刘静静
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：鸡西矿务局总医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核因子κB在低氧诱导因子1α基因修饰神经干细胞上调血管内皮生长因子表达中的桥接作用被引量：3
- 2009年
- 背景:很多研究发现,在脑缺氧损伤区域核因子κB与血管内皮生长因子表达呈正相关。因此,作者大胆假设,核因子κB是否处于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子作用通路上并起桥接作用。目的:以低氧诱导因子1α修饰的神经干细胞为载体,观察核因子κB在低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达通路中的作用。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/12在佳木斯大学神经科学研究所完成。材料:新生24h内的Wistar大鼠,雌雄不拘。方法:扩增腺病毒载体低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后转染神经干细胞,荧光检测神经干细胞中低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白及空载体Ad-绿色荧光蛋白表达,分别提取基因转染后神经干细胞、空载体转染神经干细胞、正常神经干细胞蛋白。然后低氧诱导因子1α基因修饰的神经干细胞中按50,150,300μmol/L浓度梯度加入核因子κB特异性抑制剂二硫氨基甲酸酞吡咯烷,WesternBlot法检测其中血管内皮生长因子的表达变化。主要观察指标:各组神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB的表达;给予梯浓度核因子κB特异性抑制剂后神经干细胞中血管内皮生长因子的表达。结果:腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白转染神经干细胞后基因表达强弱与MOI及转染时间有关;转染低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白后的神经干细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和核因子κB的表达呈正相关;给予梯浓度核因子κB特异性抑制剂后腺病毒低氧诱导因子1α-绿色荧光蛋白修饰的神经干细胞中血管内皮生长因子的表达呈抑制剂浓度依赖性下调,各浓度组之间血管内皮生长因子表达差异有显著性意义(P<0.05～0.01)。结论:核因子κB位于低氧诱导因子1α上调血管内皮生长因子表达的信号通路上并起桥接作用。
- 金玉玲刘静静朱晓峰
- 关键词：神经干细胞低氧诱导因子1Α基因转染血管内皮生长因子核因子ΚB
- 小胶质细胞对体外培养神经干细胞向胆碱能神经元分化的影响被引量：3
- 2010年
- 背景:神经干细胞的定向分化与小胶质细胞的浓度有关,浓度倍数过小可能达不到应有效应,太大则会产生细胞毒性。目的:观察不同比例的小胶质细胞对体外培养的神经干细胞向胆碱能神经元方向分化的影响。方法:取新生24,48h内Wistar大鼠用于神经干细胞与小胶质细胞的原代培养,免疫组化进行鉴定。神经干细胞与小胶质细胞共同接种于6孔板,接种密度分别为10:1,4:1,1:1,1:4,1:10,每种密度设6孔,以单纯神经干细胞作为对照,共培养3,7,14d,观察细胞的生长情况。结果与结论:原代培养的神经干细胞聚集成球状,悬浮生长,Nestin染色阳性,胞核不着色。小胶质细胞贴壁生长,折光性强,大部分细胞有短的突起呈分支状,小胶质细胞特异性标记抗体CD11b/c染色结果显示细胞纯度在80%以上。与单纯神经干细胞对照组相比,神经干细胞与小胶质细胞以10:1,4:1,1:1,1:4,1:10接种密度共培养组ChAT阳性细胞数均明显升高。共培养组神经干细胞与小胶质细胞比例为4:1时升高幅度显著高于其他接种密度(P<0.05),且在培养第7天时生长达到高峰。结果提示小胶质细胞可以促进神经干细胞向胆碱能神经元方向分化,神经干细胞与小胶质细胞4:1比例共培养第7天时效果最佳。
- 金玉玲刘锲刘静静李欣王丽华
- 关键词：小胶质细胞神经干细胞共培养胆碱能神经元干细胞
