柴琳
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：天津大学药物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TACI-Fc融合蛋白的基因构建、原核表达及生物活性鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的:构建sTACI胞外区与人IgG1 Fc的重组基因,并进行原核表达和纯化具有生物活性的融合蛋白。方法:通过普通PCR和重叠PCR法,获得sTACI-Fc重组基因,进而构建重组子pET28a-sTACI-Fc,并转入E.coli BL21(DE3)中进行融合蛋白的表达,采用蛋白A凝胶亲和柱进行纯化以及ELISA法检测其生物活性。结果:成功获得了sTACI-Fc的重组基因,pET28a-sTACI-Fc重组子,通过表达和纯化得该融合蛋白,且其能够与BAFF特异性结合,结合活力呈现剂量依赖性,浓度5ng/μl时,两者的吸附达饱和。结论:成功构建了基因大小为1 000bp的sTACI-Fc重组基因,并在原核系统中进行了可溶性表达,得大小约为40kDa的融合蛋白sTACI-Fc,体外实验证实在其浓度为5ng/μl时与BAFF的结合达饱和,为下一步的研究工作奠定了基础。
- 冀丽军白乌仁图雅柴琳孙剑
- 关键词：TACIB细胞活化因子原核表达融合蛋白
