宫本敬久
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：日本九州大学更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 检测产志贺毒素大肠杆菌的菌落PCR方法被引量：8
- 2010年
- 针对产志贺毒素大肠杆菌的毒力基因stx设计特异性引物,并建立一种菌落PCR方法。菌落PCR模拟实验证实,该方法特异性强,能良好的扩增出O157的stx1和stx2基因,而普通大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌则无PCR扩增产物。应用分子检测初筛、选择性培养、菌落PCR相结合的方法,检测实际食品样品,分离检测到一株携带stx1的产志贺毒素大肠杆菌。本实验建立的菌落PCR方法可应用于食品检验。
- 李睿许芳张忠美宫本敬久朱廷恒
- 关键词：产志贺毒素大肠杆菌食品检验菌落PCR
- 产志贺毒素突变株的毒力分析被引量：2
- 2010年
- 对2株食物中毒病人体内分离的产志贺毒素突变株EC130和EC169进行毒力分析。EC130和EC169携带stx基因但不能正常表达志贺毒素,具有eae基因和hly基因,仍具有一定毒力。初步探讨了产志贺毒素突变株不能正常表达志贺毒素的机理,高产志贺毒素的对照株携带Q933基因,而EC130和EC169不携带Q933基因。结果表明,单一采用志贺毒素作为检测靶标,容易造成产志贺毒素突变株漏检,今后在检测食品中产志贺毒素株时应增加检验eae基因和hly基因。
- 戴诗皎李睿刘志国宫本敬久
- 关键词：毒力食品检测
- 检测食品中大肠杆菌O157的多重荧光PCR方法的建立被引量：5
- 2010年
- 针对大肠杆菌O157的志贺毒素编码基因stx1、stx2和O157血清型的标志基因wzy的保守序列,设计特异性的引物和探针,反复优化反应体系和条件,建立了一种新的多重荧光PCR检验方法。结果显示,该方法灵敏度高,stx1、stx2的扩增效率分别为96.4%和94.6%,实际样品检测时stx1、stx2的最低检出限分别为4.2×102cfu/mL和4.2×103cfu/mL。该方法特异性强,扩增结果与各参考菌株基因型一致,能良好的区分出O157菌株和非O157型大肠杆菌。该方法能用于食品样品的检测和流行病学分离株的快速鉴定。
- 李睿刘晓红宫本敬久王芳熊燕
- 关键词：大肠杆菌O157食品检测
