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基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析被引量：12: 2016年; 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红花大金元中克隆了NtDXR基因,并通过荧光定量PCR技术分析了NtDXR在红花大金元不同发育时期、不同组织中的表达模式。同时利用CRISPR/Cas9技术构建了NtDXR敲除载体,获得了DXR基因突变的植株。结果表明:NtDXR基因在花中的表达量最高,在雌蕊和叶中次之;利用CRISPR/Cas9系统定点敲除NtDXR基因后,检测目的基因靶位点序列发现有碱基的插入、缺失与置换,并且部分T_0代转基因阳性植株呈现白化表型,暗示NtDXR基因在烟草叶绿素等色素合成过程中起重要作用,推测NtDXR基因的突变能阻断烟草质体色素的合成。; 聂梦云高军平罗培陈晓乐易小慧王根洪夏庆友; 关键词：烟草荧光定量PCR 基因敲除

基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析: 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红...; 聂梦云高军平罗培陈晓乐易小慧王根洪夏庆友; 关键词：烟草荧光定量PCR 基因敲除

基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析: 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红...; 聂梦云高军平罗培陈晓乐易小慧王根洪夏庆友; 关键词：烟草荧光定量PCR 基因敲除

烟草萜类代谢途径相关基因的克隆及功能分析: 烟叶香气是衡量烟草质量和可用性的重要指标之一，其香味含量不足严重影响着烟草的品质，随着烟草工业的发展，提高烟草香气品质已成为急需解决的问题。萜类化合物是烟草主要香气物质的前体。1-脱氧木酮糖合酶（DXS）、1-脱氧木酮糖...; 聂梦云; 关键词：烟草香气物质萜类化合物代谢途径

基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析: 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红...; 聂梦云高军平罗培陈晓乐易小慧王根洪夏庆友; 关键词：烟草荧光定量PCR 基因敲除; 文献传递

烟草周期蛋白依赖性激酶基因NtCDK8的克隆及生物信息学分析被引量：1: 2014年; 为明确周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent protein kinases,CDKs)在烟草中的生物学功能,通过同源性搜索的方法获得了烟草周期蛋白依赖性激酶基因的EST序列。采用RT-PCR技术,从烟草栽培品种红花大金元中成功克隆出了周期蛋白依赖性激酶基因,并命名为NtCDK8。NtCDK8基因cDNA编码区全长为1422 bp,编码473个氨基酸。氨基酸序列同源性比对分析表明:NtCDK8蛋白与番茄、马铃薯、拟南芥周期蛋白依赖性激酶的相似性分别达到93.02%,94.08%和75.32%。蛋白结构预测分析显示NtCDK8具有丝氨酸/苏氨酸(Serine/Threonine)蛋白激酶结构域,可能通过促使下游蛋白中的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化,进而促使细胞外信号向细胞内传递;通过疏水性、信号肽及亚细胞定位预测综合分析表明,NtCDK8蛋白可能是一个在细胞核中发挥功能的亲水性蛋白。; 吴向伟王根洪聂梦云熊海军高军平谢小东夏庆友; 关键词：烟草周期蛋白依赖性激酶基因克隆生物信息学

栽培烟草抗逆相关WRKY转录因子的表达特征分析被引量：4: 2014年; 采用RT-PCR反应从栽培烟草中克隆获得三条全长WRKY家族保守序列,长度分别为677bp、672bp、629bp,定名为Nt WRKY10、Nt WRKY11、Nt WRKY12。生物信息分析表明三个基因与已经报道的拟南芥WRKY家族基因具有较高同源性,保守结构域属于第二类WRKY转录因子。RT-PCR分析表明,SA、ABA、Me JA等信号分子均能诱导这三个基因的上调或下调表达,表明这三个基因可能在栽培烟草抗逆反应中起作用。; 熊海军张兴坦吴向伟谢小东聂梦云王根洪夏庆友; 关键词：烟草 WRKY转录因子克隆信号分子

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聂梦云