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文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇农业科学
  • 1篇理学

主题

  • 2篇番茄
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇圆二色
  • 1篇圆二色谱
  • 1篇色谱
  • 1篇探针
  • 1篇抗体
  • 1篇果实
  • 1篇分子
  • 1篇分子探针
  • 1篇CA2+
  • 1篇CA^(2+...
  • 1篇META
  • 1篇METACA...

机构

  • 2篇中国农业大学

作者

  • 2篇曲桂芹
  • 2篇温帅
  • 1篇罗云波
  • 1篇马秋敏
  • 1篇吴坤胜
  • 1篇曹景顺
  • 1篇王志超

传媒

  • 1篇北方园艺
  • 1篇光谱学与光谱...

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2015
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
番茄Ⅱ型metacaspase蛋白SlMC7抗体效价检测及其在果实中表达特性分析被引量:1
2017年
以原核表达的番茄SlMC7重组蛋白为抗原,制备SlMC7多克隆抗体,采用ELISA和蛋白质点杂的方法,研究了番茄II型metacaspase蛋白(SlMC7)的抗体效价和表达特性,并对SlMC7蛋白及基因在番茄果实发育过程中的表达差异进行了研究,以期为后续的SlMC7在番茄果实中功能性研究提供材料基础和参考依据。结果表明:SlMC7多克隆抗体效价在256 000以上,在1∶10 000的稀释度下,可识别低至1.6ng的纯蛋白。对各时期番茄果实Western-blot和Real time PCR结果表明,相对于绿熟期,SlMC7蛋白及基因在破色期果实中表达量显著上升,表明SlMC7与番茄果实成熟存在一定相关性。
王志超马秋敏叶彦雄温帅曹景顺曲桂芹
关键词:抗体蛋白表达番茄
光谱及分子探针方法研究番茄Metacaspase蛋白与Ca^(2+)的相互作用被引量:1
2015年
Metacaspases(MCPs)是发现于植物、真菌、原生动物体内的一种结构上类似多细胞动物Caspase的半胱氨酸蛋白酶家族,其大多数成员的激活依赖于钙离子,但钙离子如何影响MCPs的激活机制有待深入研究。借助圆二色谱技术、Terbium/Stains-all探针技术以及荧光光谱技术,以番茄Ⅱ型Metacaspase(LeMCA1)重要位点突变的三种体外原核表达重组蛋白,包括LeMCA1C139A(活性催化位点突变体)、LeMCA1K223G(自降解位点突变体)以及预测的Ca2+结合位点突变体LeMCA1D116A/D117A为研究材料,探究了MCPs与Ca2+相互作用机制。实验结果表明,Ca2+与LeMCA1之间既不存在强烈的结合作用,也不影响蛋白的二级结构,但Ca2+通过相互作用改变LeMCA1的三级结构来实现对LeMCA1的酶原激活过程。其中,LeMCA1蛋白的Asp-116,Asp-117氨基酸残基作为预测的与Ca2+作用的重要位点,其缺失将导致蛋白与Ca2+相互作用能力下降。利用圆二色谱、荧光光谱结合离子探针技术研究了典型茄科植物番茄中Ca2+与LeMCA1的相互作用特性,结合之前同源序列比对、位点突变结果确定了LeMCA1中的Asp-116,Asp-117氨基酸残基影响着Ca2+与蛋白质的相互作用。该结果对后续LeMCA1的生化特性及晶体结构的解析研究有着重要的参考价值。
温帅马营轩吴坤胜崔金田罗云波曲桂芹
关键词:CA2+圆二色谱
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