吕芳芳 作品数:4 被引量:8 H指数:2 供职机构: 天津农学院农学系 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 天津市科技支撑计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
高梁SbAGL6基因的克隆及其功能分析载体的构建 AGL6(AGAMOUS-LIKE 6)蛋白属于植物MADS盒转录因子基因家族成员,参与植物的开花期调控和花器官的建成。目前,已从不同种类的植物中克隆出AGL6及其同源基因,但对其作用的机制仍知之甚少。本研究以高梁品种罗... 吕芳芳 丁博 谢晓东 孙守钧关键词:克隆 过表达高粱SbAGL6基因对拟南芥花期转换的影响 被引量:2 2014年 以甜高粱品种Roma为试验材料,在生物信息学分析基础上,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,克隆了SbAGL6基因的编码区序列。序列分析表明,SbAGL6基因编码具有256个氨基酸的转录因子,在其N端含有MADS-box结构域,中间存在K-box结构域,与拟南芥AtAGL6等直系同源基因在核苷酸和氨基酸序列上都有较高的相似性。为验证其生物学功能,采用Gateway的方法,构建了SbAGL6基因的可诱导过表达载体。利用农杆菌介导侵染拟南芥的方法,获得了SbAGL6基因的转基因拟南芥植株,并对其进行了功能鉴定。结果表明,未施加诱导物地塞米松Dex时,转基因拟南芥与野生型生长一致,而施加DEX后,转基因植株比野生型提早开花,SbAGL6基因在调控植物花期转换中发挥了作用。 傅扬 丁博 罗峰 吕芳芳 谢晓东 孙守钧关键词:高粱 拟南芥 小麦TaWRKY46-1基因克隆及建立在Gateway技术上的可诱导表达载体的构建 被引量:2 2011年 以小麦品种扬麦158为材料,根据NCBI中小麦TaWRKY46基因序列设计引物,采用RT-PCR技术从小麦总RNA中分离了大小为870 bp的cDNA片段。测序表明,该片段与NCBI中已克隆的小麦TaWRKY46基因高度同源,包含完整的读码框,值得注意的是此蛋白保守氨基酸序列WRKYGQK突变为WRKYGEK,为TaWRKY46的新等位基因,命名为TaWRKY46-1。采用Gateway克隆技术构建了该基因的可诱导型超量表达载体,并转化农杆菌,为接下来转基因验证TaWRKY46-1的功能奠定了基础。 李明 丁博 牛有雄 吕芳芳 杨文丽 Silin Zhong 孙守钧 谢晓东关键词:小麦 WRKY转录因子 TA载体pEASY-T1 Simple在基因克隆中的新应用 被引量:4 2011年 在基因克隆操作中,由于常用克隆载体多克隆位点的酶切位点数目有限,造成一些DNA片段的克隆、连接受限。为解决这一问题,本文利用pEASY-T1 S imp le载体无酶切位点的特点,通过TA克隆的方法引入多个单一酶切位点,并对所构建的克隆载体进行了验证。最后证明,这种方法可高效构建含有不同多克隆位点的载体,克服了对常用克隆载体的依赖,大大提高了基因操作的灵活性和有效性。 杨文丽 丁博 王俊斌 李明 吕芳芳 谢晓东关键词:TA克隆 SIMPLE 多克隆位点