徐倩
- 作品数:2 被引量:15H指数:1
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- 发文基金:浙江省中医药科技计划项目浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
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- 槲皮素诱导HeLa细胞凋亡及caspase-3、caspase-8活化对凋亡影响的研究被引量:14
- 2011年
- 目的研究槲皮素(quercetin)诱导HeLa细胞(人宫颈癌细胞)凋亡的作用,以及caspase-3、caspase-8活化对凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察槲皮素对HeLa细胞(人宫颈癌细胞)和L-02细胞(正常人肝细胞)的生长抑制作用;DA-PI染色后荧光显微镜观察细胞的形态学变化;通过DNA琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析,FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;比色法测定槲皮素诱导HeLa细胞凋亡过程中caspase-3、caspase-8活性变化。结果 MTT结果显示,槲皮素可选择性抑制HeLa细胞的生长,并呈剂量、时间依赖性,而正常人肝细胞L-02不出现生长抑制(P>0.05)。160.0μmol.L-1槲皮素处理HeLa细胞72 h,DAPI染色也可见核浓缩及边缘现象,DNA电泳出现特征性的凋亡条带。160.0μmol.L-1槲皮素处理HeLa细胞24、48和72 h的凋亡率分别为(9.4±2.1)%、(30.1±6.5)%和(59.8±9.5)%,caspase-3活性在48 h达最高(1.68±0.07)U.μg-1,而caspase-8活性则在24 h达最高(1.83±0.06)U.μg-1,两者与对照组相比均具有显著性差异(P<0.05)。结论槲皮素可特异性地诱导人HeLa细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能与caspase-3、caspase-8活化有关。
- 顾超徐水凌唐文稳朱逢佳徐倩高帆
- 关键词:槲皮素HELA细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- Toll样受体2/4-核因子κB信号通路在人结核分枝杆菌侵入小鼠树突细胞2.4中的作用被引量:1
- 2014年
- 目的:研究人结核分枝杆菌侵入抗原提呈细胞后诱导树突细胞( DC )成熟的机制。方法:选择小鼠DC2.4细胞株为抗原提呈细胞的效应细胞,建立人结核分枝杆菌H37 Rv株的细胞混合培养模型。在不同混合培养时段,采用实时荧光定量PCR检测DC2.4细胞Toll样受体2(TLR2)、TLR4 mRNA的表达量;蛋白质印迹法检测DC的核因子κB ( NF-κB ) p65蛋白的表达;免疫酶联吸附试验定量检测DC产生α肿瘤坏死因子( TNF-α)的水平;采用间接免疫荧光法和流式细胞术检测DC2.4表面CD80和CD86的表达情况。结果:H37 Rv与DC2.4共培养2 h后开始有细菌侵入;共培养6、8、10、12 h后,细菌侵入率分别为(37.9±5.6)%、(51.2±7.6)%、(57.2±8.9)%、(63.9±12.4)%;TLR2、TLR4 mRNA也开始增量,共培养10 h时达高峰,之后开始下降;共培养6 h时,NF-κB p65的表达量明显增高;TNF-α的表达量在共培养6 h开始上调,8 h时达高峰,随后逐渐下降;共培养6 h时,DC2.4表面CD80、CD86表达量明显增高。结论:人结核分枝杆菌侵入DC2.4时,通过激活TLR2/4-NF-κB 信号通路,诱导 DC 成熟,提高其抗原提呈能力。
- 徐倩金梦媚郑文文朱丽徐水凌
- 关键词:TOLL样受体树突细胞核因子-ΚB小鼠