公共文化服务平台

共 2 条记录，以下是 1-2

全选清除导出

排序方式：

La、hVAP-33、eIF2Bγ和HCV IRES特异性小干扰RNA抑制HCV的复制和表达: 2012年; 目的证实La自身抗原、33kD人类囊相关膜蛋白（hVAP-33）和真核细胞翻译起始因子第3亚单位（eIF2B7）是HCV在细胞内的协同感染因子，通过抑制Huh7细胞内这些因子的表达可抑制HCV复制和表达。方法分别设计合成3条HCV内部核糖体进入位点（IRES）的小干扰RNA（siRNAs），转染HuhT-HCV细胞后筛选出其中沉默效率最高的1条。以HCV假病毒感染Huh7细胞后48h，分别以上述HCVIRKSsiRNA和之前试验中已经筛选出的La、hVAP-33和eIF2BY特异性siRNAs单独或者不同组合转染Huh7-HCV细胞，利用荧光定量PCR方法检测HCV核心基因并计算△ACT值（相对定量法），比较不同siRNAs及组合对目的基因沉默的效率; 同时以Westemblot观察HCV核心蛋白表达量的差异。结果La自身抗原与IRKS特异性siRNA共转染对HCV表达的抑制效率最高，使HCV核心蛋白基因相对表达量下降了约41％；4种基因特异性siRNAs对HCV在Huh7细胞中的复制和表达均有不同程度的抑制作用，La、hVAP-33和eIF2B7特异性siRNAs分别与IRES siRNA联合均较其单独转染对目的基因的抑制效率高。结论可以认为La自身抗原、hVAP-33和eIF2BY是HCV在宿主细胞内的协同感染因子，通过对Huh7细胞内协同感染因子及HCVIRES基因沉默后可以显著减少HCV的表达。; 王美霞徐斌段瑾傅晓晴金铭; 关键词：内部核糖体进入位点

HCV协同感染因子La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白和真核细胞翻译起始因子第三亚单位特异性siRNAs的筛选: 2012年; 目的筛选Huh7细胞内La自身抗原、33kDa人类囊相关膜蛋白(hVAP-33)和真核细胞翻译起始因子第三亚单位(eIF2Bgamma)的特异性siRNAs。方法根据Genebank中的序列设计3种基因的特异性引物,在Huh7细胞中通过荧光定量PCR方法检测上述3种分子;根据siRNA设计原则针对每种基因设计合成3条siRNAs;分别将不同序列siRNA转染Huh7细胞,利用荧光定量PCR方法并计算ΔΔCT值筛选出针对每种基因抑制效率最高的一条siRNA。结果荧光定量PCR方法检测到了上述3种分子的存在;每种基因的3条不同siRNA对相应基因具有不同程度的沉默作用,通过ΔΔCT值的计算找出其中效率最高的一条。结论 Huh7细胞内可以检测到La自身抗原、hVAP-33和eIF2Bgamma基因,其特异性siRNAs可以沉默相应基因表达。; 王美霞金铭段瑾傅晓晴徐斌

全选清除导出

共1页<1>

傅晓晴

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

傅晓晴

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈