贺星
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
- 供职机构：深圳市第三人民医院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- γ干扰素释放试验结合生化指标在诊断结核性胸腔积液中的作用被引量：5
- 2019年
- 目的探讨胸腔积液γ-干扰素释放试验(Interferon-γrelease assays,IGRAs)结合其他生化指标在结核性胸腔积液诊断中的作用,为结核性胸腔积液诊断提供新的方法。方法收集2010年1月-2016年12月份在深圳市第三人民医院住院的201例患者的胸腔积液,并分为结核性胸腔积液(Tuberculous pleural effusion,TPE)和恶性胸腔积液(Malignant pleural effusion,MPE)。检测胸腔积液腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase,ADA)、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)水平,并分离出胸腔积液单个核细胞(Pleural fluid mononuclear cells, PFMCs)进行IGRAs。采用Graphpad软件作图并绘制ROC曲线分析,采用SPSS 17.0软件进行数据的统计分析。结果结核分枝杆菌特异性重组蛋白抗原ESAT-6刺激PFMCs后,TPE和MPE患者特异性斑点形成细胞数(Spots-forming cells,SFCs)分别为276.1±12.08和65.26±11.65,两组差异有统计学意义(P<0.01),ROC分析显示其相应的曲线下面积(Area under curve,AUC)为0.89;ADA和CEA可有效地用于区分TPE和MPE患者,ADA在TPE患者中的含量较高(65.56±1.99) U/L,其AUC为0.95,CEA在MPE患者中的含量较高(94.6±8.86)U/L,其AUC为0.97;当IGRA未联合ADA或CEA时,其灵敏度和特异度分别为96.38%和29.31%或99.22%和30.19%,当IGRA联合ADA或CEA时可以提高TPE诊断效能,其灵敏度和特异度分别为81.88%和98.28%或86.72%和100.00%。结论胸腔积液γ-干扰素释放试验联合ADA或CEA可以提高TPE患者诊断效能。
- 刘亚亚张苏张娟娟唐怡敏贺星欧敏张国良陆坚
- 关键词：腺苷脱氨酶癌胚抗原Γ-干扰素释放试验结核性胸腔积液
- miR-20a-5p调控结核分枝杆菌诱导巨噬细胞凋亡相关基因表达的研究被引量：2
- 2019年
- 目的明确小非编码RNA(microRNA,miR-20a-5p)对结核分枝杆菌(MTB)诱导人巨噬细胞凋亡相关基因表达的调控作用。方法构建可表达或抑制miR-20a-5p、转染miR-20a-5p抑制剂(miR-20a-5p-inhibitor,简称“miR-20a-5p-inh”)、作为慢病毒载体的阴性对照(LV1-NC)的慢病毒载体,由oligo-dT引物通过固相亚磷酰胺法合成茎环寡核苷酸,并克隆到含绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体pGLV3-GFP内,将构建的miR-20a-5p、miR-20a-5p-inh、LV1-NC转染THP-1人巨噬细胞3h,培养72h后用流式细胞仪分选出GFP+THP-1细胞,并分别采用减毒MTB菌株(H37Ra)感染8h和过氧化氢(H2O2)处理30min 两种方法诱导。通过实时定量PCR技术测定细胞中线粒体相关抗凋亡基因Bcl-2,以及促凋亡基因Bax、Bim和Bad的转录水平。同时,用蛋白免疫印迹法检测细胞裂解物中相关蛋白的表达。结果慢病毒转染细胞后,在无刺激的THP-1细胞中miR-20a-5p的相对荧光强度值为12.21±1.29、miR-20a-5p-inh为9.68±1.38、LV1-NC为10.64±0.96,三者的表达差异均无统计学意义(q=1.815,P=0.385;q=2.072,P=0.602);但在H37Ra和H2O2的刺激后,miR-20a-5p过表达时其相对荧光强度值分别为7.20±0.53、8.55±0.82,明显高于LV1-NC (4.46±0.07、5.49±0.44)(q=50.250,P=0.007;q=1.041,P<0.01),miR-20a-5p受抑制时(1.88±0.08、1.44±0.21)明显低于LV1-NC(q=3.457,P=0.031;q=4.384,P=0.001)。在感染miR-20a-5p慢病毒的THP-1细胞中,H37Ra诱导Bcl-2的表达增加(相对荧光强度值由10.67±0.89增至14.98±0.88)(q=1.064,P=0.008),而感染miR-20a-5p-inh慢病毒时Bcl-2表达减少(由10.67±0.89降至6.49±0.47)(q=3.518,P=0.003);在miR-20a-5p过表达的THP-1细胞中Bim的转录水平减少(由1.22±0.05降至0.98±0.04)(q=1.240,P=0.011),当miR-20a-5p受抑制时Bim的转录水平增加(由1.22±0.05增至1.51±0.08)(q=2.460,P=0.021)。蛋白印迹法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bim的蛋白表达水平,结果与基因转录水平相符。结论 miR-20a-5p的表达水平影响MTB诱导的
- 丁光贵贺星梁娟刘亚亚欧敏陆坚张国良
- 关键词：基因,BCL-2
- 转化生长因子β1基因rs2317130单核苷酸多态性与结核病易感性的关联分析
- 2021年
- 目的探究转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与结核病易感性的关系,为结核病的诊断和治疗提供更多的参考依据。方法通过病例-对照(case-control)研究方法,以深圳市第三人民医院1533例确诊的活动性结核病患者作为病例组(男980例,女553例),选取同期在该院体检的1445例人员作为健康对照组。通过飞行时间质谱仪(TOF-MS)检测TGF-β1基因6个SNP位点rs2317130、rs17516265、rs8110090、rs3087453、rs2278422、rs1800469基因型,通过比较两组间SNP等位基因频率差异,初步筛选出与结核病易感性相关联的SNP位点。用结核分枝杆菌标准株H37Rv刺激不同基因型的健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),ELISA检测上清中TGF-β1含量,进一步验证TGF-β1基因SNP位点与结核易感性的关系。结果在6个SNP位点中发现仅rs2317130 C>T位点等位基因频率在活动性结核组和对照组中差异有统计学(P<0.05),结核病患者rs2317130 C>T位点C等位基因频率显著增高(OR=1.14;95%CI=1.03~1.26;P<0.01),其他5个SNP等位基因频率在两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。此外,ELISA实验结果表明,rs2317130 SNP位点CC纯合子基因型的患者TGF-β1表达量显著高于其他基因型(CT杂合子和TT纯合子基因型),TGF-β1表达量上调可加速结核病发展,进一步证实rs2317130位点C等位基因为结核易感基因。结论TGF-β1基因rs2317130 C>T位点与结核易感性相关,其C等位基因为结核易感基因,即携带C等位基因人群患结核风险升高。
- 周雪峰张苏李芳刘淑燕贺星吴季霖李涛张国良
- 关键词：结核病转化生长因子Β1单核苷酸多态性结核易感性
- 巨噬细胞通过下调miR-20a诱发凋亡促进结核菌清除的机制被引量：2
- 2018年
- 目的探讨上调或下调巨噬细胞中miR-20a对结核菌诱导的细胞凋亡以及细菌清除的影响,鉴定结核免疫干扰新靶点。方法构建表达miR-20a-5p、miR-20a-5p-inh且含绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体,用无血清转染试剂稀释,在5μg/mL聚凝胺存在下以感染复数(MOI)为10转染人单核细胞株THP-1细胞3 h,72 h后通过流式细胞仪筛选出GFP+细胞,佛波脂(PMA)刺激24 h后分化为巨噬细胞;结核分枝杆菌灭活菌(H37Ra)或过氧化氢(H_2O_2)处理细胞后,进行荧光素PE标记的膜联蛋白(Annexin)V和7-氨基放线菌素D(7AAD)染色15 min,流式细胞术检测Annexin V(+)和Annexin V(+)7AAD(+)细胞早晚期凋亡情况,方差分析(ANOVA)和多重比较试验(Newman-Keuls)分析细胞间凋亡率的差异;H37Ra以MOI为10感染巨噬细胞30 min,磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次后放入CO_2培养箱,3 d后收集裂解物并接种到含10%OADC增菌液的7H11琼脂平板上,37℃培养箱培养3~4周后使用标准程序重复三次计算细菌菌落数。结果成功构建miR-20a-5p、miR-20a-5p-inh慢病毒载体以及稳定促进或抑制miR-20a表达的细胞株;流式细胞术检测显示:在未刺激情况下细胞早、晚期凋亡的差异不明显,H37Ra或H_2O_2刺激后,细胞早、晚期凋亡率发生明显变化,以晚期凋亡率显著增加为主;方差分析和多重比较试验提示:在未刺激情况下过表达或抑制miR-20a,细胞凋亡率无显著差异,H37Ra或H_2O_2刺激后在miR-20a过表达时细胞凋亡率无明显变化,抑制miR-20a的表达细胞凋亡率显著增加;H37Ra感染巨噬细胞后收集细胞裂解物并接种到平板中培养,miR-20a过表达的细胞内结核菌存活率较高,抑制miR-20a表达结核菌的存活率下降。结论结核菌感染巨噬细胞后,宿主通过下调miR-20a诱发细胞凋亡进而清除结核菌。
- 张娟娟贺星梁娟唐怡敏唐怡敏叶涛生叶涛生张国良
- 关键词：微小RNA结核分枝杆菌
- 临床护理路径在HIV感染患者围术期健康教育中的应用效果
- 2015年
- 目的探讨临床护理路径(CNP)在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者围术期健康教育中的应用效果。方法将130例HIV感染需接受手术治疗患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组65例。对照组应用传统方法进行健康教育,观察组应用CNP进行健康教育。比较2组干预前后的健康教育效果、治疗依从性及护理人员工作满意度。结果干预后观察组治疗依从性较佳率、健康教育总优良率及护理人员工作满意度均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用CNP对HIV感染患者围术期健康教育有较高的临床价值。
- 李藕温国欢曹秀芬高重阳韩述毛婷贺星
- 关键词：临床护理路径人类免疫缺陷病毒感染健康教育
- 基于Cas12a/gRNA的快速鉴定分枝杆菌的方法
- 本发明公开了一种基于Cas12a/gRNA的快速鉴定分枝杆菌的方法，包括以下步骤：S1:进行菌种的培养；S2:gRNA探针的设计与制备；S3:DNA制备与PCR扩增；S4：采用FnCas12a/gRNA进行切割，进行荧光...
- 张国良肖国辉刘磊张苏欧敏贺星
- 文献传递
- 利用Cas12a蛋白筛选双等位基因突变细胞株的方法
- 本发明涉及一种利用Cas12a蛋白筛选双等位基因突变细胞株的方法，主要用于筛选基于CRISPR/Cas9编辑后的双等位基因突变细胞株;解决双等位基因突变细胞株难以筛选出的技术难题。本发明基于Cas12a蛋白（包括所有细菌...
- 张国良肖国辉刘淑燕贺星张苏欧敏
- 文献传递
- 白细胞介素1β基因rs1143627位点单核苷酸多态性与活动性结核病易感性的关系被引量：4
- 2020年
- 目的探讨IL-1β基因单核苷酸多态性(SNP)与活动性结核病易感性的关系。方法采用病例对照研究方法,入选2012年1月至2014年12月深圳市第三人民医院确诊的1533例活动性结核病患者,其中1432例肺结核,男920例,女512例,平均年龄(37±14)岁;101例肺外结核,男60例,女41例,平均年龄(35±13)岁。同期选取1445例在该院体检者为健康对照,其中男882例,女563例,平均年龄(37±20)岁。运用飞行时间质谱技术检测两组的IL-1β基因rs1143627、rs1143623、rs16944及rs2853550基因型,比较两组人群SNP等位基因频率差异。进一步分层比较肺结核与肺外结核病患者rs1143627 T>C(-31)位点等位基因频率差异。随机选取53例活动性结核病患者,其中男32例,女21例,平均年龄(37±15)岁,进行抗结核治疗前后的高分辨率CT检查及评分,分析各SNP等位基因与结核病严重程度的相关性。结果飞行时间质谱技术能有效检测4个SNP位点基因型。在4个SNP位点中,仅-31位点等位基因频率在活动性结核组和对照组中存在显著差异,活动性结核组rs1143627位点T等位基因频率为53.3%(1634/3066),显著高于健康对照组的48.7%(1407/2890),差异有统计学意义(OR=1.20;95%CI为1.09~1.33;P=0.0016)。其他3个SNP等位基因频率在活动性结核组和对照组间差异均无统计学意义,rs1143623 G等位基因频率为59%(1821/3066)和60%(1732/2890),rs16944 G等位基因频率为51%(1574/3066)和52%(1499/2890),rs2853550 T等位基因频率为64%(1964/3066)和65%(1875/2890)。分层分析结果显示,肺外结核病患者-31位点T等位基因的频率(62.9%,127/202)显著高于肺结核病患者(52.6%,1507/2864),差异有统计学意义(OR=1.53;95%CI为1.13~2.05;P=0.005)。高分辨率CT评分结果显示抗结核治疗前携带rs1143627 TT、TC、CC基因型患者的高分辨率CT评分分别为26.6、13.9和13.3分,抗结核治疗2年后,携带rs1143627 TT、TC、CC基因型患者的高分辨率CT评分为14.7、6.6和5.4分,表
- 李国保欧敏王召钦李桂霞贺星刘智邓永聪罗蓝张国良
- 关键词：白细胞介素1Β结核疾病易感性
