赵庆臻
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：聊城大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 不同品种小麦泛素结合酶TaUBC4基因的克隆及进化分析(英文)
- 2014年
- [目的]分析不同品种小麦泛素结合酶TaUBC4基因序列及进化特点。[方法]通过反转录PCR(Reverse transcription PCR,RTPCR)方法克隆了21个小麦品种的TaUBC4编码序列(Coding Sequence,CDS),测序后以中国春的UBC4(GenBank登录号:M28059)序列为参照,对各品种小麦基因的CDS及其编码的氨基酸序列进行了不同位点的突变频率及品种间的进化距离的分析;同时参考其他8种单子叶植物中与小麦UBC4同源的氨基酸序列构建了系统进化发育树。[结果]TaUBC4序列高度保守(DNA序列的相似度>94%,氨基酸序列相似度>96%),部分品种仅存在两个氨基酸的差异。系统发育树的构建揭示了各小麦品种间的进化关系。[结论]该研究揭示了不同品种间小麦TaUBC4基因序列及其氨基酸位点的多态性和进化特点,为深入研究小麦TaUBC4基因的进化及生物学功能奠定良好的基础,同时系统进化发育树的构建为复杂来源小麦品种的分类提供依据。
- 袁建龙郝英存张祥云赵庆臻
- 关键词：小麦泛素结合酶进化分析
- GID/CTLH复合体的研究进展
- 2022年
- GID/CTLH复合体是真核细胞中特有的具有E3泛素连接酶活性的大分子量蛋白复合体,深入分析其结构与功能具有重要的生物学意义。酵母GID复合体能帮助细胞快速应对微环境中营养状态的改变,同时在糖代谢调控中发挥重要作用;哺乳动物中的CTLH复合体能够迅速接收细胞外的不同信号,协调细胞发生可逆的变化,从而适应不断变化的环境,同时该复合体也涉及细胞内多个不同的生理途径的调控。本文综述了GID/CTLH复合体蛋白亚基的结构域、组成及功能的研究进展,旨在为该蛋白复合体的深入研究提供理论基础。
- 张秀飞李清平孙雯雯陈新王璐文赵庆臻
- 关键词：泛素连接酶生物学功能
- 小麦TaUBC基因泛素结合酶活性分析被引量：3
- 2018年
- 已报道的RNA水平研究表明TaUBC可能是小麦产量相关基因,生物信息学分析显示该基因属于泛素结合酶家族.荧光定量PCR显示TaUBC在小麦根茎叶中均有表达.为了验证TaUBC蛋白是否具有泛素结合酶活性,本文利用原核系统表达野生型TaUBC及三种点突变TaUBC^(C21S)、TaUBC^(C85S)、TaUBC^(C107S)蛋白,并对这些蛋白进行体外泛素化活性分析.结果证实TaUBC是一个有活性的泛素结合酶.另外,点突变C85S使得TaUBC丧失E2活性,C21S和C107S则对活性没有影响,证明其UBC结构域中第85位Cys是结合泛素的关键作用位点.
- 张祥云赵思语温潇王宁郭彦赵庆臻
- 关键词：泛素结合酶点突变
- 快速高效检测植物体内蛋白泛素化修饰研究方法
- 2019年
- UPS参与植物中绝大多数的信号转导通路。其中,一些激素的受体本身就是E3泛素连接酶,如茉莉酸(JA)受体COI1和生长素(auxin)受体TIR1都是F-box蛋白,它们通过特异性介导相应转录抑制子的泛素化降解来传递激素信号,但对于整个UPS体系而言,由于技术的限制,迄今为止仅见少量泛素连接酶与特异性底物间生化机制的报道。用大肠杆菌(Escherichiacoli)表达蛋白实施泛素连接酶泛素化修饰底物的体外实验是验证泛素连接酶/底物对的常用方法,但由于体外实验缺乏某些蛋白必需的转录后修饰,导致实验结果有时存在假阴性。利用农杆菌注射烟草(Nicotianabenthamiana)瞬时表达蛋白的方法,建立高效的植物体内检测蛋白泛素化系统,可以快速检测蛋白泛素化,包括检测泛素连接酶和底物的特异性相互作用、底物蛋白的自身泛素化、泛素连接酶对底物降解的促进作用、26S蛋白酶体抑制剂MG132对底物降解的抑制作用以及用植物内源表达蛋白进行体外泛素化反应。
- 刘利静赵庆臻谢旗于菲菲
- 关键词：E3泛素连接酶
- 植物蛋白的体外泛素化检测方法被引量：1
- 2019年
- 泛素激活酶(E1)、泛素耦联酶(E2)和泛素连接酶(E3)是蛋白质泛素化修饰的关键酶。在真核基因组上有大量基因编码这些泛素化相关的酶类或蛋白。检测这些泛素化修饰酶及其底物蛋白的生化特性和特异性是分析其生物学功能的重要内容。该文提供了一种简便快速检测体外泛素化反应的方法,不仅可通过检测对DTT敏感的硫酯键的形成来判断E2的活性、检测E3的体外泛素化活性,而且可以检测E2-E3和E3-底物的特异性。所用蛋白主要来源于拟南芥(Arabidopsisthaliana),包括分属于绝大多数E2亚家族的成员,可用于不同RING类型E3的活性检测。该方法不仅可以采用多种E2进行E3活性分析,而且可以分析不同组合的E2-RINGE3、RINGE3-底物的泛素化活性等,亦可应用于真核生物蛋白质尤其是植物蛋白的体外泛素化活性分析。
- 赵庆臻刘利静谢旗于菲菲
- 介导植物干旱应答的RING finger类型泛素连接酶的研究进展
- 2023年
- 干旱是影响植物生长和农作物产量的重要环境因素。泛素连接酶E3是蛋白质泛素化修饰的关键酶之一,对于植物生长发育和干旱胁迫应答具有重要的调控作用。RING finger类型泛素连接酶是其成员最多的一种类型。本文主要概述了植物对干旱胁迫的响应机制及植物中的RING finger类型E3,并详细综述了RING finger类型E3介导植物干旱胁迫应答的研究进展,可以供大家参考。
- 孙雯雯陈新马艳春赵庆臻
- 关键词：RINGFINGER泛素连接酶干旱脱落酸
- 果糖1,6-二磷酸酯酶研究进展被引量：5
- 2021年
- 果糖1,6-二磷酸酯酶(FBPase)是糖异生途径中的关键酶,广泛分布于植物、动物及微生物中,研究其功能调控的分子机制具有重要的生物学意义。酵母细胞中只有一种FBPase,它会通过液泡途径或蛋白酶体途径等不同方式降解;高等植物及动物中则有不同亚型的FBPase,分别在植物光合作用及蔗糖和淀粉的合成以及人类血糖调控等过程中发挥重要作用。综述了不同物种中FBPase的分布、生理功能及调控机理的研究进展,旨在为该酶的深入研究提供理论基础。
- 李清平张秀飞梁明郭彦赵庆臻
- 关键词：FBPASE糖异生
- 大麦黄矮病毒运动蛋白基因克隆及原核表达被引量：1
- 2011年
- [目的]构建大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-MP)基因的原核表达载体,并在E.coli-BL21中进行高效表达。[方法]根据GenBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的基因序列设计合成1对引物,应用RT-PCR技术从感染大麦黄矮病毒的叶片中扩增得到大麦黄矮病毒(BYDV)的运动蛋白(MP)基因,利用基因重组技术构建pGEX-4T-1-MP,将其转化至大肠杆菌表达菌株E.coli-BL21(DE3)中,用IPTG诱导重组质粒pGEX-4T-1-MP在E.coli-BL21中进行表达。[结果]对重组质粒进行酶切分析及序列测定,鉴定正确后,与GeneBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的MP基因序列比对分析,同源性达100%。在IPTG诱导下,高效表达出相对分子质量约43 kD的蛋白,蛋白质电泳(SDS-PAGE)结果表明,表达的蛋白条带与预期的GST-MP融合蛋白相符。[结论]成功构建了pGEX-4T-1-MP的原核表达载体,在E.coli-BL21中高效表达了MP,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础。
- 曲宇杰赵庆臻卢娇曹雪松
- 关键词：运动蛋白原核表达重组质粒基因重组
