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王鹏鲲
作品数:
1
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供职机构:
广州医学院第一临床学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
范婷婷
广州医学院第一临床学院
杜晶春
广州医学院第一临床学院
朱蕊
广州医学院第一附属医院
徐霞
广州医学院第一临床学院
林勇平
广州医学院第一临床学院
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2013
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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞
2013年
背景:以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的:利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞,以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法:首先利用多位点Gateway技术构建慢病毒表达载体pLVpuro/EF1α-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,将该表达载体与慢病毒包装质粒同时转染293FT细胞,从而获得携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒颗粒。利用重组慢病毒颗粒感染人羊水间充质干细胞,并通过抗生素筛选的方法获得稳定表达目的基因-肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的羊水间充质干细胞,并对其稳定性进行鉴定。结果与结论:酶联免疫吸附法和Westernblot检测结果表明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白在感染的人羊水间充质干细胞内呈高表达,其表达量可达到72μg/L。说明实验成功制备了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞。
杜晶春
朱蕊
范婷婷
王鹏鲲
林勇平
徐霞
关键词:
干细胞
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
基因修饰
慢病毒载体
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