显著;MCP-1在感染后3、14DPI下调,7DPI均上调,但不显著;MIP-1β在3、7DPI明显上调,14DPI恢复正常;趋化因子受体CCR1、CCR5在3、7和14DPI均上调,且7DPI显著上调(P<0.05)。以上结果表明PCV2在感染早期可抑制DC炎性反应的能力,免疫应答失调,影响了动物机体的细胞和体液免疫功能的发挥。
- 王振生聂晓华李焕荣孙英健隋丽华崔德凤
- 关键词：猪圆环病毒2型炎性因子趋化因子趋化因子受体
- 疑似PMWS患猪中PCV2的分离及全基因组序列分析被引量：3
- 2007年
- 将疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）病猪肺脏研磨、过滤除菌后接种无PCVl污染的PKl5细胞，盲传4代，用PCR和免疫过氧化物酶单层试验（IPMA）检测。同时，利用所合成的PCV2全长的特异性引物进行病毒基因组全长的扩增及克隆、测序与比对分析。结果显示，不同传代细胞中PCV2核酸均为阳性，且PCVl特异引物检测为阴性，表明分离到的PCV2无PCVl污染，将该毒株命名为PCV2B1株。序列分析表明，该病毒基因组全长1767lap，与其他毒株的核苷酸同源性在95．4％～99．8％之间，ORFl的氨基酸的同源性在98．4％～99．7％之间，ORF2的氨基酸的同源性在89．7％～100％，核苷酸和氨基酸的序列与保定株BDlA（DQ910865）的序列最接近。
- 王振生李焕荣崔德凤孙英健马乐
- 关键词：猪圆环病毒2型仔猪多系统衰竭综合征
