谢金峰
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 法氏囊活性肽前体蛋白CBL N端片段的克隆及抗原表位分析被引量：2
- 2017年
- Casitas B-lineage lymphoma(CBL)是一种广泛存在于法氏囊组织的细胞内蛋白。为探究禽源CBL基因结构及特征,本研究以Gen Bank公布的CBL基因序列为参考,设计合成引物,扩增CBL基因N端片段420 bp。同源性分析发现,CBL-N基因未发生明显变异,且CBL蛋白具有高度的保守性。Protean软件分析发现,CBL-N蛋白的二级结构比较复杂,含有较多的α和β结构,而且含有一定比例的无规则卷曲及β转角结构,多个区段有较高比例的抗原指数、表面可及性和亲水性,并推测CBL-N中119-136区域氨基酸序列可能是B细胞优势表位。本研究为探讨CBL蛋白功能奠定了基础。
- 宗嫚嫚梁静泊谢金峰周川杰周广防冯秀丽陈溥言杨梅
- 关键词：CBL同源性分析B细胞抗原表位
- 鸡大肠杆菌FimH基因C端结构域克隆及特性分析
- 2016年
- [目的]通过进一步研究禽大肠杆菌I型菌毛主要结构基因FimH的基因结构及其抗原特性,为深入探索鸡大肠杆菌致病机理及研制基因工程疫苗奠定必要的理论基础。[方法]本文以已发表的Fim H基因C端核酸序列为参考序列,设计并合成引物,扩增鸡大肠杆菌JS1、JS2、JS6三个菌株的Fim H相应基因,使用Lasergene软件对其进行序列比对、蛋白质结构预测以及进化树的绘制等。[结果]JS1、JS2、JS6三个菌株的核酸同源性分别为97.3%、97.7%和97.3%,而氨基酸序列的相似性分别为95.3%、97.6%和95.3%。此外,其抗原决定簇基本相似,但在第78和79位抗原决定簇不同,这说明本研究中的3个鸡大肠杆菌菌株的Fim H基因序列及氨基酸序列的变异可能对Fim H蛋白抗原结构产生了轻微影响。进化树分析发现,本实验室分离的3株鸡大肠杆菌菌株FimH基因与选择的国内鸡大肠杆菌菌株的Fim H基因同源性比较高,同处于一个进化分支中。[结论]本研究结果表明鸡大肠杆菌I型菌毛Fim H基因未发生明显变异,这为后续研究Fim H基因的功能及其基因工程亚单位疫苗研发提供了重要的实验基础。
- 白宇琛谢金峰周广防冯秀丽
- 关键词：鸡大肠杆菌FIMH基因克隆特性分析
- CBL蛋白的真核表达及其对日本脑炎病毒的抑制作用被引量：1
- 2018年
- CBL蛋白是一种E3泛素连接酶,在调控信号传导等方面发挥重要作用。采用PCR扩增CBL基因片段并连接到pEGFP-C1载体中,经Bam HⅠ、HindⅢ双酶切鉴定及基因测序,成功构建真核表达重组载体pEGFP-CBL。倒置荧光显微镜观察和Western blot结果证实,重组载体pEGFP-CBL在BHK-21细胞中成功表达。病毒增殖试验结果证实,日本脑炎病毒（JEV）强毒株感染转染pEGFP-CBL重组载体的BHK-21细胞,3 d内未见明显细胞病变。结果表明,真核表达载体pEGFP-CBL成功构建,且重组表达的CBL蛋白能够抑制早期JEV增殖,从而为深入研究CBL蛋白的免疫调节功能奠定了基础。
- 梁静泊高帅申坤李本睿宗嫚嫚郑阳余远楠谢金峰冯秀丽
- 关键词：CBL真核表达抗病毒作用
