董志华
- 作品数：11 被引量：41H指数：5
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西研究生教育创新计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 近十年广西地区鸡传染性支气管炎流行病学调查
- 引言鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)是养鸡业的一种急性、高度接触性传染病,常继发细菌感染,导致养殖场的严重经济损失。鸡传染性支气管炎病毒(IBV)容易变异,血清型众多,各血清型间交叉保...
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- IBV商品疫苗株与广西流行野毒株鉴别方法的建立
- 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)3'端非编码区和S1基因保守区域设计两对特异性引物,对H120、Ma5和4/91、M41等常用疫苗株以及26株广西田间分离株进行二重RT-PCR扩增,并进行该方法的特异性和敏感性试验,同...
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- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒疫苗株野毒株
- 2009-2017年广西地区鸡传染性支气管炎流行病学调查被引量：13
- 2019年
- 2009-2017年从广西地区采集了556份发病鸡群气管、肺脏以及肾脏样本,利用RT-PCR和基因测序等方法分离鉴定出64份鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)阳性样品,从检出率、发病日龄、季节、地域、症状和病变、与H120疫苗株的同源性等方面进行详细统计分析。结果显示:(1)2009-2017年间IBV检出率为11.5%,IBV单一感染检出率为35.9%,IBV混合感染检出率为64.1%,其中IBV与细菌混合感染率高达39.1%;(2)2~4周龄发病鸡群IBV检出率最高;(3)IB的高发阶段是当年的10月份到次年的4月份,具有明显的季节性;(4)广西14个地区中IBV检出率较高的地区分别为南宁市、钦州市、玉林市,检出率分别为14.7%、13.0%和9.9%;(5)IB症状和病变分别以呼吸道症状和肾脏肿大为主;(6)大部分IBV毒株(89.1%,57/64,)S1基因序列与H120疫苗株的相似性很低。本试验通过对广西地区近10年IBV流行病学调查,为今后广西防控IB提供科学依据,对国内其他地区制定有效的IB防控措施也具有重要的参考价值。
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- 关键词：鸡传染性支气管炎流行病学调查季节性呼吸道症状
- 鸡传染性支气管炎疫苗株与广西流行野毒株鉴别方法的建立被引量：7
- 2018年
- 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)3′端非编码区和S1基因保守区域设计两对特异性引物,对H120、Ma5和4/91、M41等常用疫苗株以及26株广西田间分离株进行二重RT-PCR扩增,并进行该方法的特异性和敏感性试验,同时进行了初步应用。结果表明,经RT-PCR扩增后,M41毒株得到约160bp的目的片段,Mass型毒株得到约370bp的目的片段,4/91型IBV毒株得到约480bp和345bp 2条目的片段,其他24株广西分离株得到1条大小在260bp^345bp的目的片段。特异性试验表明此二重RT-PCR方法不能扩增NDV、AIV、MDV、IBDV、ALV等,敏感性试验表明最低检测量达到100pg。该方法的临床应用表明,攻毒鸡病料阳性率达90%。研究结果表明了所建立的二重RT-PCR方法可以鉴别IBV疫苗株与广西流行野毒株,且特异性强,敏感度高。
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- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒疫苗株野毒株敏感性特异性
- 产蛋鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其遗传变异和血清型分析被引量：5
- 2020年
- 【目的】明确产蛋鸡源传染性支气管炎病毒(IBV)分离株(GX-YL170808)的结构基因及抗原变异情况,为广西种鸡场的传染性支气管炎(IB)防控提供科学依据。【方法】通过鸡胚尿囊液血凝试验、鸡胚侏儒化试验及3'端非编码区(3'-UTR)测序对分离株进行鉴定;采用RT-PCR扩增S1、E、M和N基因,以MegAlign和MEGA 6.0分别进行核苷酸序列相似性及系统发育进化树分析,运用RDP4和SimPlot对S1、E、M和N基因进行重组分析,利用NetNGlyc 1.0和NetOGlyc 4.0进行糖基化位点预测分析,并通过中和试验进行血清型鉴定。【结果】分离株的鸡胚尿囊液血凝试验呈阴性,鸡胚盲传5代后出现侏儒胚典型病变,其3'-UTR序列与IBV的3'-UTR序列相似性为99.13%;综合病鸡临床症状及其病理变化可确定该病毒为IBV,命名为GX-YL170808。GX-YL170808分离株S1、E、M和N基因的开放阅读框(ORF)长度分别为1620、327、675和1230 bp,对应编码540、109、225和410个氨基酸残基,与参考株的核苷酸序列相似性分别为60.4%~96.5%、81.8%~97.2%、85.6%~93.5%和85.7%~92.0%;GX-YL170808分离株的S1、M和N基因属于LX4型,而E基因属于LDT3型;4个结构基因内部均无重组区域;除S1基因同时具有N-糖基化和O-糖基化位点外,E、M和N基因均只有N-糖基化位点;S1蛋白裂解位点为HRRRR,与参考株LX4的裂解位点相同。GX-YL170808分离株属于血清4型,不同于常用的疫苗株H120(血清3型)和4/91(血清5型),也不同于广西主要侵害雏鸡的IBV优势血清型。【结论】产蛋鸡源IBV分离株并非疫苗株,其基因型和血清型均已发生变异,且该毒株的血清型不同于广西地区侵害雏鸡的优势血清型,提示了广西地区IB防控的严峻性及新型多价疫苗研发的紧迫性。
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- 关键词：产蛋鸡结构基因血清型
- 近十年广西地区鸡传染性支气管炎流行病学调查
- <正>引言鸡传染性支气管炎（infectious bronchitis,IB）是养鸡业的一种急性、高度接触性传染病,常继发细菌感染,导致养殖场的严重经济损失[1]。鸡传染性支气管炎病毒（IBV）容易变异,血清型众多,各血...
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- 文献传递
- 1985-2017年广西鸡传染性支气管炎病毒流行株演化变异分析
- <正>引言鸡传染性支气管炎(IB)给养禽业造成较大经济损失。鸡传染性支气管炎病毒(IBV)基因组容易发生变异,导致基因型和血清型众多复杂,且不同地区IBV流行株存在差异。因此,非常有必要对特定地区IBV流行株进行长期持续...
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- 文献传递
- 广西优势血清西优势血清型IBV代表株M基因在杆状病毒系统中的表达被引量：4
- 2017年
- 采用RT-PCR扩增鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西优势血清型代表性毒株GX-YL5的膜(M)蛋白基因,将其克隆至pFastBac^(TM)/HBM-TOPO杆状病毒转移载体,转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,获得重组杆粒rHBM-M;将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒;利用间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western-blot)鉴定表达的M蛋白。IFA检测可见重组杆状病毒感染后72h细胞出现特异性荧光,Westernblot检测可见大小约为26ku的特异性蛋白带,表明该重组M蛋白在Sf9昆虫细胞中成功获得表达。研究为IBVM蛋白的生物学功能、IBV诊断试剂和新型疫苗制备等奠定基础。
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- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒M基因杆状病毒
- 广西地区规模化鸡场禽偏肺病毒感染情况的血清学调查被引量：11
- 2017年
- 为了调查广西禽偏肺病毒(aMPV)的感染情况,本研究于2015年7月~12月期间采集广西南宁(A和B鸡场)和玉林(C和D鸡场)4个规模化鸡场的不同品种、不同周龄的种鸡和肉鸡血清共480份,进行aMPV抗体检测。检测结果显示这4个规模化鸡场的种鸡群在雏鸡阶段aMPV抗体阳性率为15%~66.67%,并且整个产蛋期aMPV抗体阳性率均为90%~100%;所调查的南宁和玉林地区3个鸡场的肉鸡群均存在aMPV感染,玉林地区C场肉鸡群的aMPV抗体阳性率和平均抗体滴度均高于南宁地区A和B场;检测的6个不同品种的种鸡群均存在aMPV感染,其中aMPV抗体阳性率以灵山土鸡和清远麻鸡最高(100%),铁脚麻鸡相对较低,但也高达78%。本研究表明在所调查的广西规模化鸡场鸡群中,aMPV感染普遍,种鸡感染尤为严重,尤其是玉林地区。本研究为aMPV感染的研究和防治积累了数据资料。
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- 关键词：血清学调查鸡群
- 一株鸭源传染性支气管炎病毒的分离鉴定及结构蛋白基因和血清型分析被引量：6
- 2019年
- 【目的】对从广西某鸭场发生呼吸道感染的11天龄樱桃谷肉鸭分离到的病毒株进行鉴定,并探索此鸭源病毒分离株的遗传变异情况。【方法】通过血凝试验、鸡胚接种实验、3?端非编码区(3'UTR)基因扩增与序列测定对分离株进行鉴定,并对该分离株的结构基因S1、E、M和N分别进行序列测定以及相似性、系统进化树分析和血清型鉴定。【结果】血凝试验为阴性,接种鸡胚盲传5代后出现侏儒胚,3?UTR基因测序结果表明为传染性支气管炎病毒(IBV)序列。该分离株S蛋白的裂解位点为RRSRR,S1、E、M和N基因与IBV毒株H120、4/91、LTD3核苷酸相似性分别为:78.6%–99.7%、85.4%–100.0%、91.6%–93.2%、86.7%–91.7%。除N基因存在点突变外,S1、E和M基因均存在氨基酸的突变、插入和(或)缺失。系统进化树分析显示,其S1基因属于4/91型,E、M和N基因均为LDT3型。血清型分析表明,该分离株的血清型不同于疫苗株H120和4/91。【结论】此鸭源病毒分离株为IBV,且该分离株的基因型与血清型均发生了变异。本研究结果暗示禽类传染性支气管炎的防控面临着更严峻的挑战。
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- 关键词：传染性支气管炎病毒基因型血清型
