张立智
- 作品数：10 被引量：40H指数：5
- 供职机构：同济大学附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血管内皮生长因子与骨肉瘤的研究进展被引量：2
- 2003年
- 血管内皮生长因子在骨肉瘤血管生长中起着关键的调节作用,并参与骨肉瘤细胞凋亡,与肿瘤的免疫和耐药有关。在治疗中,不应忽视其在骨肉瘤的发生、发展、浸润及转移中的重要作用。
- 张立智蔡宣松梅炯
- 关键词：骨肉瘤血管内皮生长因子基因结构细胞凋亡抗血管新生治疗
- P53基因治疗在骨肉瘤中的应用及展望被引量：2
- 2002年
- 张立智蔡宣松
- 关键词：P53基因骨肉瘤基因治疗MDM2耐药性
- p53基因与骨肉瘤治疗及其预后的相关性(英文)被引量：7
- 2004年
- 骨肉瘤的发生是多基因、多步骤、多阶段、多重损伤并存的过程,众多情况下认为是由于细胞核DNA分子受破坏,细胞不能修复受损的DNA分子,其继续存在并复制可激活癌基因和(或)抑癌基因异常,发展成为骨肉瘤。在细胞抑癌基因中p53基因研究最广泛,50%人类肿瘤与p53基因突变有关。动物试验证实:存在p53基因突变的转基因鼠中除了淋巴瘤和肺腺癌外,骨肉瘤的发生率最高。p53基因的突变和失活影响着骨肉瘤的发生、发展、预后。随着少数p53基因治疗进入临床实验阶段,目前p53的基因治疗研究也出现了一些新的策略。随着分子生物学手段的不断发展和完善,基因治疗的安全性和有效性的提高,p53基因治疗将在骨肉瘤的治疗中体现出不可估量的作用。
- 张立智蔡宣松
- 关键词：P53基因骨肉瘤预后抑癌基因
- 肿瘤血管形成与相关的酪氨酸激酶受体被引量：7
- 2003年
- 张立智梅炯蔡宣松
- 关键词：肿瘤血管形成酪氨酸激酶受体
- EPHA2-siRNA质粒对骨肉瘤细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2007年
- 目的探讨骨肉瘤细胞中EPHA2基因表达对细胞增殖、凋亡以及仿血管发生的影响。方法应用pSiliencer质粒构建靶向EPHA2的siRNA质粒;脂质体转染siRNA质粒人骨肉瘤细胞,Western blot在蛋白水平检测转染前后细胞基因表达情况;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞仪结合Annexin V-FITC和PI染色以及HE染色观察转染前后骨肉瘤细胞增殖、凋亡及仿血管发生情况。结果成功构建了针对EPHA2的siRNA表达质粒;将质粒转染入骨肉瘤后,EPHA2基因在蛋白表达水平下调;骨肉瘤细胞增殖能力下降,并发生了早期凋亡,骨肉瘤细胞的仿血管发生受到抑制。结论EPHA2参与了骨肉瘤细胞增殖、早期凋亡和仿血管发生;利用RNA干扰技术靶向EPHA2基因治疗可能为骨肉瘤治疗提供新方法。
- 张立智蔡宣松钱志康梅炯马小辉黄煌渊黄伟达
- 关键词：EPHA2RNA干扰凋亡骨肉瘤细胞
- VEGF特异siRNA对骨肉瘤细胞凋亡和仿血管发生的影响被引量：7
- 2007年
- 目的:探讨VEGF特异siRNA在骨肉瘤细胞株(MG63)增殖、凋亡以及仿血管发生中的作用。方法:以pSilienc-er载体构建VEGF特异siRNA质粒pSilencer-VEGF siRNA,并转染骨肉瘤细胞MG63;将细胞分为pSilencer-VEGF siRNA质粒组(试验组)和空siRNA质粒组(对照组),Western blotting在蛋白水平检测转染重组质粒后MG63细胞VEGF表达情况;MTT比色法、光镜、流式细胞仪结合Annexin V-FITC/PI染色和H-E染色观察质粒转染后骨肉瘤细胞增殖、凋亡和仿血管发生情况。结果:测序证实成功构建了针对VEGF的siRNA重组质粒。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒后的试验组培养液中及骨肉瘤细胞内VEGF蛋白表达下降;转染后48、72、96h骨肉瘤细胞的增殖抑制率分别为41.67%、43.92%、35.32%,并发生了早期凋亡,凋亡率为28.27%。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒的骨肉瘤细胞未见仿血管发生,转染空质粒的对照组骨肉瘤细胞则有仿血管发生。结论:RNA干扰VEGF基因能抑制骨肉瘤细胞增殖,促进骨肉瘤细胞早期凋亡,干扰骨肉瘤细胞仿血管发生,为临床基因治疗骨肉瘤提供了新的思路。
- 张立智蔡宣松钱志康梅炯黄煌渊黄伟达
- 关键词：小干扰RNA骨肉瘤细胞
- RNAi抑制骨肉瘤细胞KDR蛋白表达的研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究siRNA表达载体对骨肉瘤MG63细胞KDR蛋白表达的抑制作用。方法构建pSuper质粒,化学合成2段编码发卡RNA序列、靶向KDR基因的寡核苷酸,克隆进pSuper的pol IIIH I启动子的下游,重组构建抑制KDR表达的siRNA质粒,并转染入骨肉瘤MG63细胞,W estern b lot检测转染后KDR基因在蛋白水平表达的变化。结果酶切后电泳鉴定正确的重组质粒小量扩增后测序,证实成功构建了KDR siRNA表达质粒,转染入细胞后,有效抑制了KDR基因在蛋白水平的表达。结论成功构建的siRNA表达载体有效抑制了骨肉瘤MG63细胞KDR蛋白的表达,为进一步分析骨肉瘤中KDR基因的功能及肿瘤治疗奠定了研究基础。
- 张立智蔡宣松钱志康周家钤袁峰黄伟达
- 关键词：骨肉瘤RNAIKDRMG63
- pSilencer-VEGF-siRNA诱导骨肉瘤细胞系MG63凋亡并上调caspase-3表达
- 2009年
- 目的研究pSilencer—VEGF—siRNA转染骨肉瘤细胞系MG63后诱导其凋亡以及对caspase-3表达能力的影响。方法体外常规培养骨肉瘤细胞系MG63并构建人类特异性的pSilencer-VEGF-siRNA；分为pSilencer-VEGF—siRNA转染组和空载体组。转染后48—72h，流式细胞仪AnnexinV-FITC／PI染色检测细胞凋亡、分析细胞周期；Westernblot法测定caspase-3表达。结果MG63转染pSilencer—VEGF—siRNA表达质粒后，早期出现细胞凋亡及明显的G。期阻滞以及G1期细胞数增加；pSilencer．VEGF转染组caspase-3的表达较空载体组和对照组明显上调。结论pSilencer-VEGF-siRNA可诱导MG63细胞早期凋亡；并可上调caspase-3的表达。
- 高悠水张立智钱光童天朗胡牧梅炯蔡宣松
- 关键词：凋亡CASPASE-3
- 骨肉瘤细胞血管自成相关基因表达被引量：6
- 2006年
- 目的探讨骨肉瘤肿瘤细胞自身血管形成基因表达,为靶向骨肉瘤肿瘤血管治疗提供研究基础。方法利用RT-PCR技术对骨肉瘤肿瘤细胞(MG63、U2OS)血管形成相关基因进行检测,并同内皮细胞(ECV304)相比较。结果骨肉瘤肿瘤细胞和内皮细胞相类似,自身在mRNA水平均能表达VEGF和其受体KDR,受体Tie-2,以及EPHA2,Thrombin,VE-Cadherin等血管形成相关基因。结论骨肉瘤肿瘤细胞表达成血管细胞表型,具有类胚胎表型的逆转,这可能是骨肉瘤富含血供基础,在肿瘤的靶向治疗中,具有进一步的研究前景。
- 张立智梅炯蔡宣松
- 关键词：RT-PCR骨肉瘤细胞基因血管形成
- 骨肉瘤细胞的仿血管发生被引量：2
- 2008年
- 目的探讨骨肉瘤细胞的仿血管发生现象，骨肉瘤细胞是否具有血管形成相关基因的表达。方法应用Ⅰ型胶原蛋白凝胶和Matrigel的三维培养基对骨肉瘤细胞进行培养，并运用电镜、光镜观察这些类血管样结构的形态学构成；应用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测骨肉瘤细胞血管形成相关基因（VEGF、Flt-1、KDR、Ang-1、Tie-2、Ang-2、Tie-1、EPHA2、CD31、Thrombin、VE-Cadherin）的表达。结果电镜、光镜下观察到骨肉瘤细胞在I型胶原蛋白凝胶和Matrigel的三维培养基中能够形成良好的类血管样的管道结构；骨肉瘤细胞类内皮细胞和内皮前驱细胞，具有血管形成相关基因（VEGF、Flt-1、KDR、Ang-1、Tie-2、EPHA2、CD31、Thrombin、VE-Cadherin）的表达。结论骨肉瘤细胞具有仿血管发生的能力和血管形成相关基因的表达，三维培养是研究肿瘤细胞仿血管发生现象较好的工具。
- 张立智蔡宣松梅炯黄煌渊
- 关键词：骨肉瘤细胞培养基因表达
